PCRArray技术原理
PCR Arrays是分析一组特定基因表达的可靠工具,引物经过优化。每个96孔板、384孔板PCR Array都包含SYBR® Green优化的引物分析,可对相关的通路或疾病相关的基因进行细致的研究,并含有相应的RNA、DNA质量控制。PCR Arrays也可针对您特定的研究兴趣对一些基因作定制化分析。高品质引物设计和qPCR Master mix使PCRArray可在统一的循环条件下同时扩增96或384个不同的基因特异性产物。 PCR Arrays进行的基因表达分析具有real-time PCR的灵敏度和微阵列的多基因检测能力。这种整合使PCR Array具有高特异性和扩增效率,可获得准确的SYBR® Green real-time PCR结果。PCR芯片在任何研究实验室都易于使用。PCR Arrays具有足够高的敏感度,可使用从常规样本(0.1–5 µg RNA)、FFPE样本和小样本(1–100 ng......阅读全文
PCR-Array-技术原理
PCR Arrays是分析一组特定基因表达的可靠工具,引物经过优化。每个96孔板、384孔板PCR Array都包含SYBR® Green优化的引物分析,可对相关的通路或疾病相关的基因进行细致的研究,并含有相应的RNA、DNA质量控制。PCR Arrays也可针对您特定的研究兴趣对一些基因作定制化
什么是pcr-array?
pcr array 中文名称就是PCR阵列,或者PCR芯片。运用高通量荧光定量PCR array 方法,在一张96孔或384孔板上同时对某个信号通路或疾病相关基因的多个基因的表达量变化进行检测,芯片上的基因包括了与研究对象有确定关系的基因或者待考证的基因;目前启因生物针对不同的信号通路和疾病相关基因
PCR-Array-性能优势
灵敏度: 每个芯片使用至少1 ng或至多5 µg总RNA可获得高于80%的阳性信号率,即使细胞中细胞因子的表达量很低,25 ng总RNA的阳性率也>80%。 重复性: 图为对比不同研究人员在间隔3个月的时间下使用不同批次的Human Drug Metabolism PC
BioTNT-PCR-Array实验操作介绍
一.用户需要自备的材料和仪器 Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit:A2010B0B03 ; Biotnt qPCR Premix Kit: A2010A0112; RNA 抽提:推荐使用Qiagen RNeasy Mini Kit (
BioTNT-PCR-Array实验操作(二)
三、数据导出后进行分析; 3.1 数据分析基本设置1. 确定基线基线是qPCR扩增前期的荧光本底信号,一般都由仪器自动设置。不同仪器类型,基线的设置也略有不同,往往在荧光信号指数扩增阶段的前几个循环处,一般将定量PCR的前15个循环信号作为荧光本底信号,如果实验数据中最低CT还小于基线的设置上
BioTNT-PCR-Array实验操作介绍
一.用户需要自备的材料和仪器 Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit:A2010B0B03 ; Biotnt qPCR Premix Kit: A2010A0112; RNA 抽提:推荐使用Qiagen RNeasy Mini Kit (
BioTNT-PCR-Array实验操作(一)
一.用户需要自备的材料和仪器 Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit:A2010B0B03 ;Biotnt qPCR Premix Kit: A2010A0112;RNA 抽提:推荐使用Qiagen RNeasy Mini Kit (50) 74104,RNas
BioTNT-PCR-Array实验操作介绍
一.用户需要自备的材料和仪器 Biotnt First Strand cDNA Synthesis Kit:A2010B0B03 ; Biotnt qPCR Premix Kit: A2010A0112; RNA 抽提:推荐使用Qiagen RNeasy Mini Kit (
PCR-Array-常见问题解答
PCR Array FAQ:任何一台能够做QPCR的仪器据能够做PCRarray吗?QPCR 仪器都可以进行QPCR array的实验。根据仪器采用的96孔或者384孔板,分为以下5种板型(plate format):plate formatInstrument providerQPCR instr
PCR技术原理
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。一.假阴性,不出现扩增条带PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及活性④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有T
PCR技术原理
PCR产物的电泳检测时间一般为48h以内,有些zui好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚致消失。一.假阴性,不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及活性 ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂
PCR技术的原理
PCR原理:DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基
PCR技术的原理
PCR的原理:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依赖于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱氧单核苷
PCR技术的原理
PCR技术的基本原理:该技术是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在下,依靠于DNA聚合酶的酶促合成反应。DNA聚合酶以单链DNA为模板,借助一小段双链DNA来启动合成,通过一个或两个人工合成的寡核苷酸引物与单链DNA模板中的一段互补序列结合,形成部分双链。在适宜的温度和环境下,DNA聚合酶将脱
