科学家使用改造后的酵母细胞合成长春碱
长春碱(Vinblastine)，又称长春花碱，是提取自马达加斯加长春花的天然物质，能够抑制微管蛋白聚合及纺锤体微管形成，从而抑制癌细胞分裂。长春碱作为抗癌药物，其获取受植物资源的严重制约。 近日，丹麦技术大学、加州大学伯克利分校等研究机构的科学家发表了题为“A microbial supply chain for production of the anti-cancer drug vinblastine”的研究论文。该研究在酵母细胞中从头构建了长春碱两个重要前体（长春质碱和文多林）的完整生物合成途径，该过程共进行了56次基因编辑，包括34个植物异源基因的表达，以及10个酵母基因的敲除、低表达和过表达，从而改善合成长春碱的前体供应。最终通过提纯这两种前体物质，偶联生成长春碱。 该研究认为，酵母可作为一个可扩展平台，实现3000多种单萜吲哚生物碱（MIA）及其类似物的生物合成。......阅读全文
科学家使用改造后的酵母细胞合成长春碱
长春碱(Vinblastine)，又称长春花碱，是提取自马达加斯加长春花的天然物质，能够抑制微管蛋白聚合及纺锤体微管形成，从而抑制癌细胞分裂。长春碱作为抗癌药物，其获取受植物资源的严重制约。 近日，丹麦技术大学、加州大学伯克利分校等研究机构的科学家发表了题为“A microbial suppl
半合成酵母出炉
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合成酵母菌研究获进展
继2017年3月国际期刊《科学》（Science）以封面形式报道了我国科学家参与的酿酒酵母基因组合成计划（Sc2.0）的里程碑式进展，短短一年后，2018年5月22日，国际期刊《自然-通讯》（Nature Communications）以专刊形式七篇齐发，聚焦中英美德四国科研团队在合成酵母菌株应用方
酿酒酵母做细胞工厂，改造后可合成名贵香料原料
近日，中科院大连化学物理研究所研究员周雍进团队在天然产物萜类合成生物学研究中取得新进展。团队在酿酒酵母中构建并优化了二萜香紫苏醇生物合成途径，通过全局调控中心代谢途径，实现了香紫苏醇的高效合成。相关成果发表在《代谢工程》上。 龙涎香是重要名贵高级香料，其实质是抹香鲸肠内分泌物的干燥品。近年来，研
硫酸长春碱
性状本品为白色或类白色的结晶性粉末;无臭;有引湿性;遇光或热易变黄。本品在水中易溶,在甲醇或三氯甲烷中溶解,在乙醇中极微溶解。鉴别(1)取本品0.1mg,加1%硫酸铈铵的磷酸溶液1~2滴,即显紫红色至暗紫红色(2)取含量测定项下的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在215nm与264n
酵母活细胞染色
实验步骤展
科研人员在酵母中合成记忆环
哈佛医学院的研究人员成功在酵母细胞中合成了一种以DNA为基础的记忆环。这一成果标志着人们向着合成生物学领域又前进了重要一步。 在利用随机的DNA小片断构建出基因后，Pamela Silver教授的实验室的研究人员不但重构了基因的动态过程，而且还创造出了一种能够预测记忆如何接收的数学模型。这项研究
酵母细胞破碎实验
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 玻璃珠破菌缓冲液仪器、耗材 玻璃珠拍打器实验步骤 1. 培养并收集酵母菌细胞，在酵母消解酶缓冲液重悬菌体沉淀之前，测定压紧细胞的体积，以下所有步骤均在4℃进行。2. 用1体积的玻璃珠破菌缓冲液重悬细胞。3. 用2体积的玻璃珠破菌缓沖液与细胞混合，加4体积冰冷的酸洗
酵母细胞质粒提取步骤和酵母细胞破壁方法
酵母细胞的细胞壁比较厚，不容易破壁，不如大肠杆菌的质粒 容易提取，最近做了些酿酒酵母的实验，从酿酒酵母中提取质粒，现在就总结下实验的方法和步骤。酵母细胞质粒提取 步骤1. 接种单菌落(待检测酵母细胞)于25mLYNB(补加氨基酸 营养物)培养基中，30℃振荡培养过夜。2.第二天取一滴菌液于进行显微镜
科学家首次成功合成酵母染色体
由美、英、法等多国研究人员组成的科研小组27日宣布，他们成功合成了第一条能正常工作的酵母染色体。这一成果被誉为攀上了合成生物学的新高峰，也是向合成人造微生物等生命体迈出的一大步。 研究人员在新一期《科学》杂志上报告说，他们利用计算机辅助设计技术，历时7年成功构造了源于酿酒酵母的被称作ｓｙｎ
酵母细胞中质粒的加工实验——从酵母细胞中分离质粒
利用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1，它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。它使酵母可以很正常地在30°C生长，而不能在37°C形成菌落。如果用一个酵母菌基因组文库转化cdc101-1菌株，通过分离温度不敏感菌落，那么就可能分离到一个可以互补这种突
