多重PCR的定义和特点

1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合 ,它是在同一 反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的 反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般 相同。2.特点:①高效性,在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物,或对有多个型别的目的基因进行分型,特别是用一滴血就可检测多种病原体。②系统性,多重很适宜于成组病原体的检测,如肝炎病毒,肠道致病性细菌,性病,无芽胞厌氧菌,战伤感染细菌及细菌战剂的同时侦检。③经济简便性,多种病原体在同一反应管内同时检出,将大大的节省时间,节省试剂,节约经费开支,为临床提供更多更准确的诊断信息。......阅读全文

多重PCR的定义和特点

1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合 ,它是在同一 反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的 反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般 相同。2.特点:①高效性,在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物,或对有多个型别的目的基因进行分型,特别是

多重PCR技术的定义特点及用途介绍

1.概述:多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同。       2.特点:    ①高效性,在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物,或

多重pcr和多重荧光定量pcr的区别

正常啊,定量PCR很灵敏的,体系稍微变化就会误差很大,更何况你这样反应体系都不一样。所以一般定量结果只是作为佐证,最好别太相信。你想做好,就尽量保证每个体系是一致的,最后结果趋势是一致的就行了。

反向PCR(Inverse-PCR)技术的定义和特点

1.概述:反向PCR(reverse PCR)是用反向的互补引物来扩增两引物以外的未知序列的片段,而常规PCR扩增的是已知序列的两引物之间DNA片段.实验时选择已知序列内部没有切点的限制性内切酶对该段DNA进行酶切,然后用连接酶使带有粘性末端的靶序列环化连接,再用一对反向的引物进行PCR,其扩增产物

巢氏PCR(Nested-PCR)技术的定义和特点

1.定义:也称套式PCR是指利用两套PCR引物(巢式引物)进行两轮PCR扩增反应。在第一轮扩增中,外引物用以产生扩增产物,此产物在在内引物的存在下进行第二轮扩增。在这种技术中,首先用一对外引物进行第1轮PCR,然后再使用第1对引物扩增的DNA 序列内部的一对引物再次扩增。2.优点:由于巢式PCR反应

标记PCR和彩色PCR技术的定义及特点介绍

标记PCR(Labelled Primers,LP-PCR) 是利同位素或荧光素对PCR引物的5‘端进行标记,用来检测靶基因是否存在。彩色PCR(Color Complementation assay PCR,CCAPCR),是LP-PCR的一种,它用不同颜色的荧光染料;标记引物的5'端,因

多重PCR(Multiplex-PCR)

一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同.    多

多重PCR(Multiplex-PCR)

一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定.多重PCR(multiplex PCR),又称多重引物PCR或复合PCR,它是在同一PCR反应体系里加上二对以上引物,同时扩增出多个核酸片段的PCR反应,其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同.    多

PCR的定义和历史

聚合酶链式反应(PCR)是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制,PCR的最大特点是能将微量的DNA大幅增加。因此,无论是化石中的古生物、历史人物的残骸,还是几十年前凶杀案中凶手所遗留的毛发、皮肤或血液,只要能分离出一丁点的DNA,就能用PCR加以放大,

多重PCR反应的方法

一)选择目标基因由于多重PCR在同一个反应体系中需要加入多对引物,而模板直接影响扩增的结果分析,这就导致了扩增模板的选择至关重要。同时,扩增区域的选择必须符合分析的目的,如通常对于致病微生物,需要选择其保守序列,如16sRNA,或者毒力基因、毒力相关基因,以防止检测到非致病突变体而无法解释结果;对于

多重耐药菌的定义

问题一:什么叫多重耐药菌,怎样定义? 多重耐药菌是指有多重耐药性的病原菌。可以翻译成多药耐药性、多重耐药性、其定义为一种微生物对三类(比如氨基糖苷类、红霉素、B-内酰胺类)或三类以上抗生素同时耐药,而不是同一类三种。P-resisitence成为泛耐菌株,对几乎所有类抗菌素耐药。比如泛耐不动杆菌,对

