PCR技术的原理
PCR原理：DNA的半保留复制是生物进化和传代的重要途径。双链DNA在多种酶的作用下可以变性解旋成单链，在DNA聚合酶的参与下，根据碱基互补配对原则复制成同样的两分子拷贝。PCR技术的基本原理类似于DNA的天然复制过程，其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成：①模板DNA的变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作准备；②模板DNA与引物的退火（复性）：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合；③引物的延伸：DNA模板--引物结合物在72℃、DNA聚合酶（如TaqDNA聚合酶）的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基互补配对与半保留复制原理，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。重复循环变性--退火--延伸三......阅读全文
定－量－PCR－技－术－简－介
聚合酶链反应（polymerase chain reaction, PCR）是微量核酸扩增的有效工具，由于其灵敏、特异、快速等优点，在医学上已广泛应用与病毒、细菌病原体及遗传病、肿瘤的早期诊断。随着PCR技术的发展，特别是病毒或肿瘤的治疗监测、疾病的诊断、机体基因表达调控方面，不仅需要检测其存在是否
科技：预制菜的强心“技”
一条活蹦乱跳的锦鲤装入袋中，抽真空后放入特制冰柜，鱼瞬间被冻硬。取出“冻鱼”，重新放回常温水中，没过多久，鱼竟活了过来……“鱼死复生”并非奇迹，而是此次食博会·预博会参展商联泰集团去年从日本引进的“眠冻”技术。该技术能最大限度减少对鱼类细胞的伤害，保留食材鲜活状态和营养物质。有了这项技术的加持，
“技”高一筹，技尔携新仪器与经典耗材亮相BCEIA展会
分析测试百科网讯 2021年9月27日-29日，第十九届北京分析测试学术报告会暨展览会（BCEIA 2021）在北京•中国国际展览中心开幕。在本届展会上，技尔（上海）商贸有限公司（以下简称“技尔”）展出了几款特色仪器和实验耗材。分析测试百科网作为展会支持媒体，为您带来全程跟踪报道。 技尔现场
岛津宁夏高校技交会成功举办
2010年12月2日，岛津宁夏高校技术交流会在宁夏省银川市黄河明珠大酒店隆重召开。原计划四、五十人的会议最终到场逾百位，全场座无虚席。用户覆盖宁夏各个本专科、职业技术学院，以及银川和周边城市所有高等院校，更是有其它行业，如CDC、企业用户等闻讯前来。 会议由岛津宁夏区域负责人黄俊
技防优先，生态环境文明建设
“生态环境执法要达到精准化、科学化、规范化就需要有科技的支撑。”6月29日，在生态环境部召开的新闻发布会上，生态环境部生态环境执法局局长赵群英说，生态环境执法工作已经实现或正在实现由“人防为主”转向“技防优先”。 “如今的生态环境执法，不能再搞过去的人海战术，要求我们必须把科技手段应用到生态环
周尧：只攻“雕虫”小技
周尧（左二）在采集昆虫标本 周尧，国际著名昆虫学家，圣马力诺共和国国际科学院院士，全国政协第六、七届委员，九三学社中央委员，西北农林科技大学博士生导师；中国昆虫学史学科奠基人，享有“蝶神”“虫坛怪杰”“亚洲之光”等美誉。 周尧曾经感慨：“报国之日短，求学之日长。不杀大虫，杀小虫何用？”奈何“书剑
日本削减2013年科技预算
日本新预算案增加了对隼鸟2号小行星样本返回飞船的资金支持图片来源：日本宇宙航空研究开发机构 日本政府日前批准了一项始于4月的年度预算，看上去科学家成为了大输家。占据大部分国家研究支出的文部科学省科技预算下降3.3%，只有132亿美元。 一份更详细的分析表明，科学家不用过于抱怨。文
旅美科协举办2016科技峰会
1月30日，中国旅美科技协会（旅美科协）2016波士顿科技峰会暨旅美科协波士顿分会成立庆典在哈佛大学医学院举办。2009年诺贝尔生理学或医学奖获得者、美国国家科学院院士、哈佛医学院杰克·绍斯塔克教授，美国国家工程院院士、麻省理工学院机械系主任陈刚教授作为特邀嘉宾进行大会演讲，与大家分享他们在科学
海关总署发布荧光PCR仪等仪器设备招标公告
