重组蛋白的定义

其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的 宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统;1.原核表达系统:最常用的大肠杆菌蛋白表达,真核表达系统如酵母,哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞CHO,HEK293)及、昆虫细胞蛋白表达系统。重组蛋白的产生尚可利用 转基因动物的 乳腺或者植物产生,产生的重组蛋白作为生物制药的产物,在医学中作用显著。利用基因工程技术,可以使细胞或者动物本身变成“批量生产药物的工厂”。 以利用转基因动物的乳腺表达重组蛋白为例:其方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的 启动子等调控组件重组在一起,通过 显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会 泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋......阅读全文

药监局发重组胶原蛋白生物材料命名指导原则的通告

  国家药监局关于发布重组胶原蛋白生物材料命名指导原则的通告(2021年第21号)  为进一步规范重组胶原蛋白生物材料命名,推动新型生物材料高质量发展,国家药监局组织制定了《重组胶原蛋白生物材料命名指导原则》,现予发布。  特此通告。

关于位点特异重组的重组效应简介

  位点特异性重组既可以发生在一个DNA分子中,也可以发生在两个DNA分子间。重组酶识别位点有方向性,所以重组时两个重组位点的排列有方向性。  1.插入 当位点特异性重组发生在两个闭环DNA之间或一个闭环DNA与一个线性DNA之间时,重组的结果是DNA插入(即整合),并且插入之后在两端形成同向重复序

重组体配子

中文名称重组体配子英文名称recombinant gamete定  义遗传物质发生重组后形成的配子。应用学科遗传学(一级学科),细胞遗传学(二级学科)

重组DNA转化

目的:在体外连接组装而成的重组DNA分子只能转入合适的受体细胞,才能大量地进行复制、增殖和表达。通过实验学会重组DNA转化的最基本的操作以及如何提高转化效率的基本思路。 原理:带有外源DNA片段的重组体分子在体外构建成后,需要导入适当的宿主细胞内进行繁殖或表达出具有一定生物活性的蛋白。能够作为重组体

DNA重组技术

连接反应的策略    可以采用几种策略来进行外源DNA片段和质粒载体的连接。对此,可依据外源DNA片段未的性质,以及质粒载体与外源DNA上限制酸切位点的性质来作出选择。(一)外源DNA片段未的性质带有各种未的外源DNA的克隆方法见下表:────────────────────────────────

哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验

实验步骤 一、转染方法 对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方,这些配方都具有单一的ZL化组分,而且毫无疑问,它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲

哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验

一、转染方法对于脂质体转染 (Upofection), 可以从商业途径获得许多配方,这些配方都具有单一的ZL化组分,而且毫无疑问,它们中的大部分都能非常有效地将质粒 D N A 转 人 细 胞 。其缺点是价格不菲—- 在使用这些试剂时,对于超出数百毫升规模的瞬时转染,经济上是不可行的。大

重组蛋白真核表达系统与原核表达系统的区别

 重组蛋白真核表达采用原核表达系统进行研究,主要方法是将已克隆到目的基因DNA的片段的载体转化到细菌中,通过IPTG诱导和终纯化获得所需的目的蛋白。其优点是可以在短时间内获得基因表达产物,所需成本相对较低。   目前的表达系统各有利弊,但一般理想的表达系统满足以下几点:一是特异性,不受其他内源性因素

注射用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白溶液获批上市

  近日,国家药品监督管理局批准了山西锦波生物医药股份有限公司生产的注射用重组Ⅲ型人源化胶原蛋白溶液创新产品注册申请。  该产品为无色或类白色液体,由重组Ⅲ型人源化胶原蛋白和0.9%的生理盐水组成,适用于面部真皮组织填充以纠正额部动力性皱纹(包括眉间纹、额头纹和鱼尾纹)。该产品采用的重组胶原蛋白生物

精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液的简介

  精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液,本品适用于需要采用胰岛素来维持血糖水平的糖尿病患者。也适用于早期糖尿病患者的早期治疗以及妊娠期间糖尿病患者的治疗。  本品主要组成成份为:  30%重组人胰岛素(常规人胰岛素)  70%精蛋白锌重组人胰岛素(中效人胰岛素)  化学结构式:重组人胰岛素结构式为  分