多重耐药菌的定义

问题一:什么叫多重耐药菌,怎样定义? 多重耐药菌是指有多重耐药性的病原菌。可以翻译成多药耐药性、多重耐药性、其定义为一种微生物对三类(比如氨基糖苷类、红霉素、B-内酰胺类)或三类以上抗生素同时耐药,而不是同一类三种。P-resisitence成为泛耐菌株,对几乎所有类抗菌素耐药。比如泛耐不动杆菌,对

多重-PCR-扩增实验

多重PCR扩增实验可以用于:(1)在同一PCR反应管内同时检出多种病原微生物,或对有多个型别的目的基因进行分型,特别是用一滴血就可检测多种病原体;(2)多重PCR很适宜于成组病原体的检测,如肝炎病毒,肠道致病性细菌,性病,无芽胞厌氧菌,战伤感染细菌及细菌战剂的同时侦检;(3)多种病原体在同一反应管内

核酸扩增—多重PCR

  多重PCR是在单一PCR基础上改进和发展起来的新技术,是在同一PCR体系中加入多对特异性引物,一次扩增多个DNA片断,实现多个基因序列或多种病原体的同时检出。多重PCR降低了检测成本,减少了工作量,提高了检测效率,并且可以解决淋球菌、衣原体等混合感染者临床症状不明显,检出率低等问题。淋病患者往往

多重PCR技术原理

多重PCR技术具备单个反应体系检测多种靶标的能力,但是如果需要鉴别反应体系中的不同靶标基因,则需要针对不同的靶标,设计特异性的探针并标记荧光基团,不同的靶标标记不同的荧光基团。为了避免荧光基团之间的相互干扰,应合理选择不同光谱范围的荧光基团。荧光基团应与使用的荧光定量PCR仪器具有适配性,每个荧光通

多重-PCR-扩增实验

            实验方法原理 多重PCR(multiplex PCR),其反应原理,反应试剂和操作过程与一般PCR相同。一般PCR仅应用一对引物,通过PCR扩增产生一个核酸片段,主要用于单一致病因子等的鉴定。重PCR的特点有:①高效性在同一PCR反应管内同时

多重-PCR-扩增实验

试剂、试剂盒 Taq 聚合酶溶于水的 DNA引物仪器、耗材 热循环仪实验步骤 一、材料1. 酶和酶缓冲液Taq 聚合酶许多 Taq 聚合酶都可以用;作者发现 Roche 公司的 Taq 聚合酶可以满足大多数需要. 如果需要提高PCR 产物的特异性,应该使用热启动聚合酶。使用 Tag 聚合酶本身附带的

多重PCR核酸检测

2020年3月11日,世卫组织总干事谭德赛在日内瓦召开的新闻发布会上宣布,新冠肺炎(COVID-19)疫情已经构成全球性大流行(pandemic)。截止到目前,中国的疫情在国内联防联控机制下已基本得到控制,而国外的情况却不容乐观。新冠肺炎疫情爆发于呼吸道疾病高发的季节,有各类呼吸道病原体单一感染或合

免疫PCR(immunoPCR)技术的定义及特点介绍

1.定义:免疫-PCR(immuno-PCR) 它利用抗原-抗体反应的特异性和PCR扩增反应的极高灵敏性来检测抗原,尤其适用于极微量抗原的检测。是新近建立的一种灵敏、特异的抗原检测系统。主要步骤有三个:①抗原-抗体反应,②与嵌合连接分子结合,③PCR扩增嵌合连接分子中的DNA(一般为质粒DNA)。 

攻克多重PCR之难(下篇)

  多重PCR能够在提高通量的同时节省样品降低成本,它需要耗费更多的时间和精力,同时也会给用户回报更丰富的数据。本文介绍了一些实验技巧和商业化工具,希望能帮您轻松获得好结果。   原则三、四、五:优化dNTP、MgCl2、聚合酶和盐的浓度   现在剩下的就是调整反应条件了。要一次进行这么多种反应

多重PCR法检测STEC

产志贺毒素大肠杆菌(STEC)具有很强的致病性,全球范围内由其引发的食物中毒和其他公共卫生事件呈逐年升高之势,严重威胁人类的健康。开发快速可靠的检测手段对其引发的食源性疾病的监测、控制和预防意义重大。本文结合对STEC分子生物学特征的研究,着重介绍了多重PCR检测技术在检测食品中STEC方面的