10日，从中国海关政府采购网获悉，海关总署发布两项招标公告，欲采购9台荧光PCR仪、3台微生物鉴定仪和1台分歧杆菌培养检测系统，采购总金额为600万元。其中，四通道、五通道和六通道荧光PCR仪均有采购。 主要招标信息汇总如下：招标编号项目名称包号品目名称数量单价预算（元）CG2024-PL-G
2020“创世技”颠覆性创新榜发布
10月21日，2020大众创业万众创新活动周期间，第三届“创世技”颠覆性创新榜发布暨颠覆性创新成果（海淀）转化促进中心揭牌仪式在北京海淀举办。北京市人民政府副秘书长刘印春，国家发展改革委创新和高技术发展司副司长朱建武，中国科协科学技术传播中心主任郑浩峻，北京市发展改革委副主任林恩全，北京市海淀区
500余款机器人同台“炫技”高精尖
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/8/484582.shtm 8月18日，2022世界机器人大会在北京亦创国际会展中心拉开帷幕，500余款机器人集中亮相，现场“炫技”高精尖。记者在现场看到，本次博览会从应用需求端出发，汇聚了各类场景下的前沿
Avantor出席DCAT2011科技周
2011年3月14日，DCAT(Drug, Chemical & Associated Technologies Association)美国药品和化学品联合贸易协会2011年科技周(DCAT第85届年度会议)于纽约市最豪华的Waldorf酒店拉开序幕，Avantor做为美国历史最悠久的药品
《自然》杂志展望2017年科技前景
时光的车轮在2016年科学史上留下了深深印记。随着新年的到来，科学家们开始展望更加绚丽的未来图景。他们希望：关于CRISPR-Cas9的ZL之争能盖棺定论、量子计算领域涌现出一位真正的王者、寻找地球兄弟“行星九”的努力有所突破…… 温室气体排放或降低 美国当选总统唐纳德·特朗普曾称，气候变化
“仪”技之长，仪电分析亮相BCEIA展会
分析测试百科网讯 在第十九届北京分析测试学术报告会暨展览会（BCEIA 2021）上，上海仪电分析仪器有限公司（以下简称“仪电分析”）展出了多款光谱仪、色谱仪和检测器件。分析测试百科网作为展会支持媒体，全程跟踪报道。 仪电分析现场展台 先进的仪器设备引来不少从业者驻足咨询 仪电分析自195
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
Troubleshooting－for－PCR－and－multiplex－PCR
Troubleshooting discussion is based on the PCR protocol as described in the table below. All reactions are run for 30 cycles.COMPONENTVOLUMEFINALCONCE
PCR简介/PCR仪
PCR的要素基本的PCR须具备PCR仪图册1.要被复制的DNA模板 Template2.界定复制范围两端的引物Primers.3.DNA聚合酶Taq. Polymearse4.合成的原料（四种脱氧核苷酸）及水。 PCR仪工作原理利用升温使DNA变性，在聚合酶的作用下使单链复制成双链，进而达到基因复制
重叠PCR—overlap－PCR
1、简介 重叠PCR也是基本的PCR原理：变性-退火-延伸。不同的是在重叠PCR过程是两个或者几个片段重叠延伸之后，再进行指数扩增的PCR过程。 2、基本原理*步：PCR产生两个或者几个片段，这几个片段之间必须有重叠区。 第二步：以两个片段为例，见上图，*步产生的两个片段，A D链之间有互补，B
多重PCR（Multiplex－PCR）
一般PCR仅应用一对引物，通过PCR扩增产生一个核酸片段，主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR)，又称多重引物PCR或复合PCR，它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物，同时扩增出多个核酸片段的PCR反应，其反应原理，反应试剂和操作过程与一般PCR相同. 多
普通PCR梯度PCR－原位PCR－荧光定量PCR仪的区别