哺乳动物细胞瞬时基因转移法制备重组蛋白实验

报道显 TK,在 过 去 的 1 0 年 ,已经开发出 了多种高效的瞬时转染(transient transfection) 方法 , 它们可 以 满 足 甚 至 超出 了 上 述 需 求 。 目 前 蛋 白 质 的 瞬 转 表 达 主 要 是 在H E K 2 9 3 衍生的细胞系中进行, 而同时

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体2

二、噬菌体载体作为细菌寄生物的噬菌体,大多数具有编码多种蛋白质的基因,能利用宿主细胞的蛋白质合成体系,进行生长和增殖。构建的噬菌体载体,以λ噬菌体、M13和粘粒最为常用。㈠ λ噬菌体载体野生型λDNA是一种基因组为4.8 kb的线性双链DNA,全部序列已知,共编码50多个基因。其中约一半基因参与

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定1

重组DNA是在体外用限制性内切酶,将不同来源的DNA分子进行特异地切割,获得的目的基因或DNA片段与载体重新连接,从而组成一个新的DNA杂合分子。重组的DNA分子能够通过一定的方式进入相应的宿主细胞,在宿主细胞中进行无性增殖,获得大量的目的基因或DNA片段,此过程称基因克隆。重组的DNA分子也能够在

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体1

载体(vector)是携带靶DNA(目的DNA)片段进入宿主细胞进行扩增和表达的运载工具。常用的载体是通过改造天然的细菌质粒、噬菌体和病毒等构建而成。目前已构建成的载体主要有质粒载体、噬菌体载体、病毒载体和人工染色体等多种类型,亦可根据其用途不同分为克隆载体和表达载体二类。载体的构建和选择应考虑以下

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组的载体3

在作为载体时,这些噬菌体有一个很大的优点,即克隆到M13mp载体的外源DNA片段(双链),在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆,可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板:①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板;②制备仅有一条

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定2

(1)CaCl2处理以后的转化: 当细菌处于0℃、二价阳离子(如Ca2+、Mg2+等)低渗溶液中时,细菌细胞膨胀成球形,处于感受态;此时转化混合物中的DNA形成抗DNA酶的羟基-钙磷酸复合物粘附于细胞表面,重组DNA在42℃短时间热冲击后吸附在细胞表面,在丰富培养基中生长数小时后,球状细胞恢复原

DNA重组(DNA-recombination)技术:DNA重组与鉴定3

当多克隆位点有外源DNA片段插入时,破坏此酶的N端阅读框架,产生无α互补功能的N端片段,因此在带有外源DNA片段的细菌在含有IPTG/X-gal的培养基上呈白色,见图7-11 。如果外源DNA插入片段相当短,不破坏β-半乳糖苷酶的氨基端氨基酸序列的阅读框,有时产生的重组体菌落不呈白色而是呈浅蓝色。4

关于DNA重组的减数分裂重组的介绍

  在减数分裂早期出现的四种染色单体中的两种(前期I)彼此配对并且能够相互作用。重组由双链断裂引发。其它类型的DNA损伤也可能引发重组。例如,交联剂如丝裂霉素C引起链间交联可以通过HRR修复,引发重组。  重组产物有两种:染色体侧翼区域被交换的“交叉”(CO)型和染色体侧翼区域未被交换的“非交叉”(

病毒载体与埃博拉病毒保护性抗原GP蛋白重组的疫苗

  如重组水泡口腔炎病毒(VSV)疫苗,其表面有一个糖蛋白,作用是识别宿主细胞。这个蛋白就相当于一把钥匙,打开人体细胞那把锁之后,就可长驱直入了。研究者对这种病毒进行了转基因,把它原有的糖蛋白用埃博拉病毒表面的糖蛋白替换。改造之后的VSV疫苗既能让机体产生针对埃博拉病毒的抗体,同时又没有致病性。  

多种新冠病毒重组蛋白表达成功,将加快病毒检测进度

  2019-nCoV新型冠状病毒疫情肆虐,医护人员冲在的抗病救人的第一线,人民群众闭门在家就是对“社会最大的贡献”,但是还有一批人在后方默默的奉献着。这批人就是科研工作者,他们正在夜以继日的研发新型冠状病毒的检测试剂盒、治疗药品及疫苗。  义翘神州作为科研工作者的坚强后盾,在这次疫情面前,勇往直前