酵母细胞的观察实验
酵母细胞的直径大约 5 pm，它们的很多重要特征在光学显微镜下都能够观察到。 在实验室中，最好定期在相差显微镜下观察酵母培养物，以掌握细胞的生理状态以及污染情况。很多现代酵母细胞生物学研究采用复杂检测方法，用蛋白质特异抗体或特异结合某些细胞器的荧光染料对酵母细胞染色，近来，开始使用绿色荧光蛋白（GF
酵母细胞的观察实验
酵母细胞的直径大约 5 pm，它们的很多重要特征在光学显微镜下都能够观察到。在实验室中，最好定期在相差显微镜下观察酵母培养物，以掌握细胞的生理状态以及污染情况。很多现代酵母细胞生物学研究采用复杂检测方法，用蛋白质特异抗体或特异结合某些细胞器的荧光染料对酵母细胞染色，近来，开始使用绿色荧光蛋白（G
酵母菌细胞密度检测
实验材料 酵母菌仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 1. 在培养基中细胞的密度可以通过分光光度计测定的菌液在600 nm 波长的光密度OD600值来放映。2. 要得到可靠的测量结果，菌液最好稀释到OD600值1以下，在这个范围内，毎0.1OD600相对于约3×105细胞/ml。如此推算，1OD
酵母细胞核制备
实验材料 酵母菌试剂、试剂盒 细胞核缓冲液Ficoll缓冲液仪器、耗材 匀浆机实验步骤 1. 将酵母菌接种于YPD培养基（100 ml 到20 L），剧烈摇动或强制通气条件下培养至对数中期（OD600≈1~5）。培养物在预称重的离心瓶中于4℃， 1 500 g 离心5 min。 2. 确定酵母细
注射用硫酸长春碱
性状本品为白色或类白色的疏松状或无定形固体;有引湿性;遇光或热易变黄鉴别取本品,照硫酸长春碱项下的鉴别(1)、(2)、(4)项试验,显相同的结果检查酸度取本品1瓶,加水10ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为3.5~5.5。干燥失重取本品,以五氧化二磷为干燥剂,在80℃减压干燥至恒重,减
硫酸长春碱的检查方法
检查酸度取本品15mg,加水10ml溶解后,依法测定(通则0631),pH值应为3.5~5.0。溶液的澄清度与颜色取本品50mg,加水10ml溶解后,溶液应澄清无色;如显色,与黄色1号标准比色液(通则0901第一法)比较,不得更深。有关物质照高效液相色谱法(通则0512)测定。供试品溶液(1)取本品
“人工合成酵母基因组计划”最新成果发布
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硫酸长春碱的基本性状
性状本品为白色或类白色的结晶性粉末;无臭;有引湿性;遇光或热易变黄。本品在水中易溶,在甲醇或三氯甲烷中溶解,在乙醇中极微溶解。
硫酸长春碱的鉴别方法
鉴别(1)取本品0.1mg,加1%硫酸铈铵的磷酸溶液1~2滴,即显紫红色至暗紫红色(2)取含量测定项下的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在215nm与264nm的波长处有最大吸收。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集481图)一致(4)本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应(通则
硫酸长春碱的鉴别检查方法
鉴别(1)取本品0.1mg,加1%硫酸铈铵的磷酸溶液1~2滴,即显紫红色至暗紫红色(2)取含量测定项下的溶液,照紫外可见分光光度法(通则0401)测定,在215nm与264nm的波长处有最大吸收。(3)本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集481图)一致(4)本品的水溶液显硫酸盐的鉴别反应(通则
硫酸长春碱的含量测定方法
含量测定照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液取本品约5mg,精密称定,置50ml量瓶中,精密加水5ml溶解后,随振摇随加无水乙醇至刻度,摇匀,精密量取10ml,置另一50ml量瓶中,再加无水乙醇稀释至刻度,摇匀测定法取供试品溶液,在264nm的波长处测定吸光度,按C46HsN4O3·
酵母细胞质粒分离实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD仪器、耗材 接种针培养瓶摇床实验步骤 1. 挑取几个含质粒的酵母宿主菌菌落，接种于10 ml 非选择性培养基，于30℃培养过夜。 2. 在非选择性平板上于30℃培养2天以得到单菌落，大多数情况下，可以得到约200~300个单菌落（约每平板100个菌落）。 3.
