重组蛋白的定义

其获得途径可以分为体外方法和体内方法。两种方法的前提都是应用基因重组技术,获得连接有可以翻译成目的蛋白的基因片段的重组载体,之后将其转入可以表达目的蛋白的 宿主细胞从而表达特定的重组蛋白分子。当前重组蛋白的生产主要有四大系统;1.原核表达系统:最常用的大肠杆菌蛋白表达,真核表达系统如酵母,哺乳动物细胞蛋白表达(常用的细胞CHO,HEK293)及、昆虫细胞蛋白表达系统。重组蛋白的产生尚可利用 转基因动物的 乳腺或者植物产生,产生的重组蛋白作为生物制药的产物,在医学中作用显著。利用基因工程技术,可以使细胞或者动物本身变成“批量生产药物的工厂”。 以利用转基因动物的乳腺表达重组蛋白为例:其方法是将药用蛋白基因与乳腺蛋白基因的 启动子等调控组件重组在一起,通过 显微注射等方法,导入哺乳动物(哺乳动物才会 泌乳)的受精卵中,然后,将受精卵送入母体内,使其生长发育成转基因动物。转基因动物进入泌乳期后,可以通过分泌的乳汁来生产所需要的蛋......阅读全文

DNA重组的作用机制

遗传重组由许多不同的酶催化。重组酶是DNA重组过程中催化链转移步骤的关键酶。 RecA是在大肠杆菌中发现的主要重组酶,负责修复DNA双链断裂(DSBs)。在酵母和其它真核生物中,修复DSB需要两种重组酶。 RAD51蛋白是有丝分裂和减数分裂重组所必需的,而DNA修复蛋白DMC1对减数分裂重组具有特异

简述基因重组的过程

  由于基因的独立分配或连锁基因之间的交换而在后代中出现亲代所没有的基因组合。  原核生物的基因重组有转化、转导和接合等方式。受体细胞直接吸收来自供体细胞的DNA片段,并使它整合到自己的基因组中,从而获得供体细胞部分遗传性状的现象,称为转化。通过噬菌体媒介,将供体细胞DNA片段带进受体细胞中,使后者

重组葡激酶的简介

  组葡激酶 (Recombinant Stapylokinase r-Sak )[1]是通过基因工程的方法制备的一种新型溶血栓药物。用于由血栓引起的急性心肌梗塞的治疗,并有治疗外周血管血栓及由血栓引起的缺血性组织坏死类疾病的应用前景,也可开发成预防治疗血栓病的药物。它与目前临床使用的链激酶 (SK

重组疫苗的主要类型

一是DNA重组疫苗,以这一方式面世的第一种疫苗是乙型肝炎疫苗。该疫苗对乙型肝炎表面抗原HBsAg进行克隆扩增,应用重组DNA技术从酵母菌生产疫苗。二是通过消除和修饰病原微生物上已知的导致致病性基因来制备疫苗。以此方法研制的针对轮状病毒的第一代重组疫苗已在美国和芬兰进行临床试验,研究结果提示该疫苗对由

关于重组修复的简介

  重组修复是DNA修复机制之一,即双链DNA中的一条链发生损伤,在DNA进行复制时,由于该损伤部位不能成为模板,不能合成互补的DNA链,所以产生缺口,而从原来DNA的对应部位切出相应的部分将缺口填满,从而产生完整无损的子代DNA的这种修复现象。这种修复现象最初是在大肠杆菌中发现的,对修复能力缺乏的

体外DNA重组技术5

(三)DNA酶切片段的回收【实验方法与步骤】1.冻融法:(1)在UV灯下,用手术刀片将含DNA片段的琼脂糖凝胶切下,-70℃冷冻至少 15min,然后在65℃水浴中使胶融化;(2)加入等倍体积TE-饱和酚,剧烈振荡30秒钟,然后-70℃冷冻 15min;(3)室温融化后,12,000rpm离心5mi

同源重组法技术介绍

同源重组法:同源重组(homologous recombination)是将外源基因定位导入受体细胞的染色体上,在该座位因有同源序列,通过单一或双交换,新基因片段替换有缺陷的片段,达到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁组装一Neo基因,则在同源重组后,因有Neo基因,可在含有新霉素(neomyci

DNA重组技术(DNA-Recombination)

