蛋白质分离提纯方法
1、盐析法:盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中,溶解度会随盐浓度的增高而上升,但当盐浓度增高到一定数值时,使水活度降低,进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和,水化膜逐渐被破坏,最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。2、有机溶剂沉淀法:有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二:其一、与盐溶液一样具有脱水作用;其二、有机溶剂的介电常数比水小,导致溶剂的极性减小。3、蛋白质沉淀剂:蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用,常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。4、聚乙二醇沉淀作用:聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。......阅读全文
生化分离技术——柱层析(colum-chromatography)分离(2)
由于某些原因,用到的淋洗剂多是大包装的(便宜嘛),我们这里是用10升或25升的塑料桶装的,就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质,其他的杂质就可想而知了,所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料时就可以免去这一步了,反正下面还有提纯的方法。另外溶剂在过柱子后
管式分离机的离心分离技术
管式分离机的离心分离技术是借助于离心机旋转所产生的离心力,根据物质颗粒的沉降系数、质量、密度及浮力等因子的不同,而使物质分离的技术。当物料进入管式分离机分离筒后,因不同组份的物质,由于其密度不同,故在离心力场中受力有差别, 直接导致其在离心力场的运动轨迹和运动速率的不同。如图, 管式分离机分离筒(转
细胞的离心分离基础和分离实例(一)
利用细胞的特性[尺寸、密度、电特性、表面(抗原)性质,光散射特性等等]可以用各种方法分离和纯化细胞。离心分离是利用不同尺寸和密度的细胞在离心场中沉降行为的不同,从组织匀浆或血液中分离纯化的技术。用离心技术分离和纯化细胞主要依赖的方法是差分离心、速率-区带密度梯度离心、等密度离心和利用特殊转头的细胞浮
细胞的离心分离基础和分离实例(四)
例2. 从人血中分离红细胞,单核(白)细胞,中性(白)细胞 i. 新鲜人血(3~5)ml 用抗凝剂处理。 ii. 15ml 离心管中先注入5ml 分离液Polymorphprep(Nycomed Pharma A/S 公司产品), 然后铺上用抗血凝剂处理过的人全血5ml 。 iii. 台式低速离心
关于膜分离过程—纳滤分离的应用介绍
纳滤分离作为一项新型的膜分离技术,技术原理近似机械筛分。但是纳滤膜本体带有电荷性。这是它在很低压力下仍具有较高脱盐性能和截留分子量为数百的膜也可脱除无机盐的重要原因。 纳滤分离愈来愈广泛地应用于电子、食品和医药等行业,诸如超纯水制备、果汁高度浓缩、多肽和氨基酸分离、抗生素浓缩与纯化、乳清蛋白浓
细胞的离心分离基础和分离实例(七)
例7 鼠肝主质细胞的多倍体级浮选分离 l 设备及样品:同例(5) l 转速1350rpm(~210g) l 温度4℃ l 初始充样流速12ml/min,直至细胞充满离心室 l 分别用流速19,32,41(ml/min)收集I,II,III 细胞,收集量分别为100ml,15
细胞的离心分离基础和分离实例(二)
ⅰ. 差分离心: 在不存在密度梯度条件下分离细胞是这种方法的主要特点,差分离心可以是利用地球重力(1g),也可以是利用低速离心分离组织匀浆。在重力或离心力作用下一些比较大的细胞沉降速度较快,当它们已变成沉淀时,大部分比较小的的细胞由于沉降速度慢而仍留在上清液中。很明显在大的细胞变成沉淀时一部分接近
组织的分离实验_EDTA-消化分离法
实验方法原理EDTA是一种非酶性消化物,常用不含Ca2+和Mg2+的BSS 配成0.02%的工作液。关于EDTA的作用机制一般认为是:一些组织,尤其是上皮组织,在生存中需要Ca2+和Mg2+才能维持组织的完整性。EDTA能从这些组织生存环境中吸收这些离子,形成螯合物,能促进细胞相互分离。EDTA 作
