分离42和55之间的蛋白用多少浓度的胶比较好
一般凝胶浓度低是容易出现条带模糊的情况。个人手法是:用好点的材料制备凝胶来进行分析。10%的浓度可以用来分离这两种蛋白,将电泳电压在后半程调高可改善条带清晰度。也可以调高分离胶浓度至12%,但差别会较10%的更小。是在不行可以考虑用梯度胶分。“用好点的材料”是说的丙烯酰胺和甲叉。“将电泳电压在后半程调高改善条带扩散”,分离胶用135V,缩短电泳时间。两种浓度的差别也不是太大。为了扩大差别,可以通过预染marker来控制电泳时间,将小分子的蛋白跑出去,用更多的凝胶长度来加大两者的差别。不过电泳时间延长对条带清晰程度会有影响。样品的pH也会对条带的清晰程度有影响,以前做分子量和差不多大的酵母样时,条带就有些模糊。其实有时只要能将两者区分开,不一定非要追求最佳分离效果。......阅读全文
蛋白质分离和分析——凝胶蛋白质染色
实验步骤 基 本 方 案 1 考马斯亮蓝染色检测范围为〇.3〜lMg 每蛋白质条带。材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)聚丙烯酰胺凝胶(单 元 12. 3)考马斯亮蓝、银染用固定液考马斯亮蓝染液甲醇/乙酸脱色液7 % (V /V ) 水乙酸Whatman 3M M 滤 纸(可选)干 胶 仪(可选
蛋白质免疫印迹实验组织蛋白提取
组织蛋白提取 1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、一个大冰盒、一个1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(最好高温高压处理)、新鲜组织或保存于-80℃冰箱组织、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、两套研磨棒(最好高温高
明胶、胶原蛋白和水解胶原蛋白的不同之处
明胶、胶原蛋白和水解胶原蛋白并不相同。明胶是胶原在高温作用下的变性产物,其组成复杂,相对分子质量分布宽,由于高温造成胶原蛋白变性,胶原分子的3股螺旋结构被破坏,但可能有部分α链的螺旋链还存在,因此一定浓度的明胶溶液能成凝胶状。在食品工业、摄影和制药业中被广泛应用。据报道,全世界每年生产的明胶产品
蛋白酶水解蛋白质的作用原理
蛋白酶按水解底物的部位可分为内肽酶以及外肽酶,前者水解蛋白质中间部分的肽键,后者则自蛋白质的氨基或羧基末端逐步降解氨基酸残基。蛋白酶是水解蛋白质肽链的一类酶的总称。按其水解多肽的方式,可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶将蛋白质分子内部切断,形成分子量较小的䏡和胨。外肽酶从蛋白质分子的游离氨基(氨
比较组蛋白与非组蛋白的特点及其作用
组蛋白:特点:进化上的极端保守性;无组织特异性;肽链上氨基酸分布的不对称性;组蛋白的修饰作用。作用:1,核小体组蛋白,帮助DNA卷曲形成核小体的稳定结构2,H1组蛋白,在构成核小体时期连接作用,赋予染色体极性3,对染色体DNA的包装起着重要作用非组蛋白:特点:非组蛋白是一类酸性蛋白质,富含天冬氨酸和
蛋白与蛋白相互作用分析—免疫共沉淀
实验原理免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation,Co-IP)是以抗体和抗原之间的特异性结合以及细菌蛋白质的“protein A/G"特异性地结合抗体Fc段的现象而开发出来的方法,是研究蛋白质相互作用的经典方法,主要用于确定两种蛋白质在完整细胞内是否存在生理性相互作用。其原理是:当
抗hpv生物蛋白隐形膜和蛋白敷料的区别
抗HPV生物蛋白隐形膜 抗HPV生物蛋白敷料是由美国纽约血液中心基础研究、分子设计,复旦大学医学分子病毒学教育部/卫生部重点实验室研发出的一款抗HPV病毒制剂,最终经国内知名的三甲教学医院山西医科大学临床研究检测。世界卫生部已确定HPV病毒是引起宫颈癌的唯一因素。产品获得国家级发明ZL,目前是国内唯
蛋白质谱测定蛋白质的基础原理
蛋白质是一条或者多条肽链以特殊方式组合而成的生物大分子,大多数蛋白质会自然折叠为一个特定的三维结构。蛋白质的结构层次可以分为一级结构、二级结构、三级结构和四级结构: 一级结构:组成蛋白质多肽链的线性氨基酸序列。 二级结构:依靠不同氨基酸之间的C=O和N-H基团间的氢键形成的稳定结构,主要为α
甲胎蛋白高=肝癌?你懂甲胎蛋白吗?
