关于瞬时表达的名词解释
在载体选用方面,瞬时表达可以不需要筛选标签,如常用的NEO抗G418等,但使用稳定表达的载体亦可以用来进行瞬时表达。 当外源基因导入植物细胞中以后,其表达方式有瞬时表达(transient expression)和稳定表达(stable expression)两种。在瞬时表达状态的基因转移中,引入细胞的外源DNA和宿主细胞染色体DNA并不发生整合。这些DNA一般随载体进入细胞后12小时内就可以表达,并持续约80小时左右。在稳定表达状态的基因转移中,导入宿主细胞的DNA整合到细胞染色体DNA上,以永久形式存在,并可传给后代,形成稳定的转化细胞。基因的导入方法可分为间接转基因方法和直接转基因方法。 植物瞬时表达系统在启动子分析、基因功能分析和生产重组蛋白方面用途广泛。......阅读全文
关于瞬时表达的名词解释
在载体选用方面,瞬时表达可以不需要筛选标签,如常用的NEO抗G418等,但使用稳定表达的载体亦可以用来进行瞬时表达。 当外源基因导入植物细胞中以后,其表达方式有瞬时表达(transient expression)和稳定表达(stable expression)两种。在瞬时表达状态的基因转移
关于瞬时表达的优点介绍
①简单快速。转化基因可在转化的一周内进行分析,避免了组织培养等繁杂过程; ②表达水平高。当单链的T-DNA进入植物细胞后,许多未整合到植物基因组中的游离外源基因同样可以表达。 ③安全有效。不受植物生长发育过程的影响,不产生可遗传的后代,结果可靠直观,不存在基因漂移的风险。常用基因枪转化和农杆
关于瞬时表达的基本信息介绍
瞬时表达,即瞬时转染后的初期,质粒或DNA片段是游离在细胞中的,能够进行表达,称为瞬时转染表达。随后,游离在细胞中的质粒或DNA片段有两种归化,一种是被降解,还有一种是插入染色体中而能够持续地稳定地表达。
什么是瞬时表达和稳定表达?
瞬时表达:外源片段不能随细胞分裂而一同复制,导致表达时间短暂,且表达量随时间逐渐下降。稳定表达:是指外源片段整合入细胞基因组中,并能随细胞分裂稳定传递下去,表达量长时间处于稳定水平。那稳定株,顾名思义当然是属于稳定表达的体系了。
CRISPR/Cas9驱动的瞬时表达系统
维克森林再生医学研究所的科学家改进了DNA编辑工具,缩短了编辑蛋白停留在细胞内的时间,他们称这种新方法为“打了就跑”。 CRISPR技术用于改变DNA序列和改变基因功能,CRISPR/Cas9是一种酶,它像剪刀一样,在特定位置切割两条DNA链,添加、移除或修复DNA片段,但CRISPR/Cas
重组蛋白的高产量瞬时表达
图a. 用ELISA法测得培养液中IgG的含量;横轴为天数,纵轴为IgG滴度。 采用高密度瞬时转染(High-density transfection)的方法,可以在HEK-293 EBNA1细胞中大量表达重组蛋白。实验表明,该方法具有操作简单,培养周期短,转染效率高,批次产量高的优
瞬时转染真核基因表达调控技术
调节瞬时转染基因的表达*四环素作为哺乳动物细胞中可诱导基因表达的调控物阶段一:pTet-tTAk稳定转染成纤维细胞培养和转染细胞1. 在DMEM完全培养液中培养贴壁细胞。转染前一天,把细胞换到含有0.5μg/ml四环素-HCl(四环素)的DMEM完全培养液中。每个10 cm培养皿中加入足量细胞,使转
瞬时转染真核基因表达调控技术
调节瞬时转染基因的表达l 四环素作为哺乳动物细胞中可诱导基因表达的调控物阶段一:pTet-tTAk稳定转染成纤维细胞培养和转染细胞1. 在DMEM完全培养液中培养贴壁细胞。转染前一天,把细胞换到含有0.5μg/ml四环素-HCl(四环素)的DMEM完全培养液中。每个10 cm培养
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇),高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar),无水乙醇,无菌去离子水,12.5 M CaCl2 ,0.1 M亚精胺,等渗培养基(MS培养基)实验设备高速离心机,1.5 ml Ep管,涡旋器,超净台,基因枪,气瓶,激光共聚焦显微
基因枪轰击洋葱表皮观察GFP瞬时表达
实验概要本实验在构建了OsAGAP瞬时表达载体的基础上,采用基因枪轰击洋葱表皮观察了GFP的瞬时表达。主要试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇),高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar),无水乙醇,无菌去离子水,12.5 M CaCl2,0.1 M亚精胺,等渗培养基
海南大学发表BMC-Biotechnol文章构建新的瞬时表达体系
近日海南大学热带农林学院海南省热带生物资源可持续利用重点实验室罗丽娟教授课题组与刘进平教授课题组合作,建立了一种成熟高效的木薯叶肉原生质体瞬时表达体系。这一研究成果公布在BMC Biotechnology杂志上。 木薯(Manihot esculenta Crantz)属于大戟科木薯属植物,起
关于瞬时转染的优点介绍
瞬时转染(transient transfection)是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞,并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。 第一、操作简
关于酶标仪的名词解释
中心定位 仪器会自动对酶标孔进行中心定位,中心定位是要消除酶标孔底的凸凹引起的厚薄不均带来检测的不准确。在对每一个酶标仪进行检测时,仪器其实要进行35个点的测量,选取最中间的5个点的均值为本孔的OD值。 光源的参照通道 参照通道是用来校准由于电压不稳或灯泡磨损带来的影响。 用途和其它提示
植物瞬时表达技术生产药用蛋白-颠覆传统生物生产途径