生化分离技术——柱层析(colum-chromatography)分离(1)
常说的过柱子应该叫柱层析分离,也叫柱色谱。我们常用的是以硅胶或氧化铝作固定相的吸附柱。由于柱分的经验成分太多,所以下面我就几年来过柱的体会写些心得,希望能有所帮助。柱子可以分为:加压,常压,减压。压力可以增加淋洗剂的流动速度,减少产品收集的时间,但是会减低柱子的塔板数。所以其他条件相同的时候,常压柱
质壁分离与质壁分离复原及K+、Ga²+对质壁分离的影响
1、 原理 植物 细胞的质壁分离现象与其生活的原生质特别是原生质表层的性质密切相关,质壁分离可用于研究原生质的透性,粘滞性及弹性等,在细胞生理及抗性生理上有重要作用。可用质壁分离法测细胞的渗透性,也可鉴别细胞的死活,在水分生理中也及其重要,活细胞是一个渗透系统,当与外界高渗溶液接触时,细胞内的水
质壁分离与质壁分离复原及K+、Ga²+对质壁分离的影响
1、 原理植物细胞的质壁分离现象与其生活的原生质特别是原生质表层的性质密切相关,质壁分离可用于研究原生质的透性,粘滞性及弹性等,在细胞生理及抗性生理上有重要作用。可用质壁分离法测细胞的渗透性,也可鉴别细胞的死活,在水分生理中也及其重要,活细胞是一个渗透系统,当与外界高渗溶液接触时,细胞内的水外渗而发
膜分离技术介绍及其应用(二)
膜分离操作基本工艺流程:由于膜分离过程是一种纯物理过程,具有无相变化,节能、体积小、可拆分等特点,使膜广泛应用在发酵、制药、植物提取、化工、水处理工艺过程及环保行业中。对不同组成的有机物,根据有机物的分子量,选择不同的膜,选择合适的膜工艺,从而达到最好的膜通量和截留率,进而提高生产收率、减少投资规模
蛋白质分离纯化设备的产品特点和应用范围
产品特点 1、处理过程为单纯物理过程,无任何相变。设备操作温度低,避免了传统工艺的种种弊端; 2、系统采用先进的膜分离技术,工艺简单,运行稳定可靠,处理效率高; 3、可以对生产废水中的有用物质进行提纯回用,实现经济、环保双赢; 4、设备投资少,运行费用低[1] 应用范围 1、 化学物
“太阳能级多晶硅材料提纯关键技术研发”项目通过验收
7月23日,福建省科技厅组织专家,对中科院福建物质结构研究所黄丰研究员主持完成的省科技重大专项专题“太阳能级多晶硅材料提纯关键技术研发及检测服务平台的标准化建设”进行了验收。在听取项目组的工作汇报后,专家组认为,该专题已按计划完成各项研发任务,一致同意通过项目验收。 本专题针对太阳能级多晶
施一公再发Science-克服提纯问题-发布最新酵母剪接体结构
2018年5月25日,清华大学生命学院施一公教授研究组就剪接体的组装机理与结构研究于《科学》(Science)杂志以长文形式再次发表重大研究成果。这篇题为《完全组装的酿酒酵母剪接体激活前结构》(Structures of the Fully Assembled Saccharomyces cer
艾卡旋转蒸发仪是如何完成减压蒸馏提纯实验的呢
旋转蒸发仪可以在恒温加热、负压条件下旋转形成薄膜,同时呢,再对蒸发出的溶媒进行冷凝回收,特别适合对热敏性物料进行浓缩、结晶、分离和回收等,是生物制药、化工、食品等行业科研、中试及生产的重要设备。那么,生物制药店、化工及食品等行业使用旋转蒸发仪是如何完成减压蒸馏提纯实验的呢? 旋转蒸发仪做减压蒸馏提
关于锂电池负极材料石墨的高温法提纯的特点介绍
高温法提纯石墨,产品质量高,含碳量可达99.995%以上,这是高温法的最大特点,但同时耗能大、对设备要求极高,需要专门进行设计,投资大,对提纯的石墨原料也有一定的要求,只有应用于国防、航天、核工业等高科技领域的石墨才用此方法进行提纯。
实验室试剂试剂必要性及方法
必要性根据所给定的主成分含量、有关物理常数,由使用者自己判断是否满足工作需要,必要时,可由使用者作相应的提纯。质量指标清晰可靠。此类试剂非常适用于合成制备。国际上通行的方法是按照化学品的主含量、物理常数等来标示化学试剂的级别和纯度。一般认为,当主含量、沸点、熔点、密度、折光,甚至光谱都已知的情况下,
有机化合物鉴别方法
在药品的生产、研究及检验等过程中,常常会遇到有机化合物的分离、提纯和鉴别等问题。有机化合物的鉴别、分离和提纯是三个既有关联而又不相同的概念。分离和提纯的目的都是由混合物得到纯净物,但要求不同,处理方法也不同。分离是将混合物中的各个组分一一分开。在分离过程中常常将混合物中的某一组分通过化学反应转变成新
