间接ELISA法的操作程序
本法主要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎（DVH）抗体的ELISA为例，间接ELISA的操作程序如下。⑴ 材料① 包被液、洗涤液、保温液、底物液、终止液；② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参考血清；待检鸭血清；③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。⑵ 方法步骤① 加抗原包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加待检血清 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干③ 加酶标抗体 → 37℃ 2小时，洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 30分钟，加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值，并计算出P/N比值。⑶ 结果判定 已知阳性血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且已知阳性血清的OD值≥0.4；在上述条件成立的情况下，如果待检血清与已知阴性血清的比值（P/N）≥2.1，而且待检血清的OD值≥0.4，则判为阳性，否则判为阴性。......阅读全文
间接－ELISA－实验方案
实验概要需要偶联二抗的 ELISA 测定的一般程序。实验步骤1. 将抗原包被到微孔板 1) 将抗原在 PBS 或其它碳酸盐缓冲液中稀释至 20 μg/ml 的最终浓度。移取 50 μl 抗原稀释液到 PVC 微量滴定板的第一排微孔中，使该微量滴定板的微孔上包被抗原。按需要在微量滴定板上进行梯度
间接elisa和阻断elisa有什么异同
相同都是将抗原吸附于固相载体，检测抗体。不同间接的酶标抗体是二抗，与待检抗体结合；阻断酶标抗体是一抗，与抗原结合。间接中底物降解的量与抗体量相等，阻断底物降解量与抗体
间接碘量法介绍
1)剩余碘量法剩余碘量法是在供试品（还原性物质）溶液中先加入定量、过量的碘滴定液，待I2与测定组分反应完全后，然后用硫代硫酸钠滴定液滴定剩余的碘，以求出待测组分含量的方法。滴定反应为：I2（定量过量）+ 还原性物质→2I + I2（剩余）I2（剩余）+ 2S2O32-→S4O62-+2I-2）置换碘
ELISA试剂盒实验操作程序总结
实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合elisa试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释
间接ELISA中试剂的配制及反应流程
实验概要间接ELISA是一种很实用而常用的免疫分析方法，本文将对反应中所用到的试剂的配制方法和反应的流程进行阐述。主要试剂1. 包被缓冲液：(0.05 mol/L，pH 9.6的碳酸盐缓冲液) Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g 蒸馏水 1000ml4℃保存，一周内用完。2.
间接ELISA中试剂的配制及反应流程
实验概要间接ELISA是一种很实用而常用的免疫分析方法，本文将对反应中所用到的试剂的配制方法和反应的流程进行阐述。主要试剂1. 包被缓冲液：(0.05 mol/L，pH 9.6的碳酸盐缓冲液) Na2CO3 1.59g NaHCO3 2.93g 蒸馏水 1000ml4℃保存，一周内用完。2.