中国首个由昆虫细胞生产的重组蛋白新冠疫苗试验许可

  据成都天府国际生物城22日消息,四川大学华西医院生物治疗国家重点实验室研发的重组蛋白新冠疫苗获得国家药品监督管理局临床试验批文,这是中国首个由昆虫细胞生产的重组蛋白新冠疫苗。  据悉,该疫苗靶向SARS-CoV-2的刺突蛋白受体结合域(S-RBD),产生中和抗体阻断病毒感染人体细胞。该疫苗在猴子

一款重组蛋白新冠疫苗获国家临床试验许可

   记者从四川大学华西医院获悉,该院生物治疗国家重点实验室研发的重组蛋白新冠疫苗已于21日获国家药监局临床试验批文。该疫苗靶向SARS-CoV-2,使用其刺突蛋白受体结合域(S-RBD),产生中和抗体以阻断病毒感染人体细胞。  该疫苗是利用昆虫细胞在培养液中大量繁殖,将新冠病毒的基因引入昆虫细胞,

3剂新冠重组RBD蛋白疫苗足以诱导产生高效体液免疫应答

  新型冠状病毒的爆发造成了全球医疗系统的重大危机,目前已经导致4亿人的感染。包括灭活疫苗、重组疫苗、病毒载体疫苗和mRNA疫苗在内的多种疫苗,已经被作为降低病毒感染传播和新冠肺炎发病的主要手段。通过免疫学原理评价疫苗诱导的长效免疫保护效果并确定合适的疫苗接种策略迫在眉睫。  2022年3月14日,

重组柔嫩艾美耳球虫SO7-蛋白的的原核...

实验概要用鸡艾美尔球虫的SO7基因与重组质粒pMG36t 结合,再把pMG36t-SO7导入到 E. coli χ13 体内,选择阳性的E. coli χ13( pMG36t-SO7 )即: E. coli χ2,然后用它去免疫,分析免疫效果。实验原理通过原核表达系统大肠杆菌来表达柔嫩艾美耳球虫的一

国家药监局:《重组人源化胶原蛋白》医疗器械行业标准

  近日,国家药监局发布了YY/T 1888-2023《重组人源化胶原蛋白》医疗器械行业标准的公告(2023年第14号)。医疗器械行业标准信息表

2020版《中国药典》三部人用重组DNA蛋白制品总论

  1 概述  人用重组DNA蛋白制品是采用重组DNA技术,对编码所需蛋白质的基因进行遗传修饰,利用质粒或病毒载体将目的基因导入适当的宿主细胞,表达并翻译成蛋白质,经过提取和纯化等步骤制备而成的具有生物学活性的蛋白质制品,用于疾病的预防和治疗。  本总论是对治疗用人用重组DNA蛋白制品生产和质量控制

精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液的药理毒理

  胰岛素主要的作用是调整血糖的代谢。  此外,胰岛素在许多不同的组织器官中有合成代谢和抗分解代谢的作用。在肌肉组织中,本品有增加糖原、脂肪酸、甘油和蛋白质的合成和氨基酸的吸收,降低糖原分解、糖异生、酮生成、脂肪分解、蛋白质代谢和氨基酸的输出等作用。  皮下注射胰岛素后,其典型的活性作用曲线(葡糖糖

赛多利斯收购Albumedix,创新产品赋能先进重组蛋白疗法

总部位于英国的Albumedix 是重组白蛋白解决方案的领军企业,高度创新并且盈利良好重组人白蛋白是新型生物药品的关键原料,尤其用于细胞疗法、病毒疗法和疫苗的生产赛多利斯将以约4.15亿英镑的价格收购Albumedix所有流通股生命科学集团赛多利斯将通过其在法国上市的子公司Sartorius Ste

重组-DNA-技术介绍

中文名称重组 DNA 技术英文名称recombinant DNA technique定  义在体外将两个或多个不同的DNA片段全部或部分构建成一个DNA分子的方法。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)

重组RNA的定义

中文名称重组RNA英文名称recombinant RNA定  义用人工手段进行了改造和重新组合的RNA。重组RNA可以经重组DNA转录获得,也可以使用专门作用于RNA的酶类(如T4 RNA连接酶、Qβ-RNA复制酶、RNA酶Ⅲ)等工具和技术获得。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(