酸碱萃取
酸碱萃取是一种化学分离技术,根据酸或碱不同的化学性质,经一系列的萃取过程后以达致提纯效果。中文名:酸碱萃取性 质:化学分离技术根 据:酸或碱不同的化学性质作 用:萃取过程后以达致提纯效果酸碱萃取是化学合成后一连串提纯过程中的常见步骤,也多见于离析过程中。生成物中大部分的中性、酸性及
牙髓干细胞的分离培养——牙隨组织的分离
实验材料牙试剂、试剂盒灭菌无Ca2+和Mg2+的PBS(PBSA)MSC培养基消毒液(如聚维酮碘)仪器、耗材非灭菌使用高速牙科钻时的装备(如空气压缩机)培养皿精细镊(小号和大号)牙科碳化钻头牙挖器高速牙科钻实验步骤(a)用PBSA洗三遍,充分清洁牙齿表面。(b)用消毒液消毒,然后再用PBSA充分清洗
密度梯度分离法分离单个核细胞(MNCs)
试剂和材料:1. 合适的培养基或冷冻液;2. PBSA;3. Ficoll-Hypague;4. 巴氏吸管;5. 50ml离心管;实验方法:1. 将脐血样品用PBSA按1:1比例稀释;2. 将15ml Ficoll-Hypague吸入50ml离心管;3. 将30mlPBSA稀释的脐血样品缓慢地加到F
衡量离心分离机分离性能的指标
离心机和沉降离心机,主要依靠加大转鼓直径来扩大转鼓圆周上的工作面;分离机除转鼓圆周壁外,还有附加工作面,如碟式分离机的碟片和室式分离机的内筒,显著增大了沉降工作面。 此外,悬浮液中固体颗粒越细则分离越困难,滤液或分离液中带走的细颗粒会增加,在这种情况下,离心分离机需要有较高的分离因数才能有效地
植物细胞的质壁分离与质壁分离复原
【原理】 生长的植物 细胞是一个渗透系统,活细胞的原生质及其表层具有分别透性,原生质层内部含有一个大液泡,具有一定的溶质势。当细胞与外界高渗溶液接触时,细胞内的水分外渗,原生质随着液泡一起收缩而发生质壁分离,其后,当与清水(或低渗溶液)接触,或当外面的溶质进入时,具有液泡的原生质体就又吸水
Namocell单细胞分离仪应用介绍——藻类单细胞分离
Namocell单细胞分离仪最新应用:随着人们对环境研究的不断深入,研究人员逐渐将目光转向藻类的单细胞层面:有些需要对藻类进行单细胞级别的分析(如藻类单细胞测序等),也有需要对单细胞藻类进行培养。这样就面临一个棘手的问题,那就是如何获取藻类的单个细胞。通常实验室里的方式,是在显微镜下用毛细管吸取。这
微生物分离纯化实验——平板划线分离法
实验方法原理该方法操作简便,普通用于微生物的分离与纯化。其基本原理包括两方面:1. 选择适合于待分离微生物的生长条件,如营养、酸碱度、湿度和氧等要求或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长,而抑制其他微生物生长的环境,从面淘汰一些不需要的微生物。2. 微生物在固体培养基上生长形成的单个菌落可以是由一个
蛋白质分离实验_分离未知-pI-蛋白质
用 CE 进行 IEF分离是选择随后用于在非衍生毛细管柱上分离蛋白的缓冲液系统的有效的第一步。如果没有检测到蛋白质,可能是被吸收到柱的硅表面。在离子去垢剂如 SDS 存在的情况下重复分离过程,这样就会用负电荷包被蛋白质从而阻止吸收。但是,这意味着蛋白质只能依据大小的不同而进行分离。知道蛋白质的 pI
如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞?
淋巴细胞分离液可用于体外分离外周淋巴血细胞,也可以从其他来源中分离单核细胞,包括脐带血细胞和骨髓细胞,适用于从血液及组织匀浆中分离所需细胞,在医疗和医学生物中广泛应用。其他人及动物多种比重细胞分离液。 如何用淋巴细胞分离液分离单个核细胞? 1)分离外周血中的单个核细胞 1.抽取正常人静脉血加
关于膜分离过程—纳滤分离技术的特点介绍
关于膜分离过程—纳滤分离技术的特点:随着对环境保护和资源综合利用认识的不断提高,人们希望在治理废水的同时实现有价物质的回收,比如:大豆乳清废液中含有1%左右的低聚糖和少量的盐,亚硫酸盐法制备化纤浆和造纸浆过程出现的亚硫酸钙废液中含有2%~2.5%的六碳糖和五碳糖,制糖工业中出现的废糖蜜中含有少量
蛋白质分离纯化应用范围
1、 化学物质的分离、提纯、浓缩;2、染料、染料中间体的浓缩及脱盐3、超细粉体生产过程中的产品回收;4、生产废水中有用物质的提纯、回用;5、海洋生物提取物的浓缩、提纯6、氨基酸、蛋白质的浓缩、提纯