ELISA测定的常用模式间接法测抗体
基本方法的操作如下: 1．将病原体的抗原在碳酸盐缓冲液中4~C过夜包被，形成固相抗原，洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗原后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭，洗涤去除未结合的部分及杂质。 2．加入含待测抗体的临床样本如血清等，温育一定时间后洗板；此时，待测抗体就会与固阳上特异抗原反应而
ELISA直接法和间接法优缺点
直接法（direct ELISA）将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。间接法（indirect ELISA）此测定方
薄层色谱法操作程序
1原理：将适宜的固定相涂布于玻璃板上，成一均匀薄层。待点样、展开后，与适宜的对照物按同法所得的作对比，用以进行药品的鉴别、杂质检查或含量测定。 2仪器与设备：玻板（除另有规定外，用5cm×20cm，10cm×20cm，20cm×20cm的规格）、定量毛细管或微量注射器、展开缸。 3试液与试剂：固
间接碘量法的相关介绍
1)剩余碘量法剩余碘量法是在供试品(还原性物质)溶液中先加入定量、过量的碘滴定液,待I2与测定组分反应完全后,然后用硫代硫酸钠滴定液滴定剩余的碘,以求出待测组分含量的方法。滴定反应为:I2(定量过量)+ 还原性物质→2I + I2(剩余)I2(剩余)+ 2S2O32-→S4O62-+2I-2)置换碘
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
1、直接ELISA试剂盒本法首要用于检测抗体。以鸭病毒性肝炎（DVH）抗体的ELISA为例，直接ELISA的操作程序如下：(1) 资料① 包被液、洗刷液、保温液、底物液、停止液；② DVH包被抗原、酶标抗抗体、阴性及阳性DVH参阅血清；待检鸭血清；③ ELISA检测仪、加样器、聚苯乙烯微量板。(2)
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) ：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) ：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法，前者用于检测大分子抗原，
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
抗体的活性和纯度对制备标记抗体至关重要，因为特异性免疫反应随抗体活性和纯度的增加而增强。 在酶标记过程中，抗体的活性有所降低，故需要纯度高、效价高及抗原亲和力强的抗体球蛋白，最好使用亲和层析提纯的抗体，可提高敏感性，而且可稀释使用，减少非特异性吸附。 酶与抗体交联，常用戊二醛法和过碘酸盐氧化
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序
根据ELISA所用的固相载体而区分为三大类型：一是采用聚苯乙烯微量板为载体的ELISA，即我们通常所指的ELISA（微量板ELISA）；另一类是用硝酸纤维膜为载体的ELISA，称为斑点ELISA（Dot-ELISA）；再一类是采用疏水性聚脂布作为载体的ELISA，称为布ELISA（C－ELISA）。
什么叫间接原子吸收法
间接测定法不是直接测定待测元素（或组分）本身，而是测定能与待测元素（或组分）进行定量化学反应的其他元素的原子吸收，由此计算出待测元素（或组分）的含量。按照间接法利用的化学原理的不同，可分为六类：一是利用干扰效应的间接法；二是利用沉淀反应的间接法；三是利用杂多酸的“化学放大效应”的间接法；四是利用络合
间接鼻咽镜检查法
检查部位 间接鼻咽镜检查又称后鼻镜检查，可用于同时检查鼻咽部及鼻后孔。 检查方法 1. 检查时，先让受检者直坐，头正，自然张口但不伸舌，用鼻安静呼吸。 2.将鼻咽镜于酒精灯上稍烘温，以免镜面生雾，并先将镜背在检查者手背上测试一下，以温而不烫为宜。 3.然后将额镜的反射光线照射于咽后壁，
间接法操作elisa试剂盒的方法介绍
1、用包被缓冲液将已知抗原稀释至1～10μg/ml，每孔加0.1ml，4℃过夜； 2、次日洗涤3次； 3、加一定稀释的待检样品（未知抗体）0.1ml于上述已包被之反应孔中,置37℃孵育1小时,洗涤； 4、（同时做空白、阴性及阳性孔对照）于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体（抗抗体）0.1