某单位女员工体检发现血清甲胎蛋白高达155ng/mL,怀疑是不是有肝癌。详细询问对方的情况,该女工25岁,刚入职半年,肝功无异常。进一步了解情况,该女工对自己的甲胎蛋白升高也很紧张,申明自己没有得过肝炎,最后得知,该女工已怀孕两个多月,为了怕影响转正,对外未敢声张。一切明了,分析该女工血清甲胎蛋白升
用核蛋白做western,选什么蛋白做内参照
当实验样品中只是核蛋白,而不是细胞总蛋白提取液时,可以用组蛋白H(Histone H),或者核纤层蛋白(nuclear lamina protein)等为核内参抗体。除了这些,其它常见的核蛋白内参还有K70, K80, Lamin A和B
蛋白质免疫印迹悬浮细胞蛋白提取简介
1)所需器材:制冰机、标记笔、两套1.5ml EP管(最好高温高压处理)、两个大冰盒、长满细胞的培养瓶、10ml离心管、手套、移液枪、吸头(最好高温高压处理)、滤纸、保存于4℃冰箱的PBS(最好高温高压处理)、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一种蛋白酶抑制剂,剧毒)、离心机、烧杯、4×SD
蛋白酶的测定实验——酪蛋白测定法
实验方法原理实验中的氨基酸由蛋白酶从酪蛋白中水解下来。在分离出 TCA 沉淀中未分解的蛋白质后,用分光光度测定的方法对其上清液分析,氨基酸来自于酪蛋白。依据酪蛋白校准曲线,已对其量化。这个鉴定不是很敏感。实验材料酶样品试剂、试剂盒Tris-HClNaOH乙酸三氯乙酸L-酪氨酸酪蛋白底物仪器、耗材分光
蛋白酶的作用及蛋白酶的种类
蛋白酶是一种活性酶,它分为很多种,每种都可以用作不同的地方。下面我为大家带来了蛋白酶的作用,仅供参考,谢谢阅读。 蛋白酶的种类 1.木瓜蛋白酶 木瓜蛋白酶,是一种蛋白水解酶,可将抗体分子水解为3个片段。是番木瓜中含有的一种低特异性蛋白水解酶,活性中心含半胱氨酸,属巯基蛋白酶,应用于啤酒及
硫氧还原蛋白融合蛋白的表达和纯化实验
基本方案 实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒
比较组蛋白与非组蛋白的特点及其作用
组蛋白:特点:进化上的极端保守性;无组织特异性;肽链上氨基酸分布的不对称性;组蛋白的修饰作用。作用:1,核小体组蛋白,帮助DNA卷曲形成核小体的稳定结构2,H1组蛋白,在构成核小体时期连接作用,赋予染色体极性3,对染色体DNA的包装起着重要作用非组蛋白:特点:非组蛋白是一类酸性蛋白质,富含天冬氨酸和
重组人血白蛋白将替代血源人血白蛋白
记者日前从华北制药了解到:目前,重组人血白蛋白已经在该公司吨级生产线上完成最后的分装。其中蛋白含量高于99%,无任何外源性病毒风险,这不仅可以替代血源人血白蛋白,更是对血源人血白蛋白质量、安全的超越。重组人血白蛋白成功产业化,将极大缓解我国人血白蛋白市场极度短缺的局面。 据介绍,重组人血白
蛋白质样品中蛋白类杂质的检测方法
摘要:本文围绕蛋白质纯度的重要性,阐述了蛋白类杂质的检测方法,包括电泳法,色谱法,沉降速率测定法,质谱法,光散射法。任何方法都不能直接定量蛋白质样品的纯度。无论最终目的是为了解释分析数据、验证过程质量,还是为了确保生物制剂产品的安全性,样品纯度的测定都是至关重要的环节。随着蛋白类生物制品的发展,蛋白
抗人球蛋白试验间接抗人球蛋白试验
原理:抗人球蛋白试验 (antiglobulin test,A GT),又称 Coombs 试验,是检查不完全抗体的 一种很好方法。用人血清免疫家兔,产生抗人球蛋白抗体,即抗人球蛋白血清。将抗人球蛋白血清。(AGS) 加入已经致敏的红细胞盐水悬液中,红细胞表面的抗体球蛋白 (即使其致敏的 不完全抗体
浅谈预染蛋白Marker与未预染蛋白Marker
在Western实验中,蛋白Marker可以监控蛋白质在SDS-PAGE中的迁移,监控蛋白的转膜效率,确定蛋白分子量大小。选择正确的蛋白Marker是western blot实验成功的必备条件之一。蛋白Marker分为两种:一种是未预染的Marker,即宽分子量蛋白标准,高分子量蛋白标准及低分子量蛋