酵母细胞质粒分离实验
在非选择性生长条件下，大多数大肠杆菌/酵母菌穿梭载体的丟失频率大约1%，采用本方案不易分离除去的一个质粒是内源性2 μm 质粒，2 μm DNA自发丢失的频率约为每代10-4。实验材料酵母试剂、试剂盒YPD仪器、耗材接种针培养瓶摇床实验步骤1. 挑取几个含质粒的酵母宿主菌菌落，接种于10 ml 非
将DNA导入酵母细胞实验
乙酸锂转化 电穿孔转化 单链高分子质量载体DNA的制备 实验方法原理 实验材料
将DNA导入酵母细胞实验
实验方法原理 实验材料 待转化的酵母菌株试剂、试剂盒 YPD培养基YPAD培养基：添加30 mg L腺嘌呤半硫酸的YPD培养基高纯无菌水l0×TE缓冲液pH 7.5无菌10×乙酸锂储液：1 mol L乙酸锂pH 7.5 (用稀乙酸调pH)过滤除菌DNA ：高分子质量单链载体DNA和待转化DN
酵母菌细胞的诱变实验
实验材料 酵母试剂、试剂盒 YPD磷酸钠缓冲液甲乙硫醚刀豆氨酸硫代硫酸钠仪器、耗材 试管摇床离心机平板实验步骤 1. 将过夜培养的待诱变酵母菌株转接于5 ml YPD培养基，于30℃继续培养。检查细胞密度，记录并调整到2×108细胞/ml。2. 转移1 ml 的菌悬液到无菌的离心管中。高速离心5
酵母菌细胞融合实验
实验概要学习酵母菌原生质体制备和再生技术，为了解酵母菌为材料的外源基因转移等技术奠定基础。实验原理酵母菌如酿酒酵母，在遗传学和分子生物学的研究中有很大作用，尤其是近些年来，随着科技的进步，酵母菌的遗传操作如转化、基因克隆和外源基因在酵母受体中的表达等技术都有了突破性的进展。作为受体系统的酵母菌原生质
酵母菌细胞密度检测实验
实验材料酵母菌仪器、耗材分光光度计离心机实验步骤1. 在培养基中细胞的密度可以通过分光光度计测定的菌液在600 nm 波长的光密度OD600值来放映。2. 要得到可靠的测量结果，菌液最好稀释到OD600值1以下，在这个范围内，毎0.1OD600相对于约3×105细胞/ml。如此推算，1OD600
天津工生所酿酒酵母合成甲基酮研究获进展
甲基酮是一类脂肪酸衍生物，可用作信息素类杀虫剂，也被用于香精、香料、化学合成中间体以及生物燃料调和剂。由于植物提取效率低，甲基酮主要通过烃类的化学氧化合成。代谢工程和合成生物学的发展，为利用微生物平台合成甲基酮提供了可能。 中国科学院天津工业生物技术研究所研究员王钦宏和戴宗杰带领的进化与代谢工