PCR技术的原理
PCR原理:DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基
PCR的技术原理
PCR的技术原理是借着聚合酶在一对方向相反的引子协助之下,将两个引子之间特定的DNA反复复制。由于新制成的DNA可以被再拿来做为制造DNA的模板,所以此种复制是以几何级数的倍数增加,可以在短短数小时之内,将目标的DNA放大至百万倍之多。同时使用的一对引子的限制之下,所合成的DNA片段,99.9%以上
多重PCR技术原理
多重PCR技术具备单个反应体系检测多种靶标的能力,但是如果需要鉴别反应体系中的不同靶标基因,则需要针对不同的靶标,设计特异性的探针并标记荧光基团,不同的靶标标记不同的荧光基团。为了避免荧光基团之间的相互干扰,应合理选择不同光谱范围的荧光基团。荧光基团应与使用的荧光定量PCR仪器具有适配性,每个荧光通
PCR-Array产品介绍趋化因子及其受体的功能
趋化因子及其受体的功能免疫细胞的定向迁移是机体免疫应答发生和完成的必须条件。趋化因子是一类控制细胞定向迁移的细胞因子。其功能行使由趋化因子受体介导。趋化因子与其受体的相互作用控制着各种免疫细胞在循环系统和组织器官间定向迁移, 使之到达感染、创伤和异常增殖部位, 执行清除感染源、促进创伤愈合和消灭异
荧光定量PCR技术原理
将标记有荧光素的Taqman探针与模板DNA混合后,完成高温变性,低温复性,适温延伸的热循环,并遵守聚合酶链反应规律,与模板DNA互补配对的Taqman探针被切断,荧光素游离于反应体系中,在特定光激发下发出荧光,随着循环次数的增加,被扩增的目的基因片段呈指数规律增长,通过实时检测与之对应的随扩增
数字PCR技术的原理
PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖的酶促合成反应,扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合。
PCR技术的原理简介
DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链,在DNA聚合酶的参与下,根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。在实验中发现,DNA在高温时也可以发生变性解链,当温度降低后又可以复性成为双链。因此,通过温度变化控制DNA的变性和复性,加入设计引物,
荧光PCR技术的原理
是荧光定量PCR吧荧光定量PCR是通过荧光染料或荧光标记的特异性的探针,对PCR产物进行标记跟踪,实时在线监控反应过程,结合相应的软件可以对产物进行分析,计算待测样品模板的初始浓度。PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针,该探针为一寡核苷酸,两端分别标记一个报告荧光基团和一个淬灭荧
PCR-Array-简单实用的检测基因表达的高通量方法
简介:什么是PCR芯片?实时定量PCR是检测基因表达zui灵敏,zui可靠的方法。通过在试验过程中,实时监测荧光染料的信号变化,反映样品中的基因拷贝数。实时定量PCR线性范围广(能达到5个数量级),因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是,由于实时定量PCR需要制备标准曲线和
PCR-Array——基因表达分析疾病和信号通路的利器(三)
RT2 PCR Profiler Arrays可用于生物学和医学研究的各个领域,包括:癌症研究、炎症和细胞因子分析、干细胞研究、神经生物学、信号转导通路研究、细胞黏附和细胞迁移、生物标记分子筛选和验证截止目前,QIAGEN 拥有ZL申请的PCR Array可以分析超过150条通路和特异的疾病类型。具
PCR-Array——基因表达分析疾病和信号通路的利器(二)
RT2 Profiler PCR Array操作流程 首先将RNA样本反转录成cDNA第一链,作为PCR模板;接着将cDNA模板与合适的即用型PCR预混液混合,等体积加入到已经固定好基因特异性引物的同一个孔板的每个孔中,然后即可运行real-time PCR循环程序。RT2 Profiler PCR
PCR-Array-简单实用的检测基因表达的高通量方法
简介:什么是PCR芯片?实时定量PCR是检测基因表达最灵敏,最可靠的方法。通过在试验过程中,实时监测荧光染料的信号变化,反映样品中的基因拷贝数。实时定量PCR线性范围广(能达到5个数量级),因此可以检测同一样品中表达量极低的基因和表达量很高的基因。但是,由于实时定量PCR需要制备标准曲线和同时分析内
PCR-Array——基因表达分析疾病和信号通路的利器(一)
以前只要提到基因表达分析,人们就会想到荧光定量PCR;只要提到高通量基因表达分析,人们会首先想到基因芯片。虽然荧光定量PCR仪几乎每个实验室都有,但是做芯片就不一定每个实验室都具备这个条件了。那么只有一台荧光定量PCR仪是否也能进行高通量的基因表达谱分析呢?QIAGEN 推出的RT2 Profile
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光
PCR技术基本原理
一、PCR技术基本原理有:1、PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。2、PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成:①模板DNA的变性:模板DNA经加热至93℃左右一定时间后,使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离,使之成为单
实时荧光定量PCR技术原理
所谓的实时荧光定量 PCR 就是 通过对 PCR 扩增反应中每一个循环产物荧光信号的实时检测从而实现对起始模板定量及定性的分析。其原理是在实时荧光定量 PCR 反应中,引入了一种荧光化学物质,随着 PCR 反应的进行, PCR 反应产物不断累计,荧光信号强度也等比例增加。每经过一个循环,收集一个荧光