普通PCR仪： 一般把一次PCR扩增只能运行一个特定退火温度的PCR仪，称之为普通PCR仪，也就是传统的PCR仪。如果要用它做不同的退火温度则需要多次运行。如；（ABI 2720） 梯度PCR仪： 一次性PCR扩增可以设置一系列不同的退火温度条件（通常12种温度梯度）的称
反转录PCR（RTPCR,－Reversed－Transcript－PCR）
1 原理 RT—PCR是一种将cDNA合成与PCR技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法，主要用于对表达信息进行检测或定量分析,还可以用来检测基因表达差异而不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶，以随机引物、ol
反向PCR（inverse－PCR）简介
反向PCR是一种多聚合酶链式反应（PCR）应用的方法，可使已知序列的核心区边侧的未知DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA，以产生适合于PCR扩增大小的片段，然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区的末端序列，但其方向可使链的延长经过环上的未知区而不是分开
反向PCR－（inversePCR）
实验方法原理 反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色体序列，因此又可称为染色体缓移或染色体步移。这时选择的引物虽然与核心DNA区两末端序列互补，但两引物3’端是相互反向的。扩增前先用限制性内切酶酶切样品DNA，然后用DNA连接
直接原位PCR（In－situ－PCR）
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马林；二甲苯；PBS操
直接原位PCR（In－situ－PCR）
原位PCR是原位杂交细胞定位和PCR的高灵敏度相结合的技术，使得靶基因检测有了极大的改进。此技术是在细胞（爬片、甩片或涂片）或组织（石蜡、冰冻切片）上直接对靶基因片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。一、组织切片和细胞样品的制备试剂与配置10%福尔马林；二甲苯；PBS操
PCR技术（十四）：反向PCR
描述一种大聚合酶链反应(PCR)应用的方法，使在已知序列的核心区边侧的未知 DNA成几何级数扩增。用适当的限制性内切裂解含核心区的DNA，以产生适合于PCR扩 增大小的片段，然后片段的末端再连接形成环状分子。PCR的引物同源于环上核心区 的末端序列，但其方向性，使链的延长经过环上的未知区而不是分开引
反向PCR－（inversePCR）
利用反向PCR可对未知序列扩增后进行分析，探索邻接已知DNA片段的序列，并可将仅知部分序列的全长cDNA进行分子克隆，建立全长的DNA探针。可用于：（1）基因游走研究；（2）转位因子研究；（3）已知序列DNA旁侧病毒整合位点分析等研究。实验方法原理反向PCR可用于研究与已知DNA区段相连接的未知染色
反向PCR－（inversePCR）
实验方法原理 反向PCR是克隆T-DNA插入位点侧翼DNA序列非常有效的方法。 1. 选择合适的限制性内切酶位点。并在T-DNA的边界（左边界、右边界均可）和酶切位点附近设计引物P1、P2；2. 回收DNA，T4连接酶连接，使酶切后的DNA片段环化；3. 回收连接后的DNA，用引物P1、P2做
菌落PCR（Colony－PCR）方法
菌落PCR（Colony PCR）可不必提取基因组DNA，不必酶切鉴定，而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增，省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。具体方法：1、PCR混合物的制备T
预算10903.05万元，采购大户海关总署科技司要采购哪些仪器？
中国海关政府采购网消息，2024年10月9日至16日期间，海关总署物资装备采购中心陆续发布海关总署2024年科技司仪器设备采购招标公告，共计17个项目，累计预算金额10903.05万元。 经统计，本次海关总署科技司采购的仪器设备中色谱、光谱和质谱仪器数量均超过10台，其中质谱仪器15台，色谱仪