病毒的分离实验

实验步骤 标本的采集:病毒分离常用的标本有血液,脑脊液,粪便,直肠拭子,咽喉含漱液,咽拭子,尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液,咽拭子;消化道疾病取粪便,直肠拭子;神经系统疾病取脑脊液,粪便等。采取标本时应避免污染,有些标本如粪便,咽喉洗液,虽本身含有大量杂菌,但为保持良好工作习惯,仍应用无菌手续操作,同时可避免标本之间相互污染及保护工作人员的安全。标本取得后应放于消毒容器内,外面贴上患者姓名及采取日期,同时用专门表格登记标本编号,患者姓名,性别,年龄,住址,临床诊断,发病日期,症状及采取标本日期等。 标本采集具体方法如下:1、 粪便标本:挑取小指头大的粪便(约2 克左右)放入无菌广口瓶或硬纸盒中。2、 直肠拭子:如果急于需要得到粪便标本作病毒分离,可采取直肠拭子,其方法为用无菌棉拭子浸入Hank‘s 液或生理盐水,塞入直肠内,略加转动,待其沾有肠内容物,取出置于......阅读全文

病毒的分离实验

实验步骤 标本的采集:病毒分离常用的标本有血液,脑脊液,粪便,直肠拭子,咽喉含漱液,咽拭子,尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液,咽拭子;消化道疾病取粪便,直肠拭子;神经系统疾病取脑脊液,粪便等。采取标本时应避免污染,有些标本如粪便,咽喉洗液,虽本身含有大量杂菌,但为保

病毒的分离实验_标本法

实验步骤标本的采集:病毒分离常用的标本有血液,脑脊液,粪便,直肠拭子,咽喉含漱液,咽拭子,尸检组织等。所取标本的种类视疾病性质而异。如呼吸道疾病常取咽喉洗液,咽拭子;消化道疾病取粪便,直肠拭子;神经系统疾病取脑脊液,粪便等。采取标本时应避免污染,有些标本如粪便,咽喉洗液,虽本身含有大量杂菌,但为保持

植物病毒分离方案

方案一:带病毒的植物叶、茎、果实、根等粉碎后—20℃冰冻后制成匀浆→用0.5M,PH7.0柠檬酸缓冲液抽提→双层纱布过滤→滤液加入6%PEG(MW6,000)及3%Nacl,充分搅拌40分钟,置冰箱4℃过夜→高速冷冻离心机8×50ml转头,7000rpm,4℃离心20分钟,弃上清,取沉淀→沉淀是浮于

腺病毒的病毒分离与鉴定

  1、分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物,粪便和尿液等,加抗生素处理过夜,离心取上清接种敏感细胞(293、Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝现象,最突出的表现是许多病变细胞聚在一起呈葡萄串状。  2、病毒鉴定 用荧光标记的

流感病毒的形态及实验室分离纯化

引起人类流感的病毒是冠状病毒。冠状病毒只感染脊椎动物。 感染流感病毒后会引起人与动物的呼吸道、消化道与神经系统病患。 流感病毒的代表型在上世纪 60年代被查明, 60年代后对各种流感病毒的完整形态已进行了深入研究。冠状病毒的基因图谱序列(包括各种蛋白酶和病毒内部的核甘酸序列)已被查明。 

分离核仁实验——分离核仁

实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl

疱疹病毒的病毒分离和鉴定

  病毒分离培养是当今临床上明确诊断疱疹病毒感染的可靠依据。可采集皮肤、生殖器等病变部位的水疱液、脑脊液、角膜刮取物、唾液等标本,接种人二倍体成纤维细胞株WI38及其它传代细胞株如Vero、BHK等,经24~48小时后,细胞则出现肿胀、变圆、细胞融合等病变。然后用HSV-1和HSV-2的单克隆抗体作

线粒体分离实验

从组织培养细胞中分离线粒体 从组织中分离线粒体 用蔗糖密度梯度法纯化线粒体             实验材料 细胞

分离核仁实验

实验材料 肝脏试剂、试剂盒 NKM仪器、耗材 粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤 1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L

分离核仁实验

分离核仁从人肝脏或胎盘组织中分离核仁HeLa细胞细胞核或核仁的制备高镁法分离核仁实验材料肝脏                                                          试剂、试剂盒NKM                                    

分离核仁实验

分离核仁 从人肝脏或胎盘组织中分离核仁 HeLa细胞细胞核或核仁的制备 高镁法分离核仁             实验材料 肝脏

线粒体分离实验

实验材料 细胞试剂、试剂盒 RSBMS 缓冲液仪器、耗材 Dounce 匀浆器实验步骤 1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210

正粘病毒分离和鉴定

正粘病毒诊断 根据流感的典型临床症状及其高度的接触传染性、急性发作和迅速传播等特点,常可作出初步诊断。但为了弄清是由哪一型或哪一亚型病毒引起的,则必须进行实验诊断,即必须进行病毒分离和鉴定或作血清学检查,才能获得确诊,尤其是在首次发现疫情的地区。 (1)病毒的分离和鉴定 A.标本的采集和处理〓