表观遗传之组蛋白修饰—组蛋白乙酰化
大家好,我又来啦~~今天给大家放送的是表观遗传之组蛋白修饰相关的内容噢,组蛋白修饰也是一个比较复杂的过程,今天呢,我们就给大家讲讲组蛋白乙酰化及相关的产品。 一 组蛋白修饰 真核生物染色质的基本结构单位是核小体,它由约 146 bp DNA 缠绕组蛋白八聚体组成,其中组蛋白八聚体包含 2 (H2
海底蛋白爱“吃光”
组寻找“吃光”蛋白质的科学家,在加利利海海底偶然发现了50年来的第一个新品种。这种蛋白质可帮助植物和微生物从太阳中获取光的细胞成分。这一意想不到的发现可帮助研究人员更好地了解微生物是如何感知光线的,并促进新型光学研究以及数据存储技术的发展。 许多生物利用光敏蛋白质收集太阳的能量,并帮助其
海底蛋白爱“吃光”
图片来源:ALINA PUSHKAREV 一组寻找“吃光”蛋白质的科学家,在加利利海海底偶然发现了50年来的第一个新品种。这种蛋白质可帮助植物和微生物从太阳中获取光的细胞成分。这一意想不到的发现可帮助研究人员更好地了解微生物是如何感知光线的,并促进新型光学研究以及数据存储技术的发展。 许多生
什么是球蛋白
球蛋白是一种存在于人体中的血清蛋白,是一种常见的蛋白,存在于所有的动植物体内,球蛋白具有免疫功能,因此也有人称它为免疫球蛋白。 当免疫系统遇到外来的入侵时会根据入侵位置的不同,产生不同数量的球蛋白,如果入侵了比较难以消灭的免疫系统,就会刺激淋巴,以后就会产生更多的球蛋白,直到入侵物被球蛋白消灭
脑脊液蛋白电泳实验
1、原理 与血清蛋白电泳相同,利用各种蛋白质在电场作用下迁移率不同来进行检测。由于CSF蛋白质含量较低,电泳前须进行浓缩处理。一般采用透析法浓缩,将CSF加入透析袋内,置于吸水的透析液中,CSF中的水分移至透析液内,CSF的蛋白质浓度增加后,再进行电泳分析医`学教育网搜集整理。 2、试剂与器材
糖化蛋白的测定
糖化蛋白的检测有高压液相色谱(HPLC)法可精确分离HbA1各组分;并分别得出HbA1a、HbA1b、HbA1c、HbA1d的百分比,阳离子交换柱层析法CV(2%~16%),测定的血红蛋白类型为HbA1参考值:HbA1c 4%~6%(HPLC法)
脑脊液蛋白多少正常
脑脊液是存在于人颅腔内部正常的液体组织,外观上看是无色、透明、清亮的,微微发黏的一种液体组织,这种液体组织内部,存有电解质、蛋白、白细胞等物质。 正常的脑脊液蛋白是多少?人在不同的年龄阶段,蛋白的含量是有区别的。早产儿较高,可以达到2克每升;新生儿逐渐降低到1克每升;作为正常成年人来讲,一般可
外在蛋白的分离
由于其溶于水,所以可以用高浓度的盐溶液或某些化学物质将许多周边蛋白从膜上除去,高盐溶液可以破坏离子键,所以不需要用后垢剂溶解。
什么是松弛蛋白?
中文名称松弛蛋白英文名称relaxation protein定 义DNA复制过程中,在DNA分叉处与单链DNA结合的蛋白质,防止已解链的双链还原、退火,使复制得以进行。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
蛋白的浓缩方法
丙酮沉淀法;免疫沉淀法;三氯醋酸沉淀法;硫酸铵沉淀法;(低温)有机溶剂沉淀法;聚乙二醇沉淀法;超滤法;透析法;离子交换层析和冷冻干燥法……1,丙酮沉淀法;三氯醋酸沉淀法 试验要求的仪器简单,但是常常导致蛋白质变性。2,免疫沉淀法:得有特异性抗体!3,硫酸铵沉淀法:利用高浓度盐将蛋白质析出(盐析)选择
融合蛋白的含义
融合蛋白(fusion protein)有两种不同的含义,一种是通过DNA重组技术得到的两个基因重组后的表达产物,另一种是介导两个细胞质膜融合的一组蛋白,如在仙台病毒脂双层外侧小叶中含有的两种糖蛋白之一,介导病毒被膜与宿主细胞质膜的融合作用。另一种糖蛋白是血细胞凝集素神经酰胺酶。 两个不同的蛋白质既