一、DNA 的酶切与连接(1)酶切反应:同质粒DNA 的鉴定,只不过是质粒DNA 换为载体DNA 。若大量酶切,则成比例增加。(2)加2倍体积的预冷无水乙醇和1/10体积的3mol/l NaAc混匀,-20℃2h以上。(3)15000rpm离心15min,弃上清。(4)加入75%乙醇洗涤2次,离心弃

重组疫苗的主要应用

最初,重组疫苗是将主要的过敏原重组在一起,代替过敏原提取物达到脱敏的目的,又称为重组过敏原疫苗。但无论是抗原识别受体(BCR 或TCR),还是特异性抗体分子(IgE 或IgG),所识别抗原的位置均不是完整的抗原分子,而是一段特定的氨基酸序列,该段序列称为抗原表位。与此同时,随着人们对过敏原研究的深入

什么是细胞重组结?

中文名称重组结英文名称recombination nodule定  义减数分裂前期Ⅰ的粗线期阶段,联会复合体上形成的球形或椭圆形结构。直径约90 nm,内含蛋白质等,与染色体交叉、交换有关。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞周期与细胞分裂(二级学科)

体细胞重组的概念

淋巴细胞在发育,成熟的过程中,抗原受体基因首先在DNA水平上进行重排,形成可表达BCR和TCR的功能性基因,然后才能得以表达TCR和BCR,这一过程称为体细胞重组。

细胞重组的技术方法

  转移  核体与胞质体在仙台病毒或聚乙二醇的作用下能合并成为完整细胞,称“重组细胞”。目前不仅能使大鼠核体与小鼠胞质体合并成为重组细胞,并能使人的核体与小鼠胞质体形成重组细胞。若将胞质与完整的细胞融合,构成含有一个亲本核和两个亲本胞质的杂种细胞,称“胞质杂种”。这样,就可把一个亲本细胞的胞质基因(

DNA重组技术-酶切

实验概要        通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理   DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。     限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DN

细菌的合成和重组

细菌合成2016年3月28日科学家在实验室中制造了一个人工细菌基因组, [9]只包括生命所需的最少量基因。这一成果使得为了特定任务——如清除石油——而定制基因组的合成生物体成为可能。这种人工细菌能够代谢营养物质并自我复制(分裂和增殖)。它只含有473个基因,相比之下,自然界中的细菌往往拥有数千个基因

重组疫苗的应用介绍

重组疫苗是将主要的过敏原重组在一起,代替过敏原提取物达到脱敏的目的,又称为重组过敏原疫苗。但无论是抗原识别受体(BCR 或TCR),还是特异性抗体分子(IgE 或IgG),所识别抗原的位置均不是完整的抗原分子,而是一段特定的氨基酸序列,该段序列称为抗原表位。与此同时,随着人们对过敏原研究的深入,许多

体外DNA重组技术1

在体外将两个或多个来源相同或不相同的DNA片段连接成新的重组DNA分子,再转到特定宿主细胞中进行自主复制并表达。这是分子生物学中的基本技术。DNA重组技术的基本程序包括:(1)获得外源DNA:外源DNA是进行DNA重组的目的DNA片段,一般采用 DNA聚合酶链式反应(PCR)或逆转录-DNA聚合酶链

体外DNA重组技术3

【实验试剂与器材】(1)Oligo(dT)纤维素(2)层析柱装置(3)1×上样缓冲液:20mM Tris.Cl (pH7.6),0.5M NaCl,1 mM EDTA.Na2 (pH8.0),0.1%十二烷基肌氨酸钠(SLS)配制方法: 用Tris.HCl、NaCl和EDTA母液,加入各成分确切

重组病毒噬斑筛选实验

实验材料转染细胞溶解产物BS-C-1/HuTK-143B/BHK-21/CEF 贴壁生长汇片的细胞试剂、试剂盒完全 2 × 噬斑培养基-5完全MEM-2.5培养基筛选试剂LMP 琼脂糖溶液5-溴脱氧尿苷溶液中性红溶液X-gal溶液X-gluc溶液干冰/乙醇仪器、耗材6孔 35 mm 组织培养板杯状超

RPA重组酶是什么?