RNA分离与分析实验_分离RNA

实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60

超速离心法纯化病毒实验——界面离心分离法

实验方法原理离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒蔗糖溶液仪器、耗材离心机实验步骤(1) 取浓缩后的病毒悬液 5 ml, 加入 1/5 或 1. 66/5 体积的 600 g/L 的蔗糖溶液,使其含蔗糖10%~15%, 摇匀。

冠状病毒及其离心分离

一、冠状病毒概述:冠状病毒是引起感冒的主要病原,它只感染脊椎动物,可引起人与动物的呼吸道、消化道与神经系统病患。冠状病毒的代表株早已被科学家查明,典型的如B814(1965,Tyrrell),229E(1996, Hamre),OC 43(1967,Melntosh)等等,此后,Almeida对冠状

冠状病毒及其离心分离

一、冠状病毒概述:冠状病毒是引起感冒的主要病原,它只感染脊椎动物,可引起人与动物的呼吸道、消化道与神经系统病患。冠状病毒的代表株早已被科学家查明,典型的如B814(1965,Tyrrell),229E(1996, Hamre),OC 43(1967,Melntosh)等等,此后,Almeida对冠状

埃博拉病毒抗体被成功分离

  近日,记者从清华大学获悉,该校医学院张林琦教授研究组与呼吸疾病国家重点实验室陈凌教授课题组合作,成功分离出三株具高中和能力的埃博拉病毒抗体。相关论文发表在近日出版的英国《自然》杂志旗下《科学报告》上。   5月20日,张林琦接受科技日报记者采访时表示:“我们判断抗体是否有效,有两种方式——体外实

我国首次分离出裂谷热病毒

  30日,记者从国家质检总局获悉,该局科研人员已成功从全国首例输入性裂谷热患者样本中分离出裂谷热病毒,与此同时,军事医学科学院也成功分离获得裂谷热病毒,这是我国首次分离得到裂谷热病毒。  裂谷热是由裂谷热病毒引起的一种病毒性人畜共患病,最早于1931年在肯尼亚确定,在过去的15年,已有30多个国家

鸡胚分离实验

实验方法原理 无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤 材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮

解析多肽分离实验

实验方法原理 实验材料 多肽混合物试剂、试剂盒 0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液(pH 2.30 存储于 4℃)0.1 mol/L 氢氧化钠仪器、耗材 75 μm 内径的融合硅毛细管柱 CE 仪器实验步骤 1. 用以下溶液冲洗进行预处理毛细管:10 倍柱体积的 0.1 m

分离小鼠胚胎实验

            实验方法原理 胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经

mRNA-的分离实验

实验方法原理 哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纤维素亲和层析法从大量的细胞RNA中分离mRNA。实验步骤1.  用0.1 mol/L NaOH悬浮0.5~1.0 goligo(dT)-纤维素。 2.  将悬浮液装入灭菌的一次性层

液泡的分离实验

仪器、耗材:紫洋葱                                                                  紫萝卜叶                                                                  蔗糖溶液

组织的分离实验

试剂、试剂盒 Hanks仪器、耗材 镊子网筛碟皿吸管注射器培养瓶实验步骤 一、切割分离法在进行组织块培养时,可采用剪切法,一般多剪切成1 mm3大小的块。具体操作如下:1.  无菌切取1 cm3组织一块,置入青霉素瓶或小烧杯中,左手斜持容器,右手持眼科尖剪或弯剪(剪柄较长为好)伸入容器中,反复剪切组

组织的分离实验

机械分散法 胰蛋白酶消化消化分离法 胶原酶消化分离法 离心分离法 EDTA 消化分离法             试剂、试剂盒

鸡胚分离实验

实验方法原理无菌操作从蛋中取出鸡胚放入培养皿中。实验步骤材料:无菌材料DBSS: 取材用 BSS(含有高浓度抗生素的 BSS,见附录 I),装在 25〜50 ml 的螺口试管或通用容器内BSS:50 ml 盛于无菌烧杯中,用于冷却烧过的器械20〜50 ml 小烧杯或蛋杯直头和弯头镊子9 cm 皮氏培

解析多肽分离实验

CE 分离来自复合体混合物如蛋白酶解产物的特定多肽尤其有用。以下的方案阐述使用低压样品注射的 P/ACE 5000 CE 仪器(Beckman) 的用法。但其他仪器也可以依据制造商的操作指南进行同样的分离。实验材料多肽混合物试剂、试剂盒0.05 mol/L 和 0.25 mol/L 磷酸钠缓冲液(p

分离小鼠胚胎实验

分离小鼠胚胎可以用于:(1)体外培养小鼠胚胎,摸索适宜培养条件。(2)使用胚胎进行发育生物学研究。实验方法原理胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期,三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟,称神经沟,沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合,致使神

mRNA-的分离实验

oligo(dT)-纤维素亲和层析法             实验方法原理  哺乳动物细胞的绝大部分mRNA在其3‘ 端均有一poly(A)尾,因此可以