辞去美国大学终身教授职务,率领团队回国创业,睿诚海汇首席科学家王跃驹教授的创业项目“植物瞬时表达技术平台生产药用蛋白”,有望颠覆传统生物医药生产途径,大幅度降低一些治疗重大疾病药物的价格,很可能给整个生物制药行业带来一场革新。 利用生菜可以生产疫苗,抗肿瘤抗体,以及其他蛋白种类?听起来是否感到
Cell-Res:CRISPR/Cas9瞬时表达基因组编辑体系
基因组编辑技术是最新发展起来的植物基因功能研究及定向育种的重要手段。在植物中实现基因组编辑的常规方法是将序列特异性核酸酶(如CRISPR/Cas9)的编码DNA转化植物细胞,稳定表达进而实现对目的基因的定点编辑。这种情况下,CRISPR载体整合在植物染色体中,需通过后代分离获得不含CRISPR/
关于油品的常用名词解释
1.石油:地下天然存在的,主要是由多种烃组成的复杂混合物。2.汽油:通常指沸程在30-220℃范围内,可以含有适当添加剂的精制石油馏分。3.煤油:作为照明或加热用的石油燃料。4.柴油:压燃式发动机(柴油机)作为能源使用的石油燃料。5.石蜡:从石油馏分脱油制得的,主要成分是正构烷烃,在常温下有明显晶体
关于小肝癌的名词解释
核心提示: 其实,在肝癌的分类中,还有一个不太被人知道的的小分支,那就是小肝癌,顾名思义,小肝癌是指体积较小的肝癌,是指肝细胞癌中单个癌结节最大直径不超过3cm或者是两个癌结节直径之和不超过3cm的肝癌。肝区疼痛是小肝癌首发症状,常常表现为右上腹部肝区间歇性、持续性钝痛或刺痛,
关于瞬时转染的基本信息介绍
瞬时转染(transient transfection)是将DNA导入真核细胞的方式之一。在瞬时转染中,重组DNA导入感染性强的细胞系以获得目的基因暂时但高水平的表达。转染的DNA不必整合到宿主染色体,可在比稳定转染较短时间内收获转染的细胞,并对溶解产物中目的基因的表达进行检测。
如果做瞬时表达只需要做几个子弹怎么办?
选择手动制作,直接用移液器加样与子弹枪孔中,360度旋转加入,防止流出,然后树立与超净台中,打开最小档位的风吹5分钟左右,具体时间看金粉挂壁情况。
关于血凝素的名词解释
血凝素 英文:hemagglutinin; haemagglutinin; hemoagglutinin, 血凝素是指红血球凝聚素。病毒的表面存在两种蛋白质,一种称为红血球凝聚素(hemagglutinin),另一种为神经氨酸酶(neuraminidase)。高致病性禽流感病毒H5N1中的“
关于启动子的名词解释
启动子是位于结构基因5'端上游的DNA序列,能活化RNA聚合酶,使之与模板DNA准确的结合并具有转录起始的特异性。 起始时间和表达的程度。启动子(Promoters)就像“开关”,决定基因的活动。既然基因是成序列的核苷酸(nucleotides),那么启动子也应由DNA组成。启动子本身
关于胆囊收缩素的名词解释
胆囊收缩素(CCK)是由小肠粘膜I细胞释放的一种肽类激素。其主要作用是促进胰腺腺泡分泌各种消化酶,促胆囊收缩,排出胆汁,对水和HCO3-的促分泌作用较弱。CCK还可作用于迷走神经传入纤维,通过迷走——迷走反射刺激胰酶分泌。CCK通过激活磷脂酰基醇系统,在Ca2+介导下对胰腺起作用。CCK与胰泌素
农杆菌瞬时表达CRISPR编辑基因和快速筛选突变植株新方法
最近,美国康涅狄格大学和南京农业大学李义教授团队在Horticulture Research发表了题为“A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutan
农杆菌瞬时表达CRISPR编辑基因和快速筛选突变植株新方法
最近,美国康涅狄格大学和南京农业大学李义教授团队在Horticulture Research发表了题为“A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutan
农杆菌瞬时表达CRISPR编辑基因和快速筛选突变植株新方法
最近,美国康涅狄格大学和南京农业大学李义教授团队在Horticulture Research发表了题为“A method for the production and expedient screening of CRISPR/Cas9-mediated non-transgenic mutan
细胞瞬时转染
1. 1细胞瞬时转染 原理:通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。应用: 观察目的基因及其表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)一
细胞瞬时转染
摘要: 通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。 原理: 通过 脂质 体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细
细胞瞬时转染
细胞瞬时转染 实验方法原理 通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的
细胞瞬时转染
细胞瞬时转染可用于(1)观察目的基因功能(2)表达蛋白在某种细胞中的功能(短时间即可进行观察,但效应会很快丢失)。实验方法原理通过脂质体介导转染法及电穿孔等基因转染技术,将靶基因导入细胞,一般在转染后48小时左右,靶基因即可在细胞内表达。根据不同的实验目的,48小时后即可进行靶基因表达的检测等实验。
关于血清总胆固醇的名词解释
血清总胆固醇是指血液中所有脂蛋白所含胆固醇之总和。总胆固醇包括游离胆固醇和胆固醇酯,肝脏是合成和贮存的主要器官。胆固醇是合成肾上腺皮质激素、性激素、胆汁酸及维生素D等生理活性物质的重要原料,也是构成细胞膜的主要成分,其血清浓度可作为脂代谢的指标。指临床上将血总胆固醇增高称为高胆固醇血症。 我国