攻克多重PCR之难(上篇)

  多重PCR能够在提高通量的同时节省样品降低成本,它需要耗费更多的时间和精力,同时也会给用户回报更丰富的数据。本文介绍了一些实验技巧和商业化工具,希望能帮您轻松获得好结果。   PCR 的重要性毋庸赘述,这一诺贝尔获奖技术的普及带动了现代基因组学、鉴定技术、医疗诊断等领域的发展。如今,PCR

巢式PCR(Nested-PCR)定义、原理和步骤

巢式PCR的定义巢式PCR是一种变异的聚合酶链反应(PCR),使用两对(而非一对)PCR引物扩增完整的片段。第一对PCR引物扩增片段和普通 PCR相似。第二对引物称为巢式引物(因为他们在第一次PCR扩增片段的内部)结合在第一次PCR产物内部,使得第二次PCR扩增片断短于第一次扩增。巢 式PCR的好处

多重PCR反应中关键因素和实验步骤

多重 PCR反应的基本原理DNA 引物(步骤 1 和 2 ) . 引物的选择遵从简单的规则:引物长度为 18-24bp 或更长, GC 含量为 35%-60% ,退火温度 55 ℃ -58 ℃或更高。长些的引物(如 DMD 基因的引物, 28-30bp )使反应在更高的退火温度下进行并产生较少的非特

蒸腾的定义和特点

蒸腾,是指植物体表(主要指叶子)的水分通过水蒸气的形式散发到空气中的过程。蒸腾与物理学上所说的蒸发有着一定的差别,蒸腾作用不仅会受到外界环境的影响,还会受到植物的调节和控制,所以蒸腾作用要比蒸发作用复杂得多,蒸腾作用的发生与植物的大小无关,即使是幼苗依然能够进行蒸腾。

供体的定义和特点

(一)指在化学反应过程中,能提供某一化学基团的物质(化合物)。例如:L-氨基酸与α-酮酸之间的氨基转移反应,L-氨基酸是氨基的供体。(二)提供基因DNA片段、器官、组织或其他细胞输送给另一个个体的生物。(三)在半导体中,若杂质或缺陷能级上有电子占据时,杂质原子或缺陷是电中性的,这种杂质或缺陷叫做施主

多重同晶置换的原理和方法特点

中文名称多重同晶置换英文名称multiple isomorphous replacement;MIR定  义在蛋白质的X射线衍射研究中,为解决衍射相问题,将多个具有同晶性质而不改变蛋白质构象的重原子引入蛋白质,比较引入重原子前后的衍射图,即能从多个相角所测的数据解释衍射图。应用学科生物化学与分子生物

多重PCR的主要用途

⑴多种病原微生物的同时检测或鉴定①肝炎病毒的感染,在同一病人或同一供血者体内,有时存在多种肝炎病毒重叠感染。②肠道致病性细菌的检测,如伤寒,痢疾和霍乱,同存一病人并同时发病。③性病的检测,如梅毒,淋病及艾滋病的诊断。④战伤细菌及生物战剂细菌的检测,如破伤风杆菌,产气荚膜杆菌,炭疽杆菌,鼠疫杆菌等侦检

重组PCR技术的定义和原理介绍

1.定义:使两个不相邻的DNA片段重组在一起的PCR称为重组PCR(recombinant PCR)。Mullis等于1986年报道了由PCR扩增的两个DNA片段通过重组合后再经延伸而制备出新的DNA分子。2. 其基本原理:将突变碱基,插入或缺失片段,或一种物质的几个基因片段均设计在引物中,先分段对

原位PCR技术的定义和方法介绍

1.概述:原位PCR就是在组织细胞里进行PCR反应,它结合了具有细胞定位能力的原位杂交和高度特异敏感的PCR技术的优点,是细胞学科研与临床诊断领域里的一项有较大潜力的新技术。原位PCR是Hasse等于1990年建立的,实验用的标本是新鲜组织、石蜡包埋组织、脱落细胞、血细胞等.2.其基本方法为