在定量测定抗原时，直接elisa与间接elisa有何区别
直接竞争ELISA和间接竞争ELISA区别 1、直接竞争，标记抗原，与检测样品中的抗原竞争抗体。 2、间接竞争，标记抗体，固相抗原与液相抗原（样品）竞争标记抗体。 3、定义 间接竞争法的模型：包被抗原，用HRP-抗体与样本一起加入。样本中的Ag与Solid-Ag竞争HRP-Ab，固相吸附的H
ELISA法
ELISA法是建立在抗原与抗体免疫学反应的基础上，因而，具有特异性。由于测定中需要酶标记抗原或抗体，酶分子与抗原或抗体分子的结合物可以催化底物分子发生反应，产生放大作用，正因为此种放大作用而使本法具有很高的敏感性。常用的ELISA分析1) 测定抗原A 将抗体吸附于固相表面，这个过程叫包被。B
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序（一）
酶联免疫吸附试验 (以下简称ELISA) ：是酶免疫测定技术中应用最广的技术。其基本方法是将已知的抗原或抗体吸附在固相载体 ( 聚苯乙烯微量反应板 ) 表面，使酶标记的抗原-抗体反应在固相表面进行，用洗涤法将液相中的游离成分洗除。常用的 ELISA 法有双抗体夹心法和间接法，前者
ELISA方法的基本类型、用途及操作程序（二）
4、竞争ELISA 此法主要用于测定小分子抗原及半抗原，其原理类似于放射免疫测定。其基本程序为：① 抗体包被 → 4℃过夜，洗涤三次、抛干② 加入待检抗原及一定量的酶标抗原（对照孔仅加酶标抗原）→ 37℃ 60分钟，洗涤三次、抛干③ 加底物液 → 37℃ 20分钟，加终止液④ 用ELISA检
简述间接测热法的测量步骤
①测出机体在一定时间内的O2耗量和CO2耗量。 ②测出在该段时间内从尿中排出的尿氮量，体内氧化1g蛋白质可产生0.16g尿氮（因为蛋白质平均含氮量为16%），即如有1克尿氮产生，则有6.25克蛋白质被氧化分解。所以将测出的尿氮量×6.25为体内氧化蛋白质的量。再计算出蛋白质氧化分解的O2耗量和
脑的基因转移：间接体内法和直接体内法
实验材料 遗传修饰细胞的培养成年宿主小鼠聚烯吡酮磺溶液试剂、试剂盒 麻醉剂仪器、耗材 小鼠大脑图片集耳打孔器带有电极操作的脑定位支架以及汉密尔顿注射夹外科用具bulldog 磁夹海绵中号镊子伤口夹26G针汉密尔顿注射器实验步骤 1.为移植开始培养基因修正的细胞，收获 80%~90% 的汇合度的细胞。
大观霉素间接竞争性ELISA的建立及应用
大观霉素（spectinomycin，SPE）是一种氨基糖苷类广谱抗生素，是Mason于1961年首次从链霉菌中分离得到[1]。从结构上讲，氨基糖苷类抗生素分子中均含有氨基糖苷结构。而SPE（图1）是一种氨基环醇类抗生素，没有氨基糖苷结构，但在许多文献资料中SPE都被归为氨基糖苷类药物。在临床中，S
间接免疫荧光法原理
间接免疫荧光试验是用特异性抗体与标本中相应抗原反应后，再用荧光素标记的第二抗体（抗抗体）与抗原-抗体复合物中第一抗体结合，洗涤后在荧光显微镜下观察特异性荧光，以检测未知抗原或抗体。本法比直接法敏感度提高5-10倍，且一种荧光二抗可检测多种抗原抗体系统，缺点是易产生非特异性荧光。
酶联免疫吸附（ELISA）实验——间接法（测抗体）
实验方法原理图1：间接法测抗体示意图间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM)，再经孵育洗涤后，加底物显色，底物降解的量，即为欲测抗体的量，
鸡脂蛋白脂酶ELISA试剂盒操作程序
Elisa试剂盒 性能: 1．准确性：标准品线性回归与预期浓度相关系数R值，大于等于0.9900。 2．灵敏度：z低检测浓度小于10 pg/ml。 3．特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 4．重复性：板内、板间变异系数均小于15%。 样本处理及要求1. 血清：将收集于血清分离管的全血标
直接－ELISA法
实验概要ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的
ELISA法介绍
经典的化学分析方法（如滴定分析、重量分析、分光光度法）能对化学体系组分进行常量或微量分析，而对复杂生物体系的微量成分的测定往往力不从心。在此背景下，科学家研发了一系列测定生物体系成分含量的方法，其中免疫化学法（如酶联免疫法、免疫荧光法、放射免疫法）因具有高特异性、超微量分析生物体有机成分的特点而得到