  2006 年,Piepenburg 等首次提出了重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重组酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和单链结合蛋白(gp32)以及两条特异性的上下游引物参与的等温扩增。  首先, T4 uvsX

重组蛋白亚单位疫苗:接种3剂次97%接种者产生中和抗体

  中科院微生物所高福院士团队联合安徽智飞龙科马生物制药有限公司研发的重组蛋白亚单位疫苗(ZF2001)1 期和2期临床试验结果表明,该疫苗安全性良好,没有与疫苗相关的严重不良事件,接种3剂次25μg疫苗的97%入组者产生了可以阻断活病毒的中和抗体,中和抗体水平超过康复患者血清。相关成果3月24日发

“一带一路”大健康论坛暨重组胶原蛋白研讨会召开

  8月21日至22日,“一带一路”大健康论坛暨重组胶原蛋白国际研讨会在北京召开。本次会议由中国科学院过程工程研究所和西北大学联合主办,并得到“一带一路”国际科学组织联盟(ANSO)、生物工程学会生物基材料专业委员会和中国未来研究会“一带一路”专业委员会等行业组织的支持。会议主席分别由中国科学院过程

“一带一路”大健康论坛暨重组胶原蛋白研讨会召开

原文地址:http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/8/507204.shtm8月21日至22日,“一带一路”大健康论坛暨重组胶原蛋白国际研讨会在北京召开。本次会议由中国科学院过程工程研究所和西北大学联合主办,并得到“一带一路”国际科学组织联盟(ANSO)、生物

概述精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液的注意事项

  若需改变患者正在使用的胰岛素制剂的类型或生产厂商,应在严格的医疗监控下进行。对于任何有关胰岛素制剂的强度,厂商(制造商)、类型[常规(重组人胰岛素),中效(精蛋白锌重组人胰岛素)、70/30混合(精蛋白锌重组人胰岛素混合胰岛素)]、来源(动物、人、人胰岛素类似物)、制备方法(重组DNA、动物来源

精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液的不良反应介绍

  低血糖(胰岛素反应)  低血糖(血中葡萄糖浓度太低)是胰岛素使用者最常发生的不良反应,严重的低血糖会导致出现诸如神志不清,甚至死亡。  在患者的注射部位也会出现诸如红肿或者瘙痒等局部过敏反应。上述症状可以在数天或数周内自行消失。在某些情况下,上述情况也有可能是由于非胰岛素制剂的原因所引起的,例如

我国重组蛋白新冠病毒疫苗I期、II期临床试验结果发布

  我国已批准紧急使用的重组蛋白亚单位新冠病毒疫苗,I期、II期临床试验结果日前在国际医学期刊《柳叶刀·传染病》发布。结果表明,疫苗安全性良好,接种3剂次25微克疫苗的97%入组者产生了可以阻断活病毒的中和抗体,中和抗体水平超过康复患者血清。  该疫苗由中国科学院微生物研究所联合安徽智飞龙科马生物制

精蛋白锌重组人胰岛素混合注射液的药物相互作用

  只有在向临床医生咨询后,才能将人胰岛素制剂与其它药物同时一起使用。  例如,口服避孕药、皮质类固醇、甲状腺代替治疗、达那唑、β2-受体激动剂(利托君、沙丁胺醇、叔丁喘宁)等,在使用这些可以使血糖升高的物质时,应该增加胰岛素的给药量。  而在使用口服抗糖尿病药物、水杨酸盐(例如:阿司匹林)、磺基抗

免疫球蛋白纯化技术——纯化重组人α2a干扰素(rHuIFNα2a)

实验方法原理重组人α干扰素作为一种具有广谱抗病毒、抑制肿瘤细胞生长及免疫调节作用的细胞因子新型药物,已在国内外广泛投入临床应用,并取得了显著的疗效。国际上对用于临床的重组干扰素的纯度要求很高,美国NIH规定必须在90 %以上,因此生产者普遍采用亲和层析纯化法。我们研制了rHuIFN-α2a的McAb

关于精蛋白重组人胰岛素等注射液国家药品标准草案公示

  我委拟制定精蛋白重组人胰岛素注射液、精蛋白重组人胰岛素混合注射液30R和精蛋白重组人胰岛素混合注射液50R的国家药品标准,为确保标准的科学性、合理性和适用性,现公示征求社会各界意见(详见附件)。 公示期为三个月。 请相关单位认真研核,若有异议,请及时来函提交反馈意见,并附相关说明、实验数据和联系

版纳园等用转基因植物悬浮细胞高效产重组人血清白蛋白

  人血清白蛋白(HSA)是一种极为重要的医药蛋白。在临床上,HSA主要用于血液透析、利尿剂抗性浮肿和一些烧伤或者外伤导致的缺血等的治疗。在工业上,HSA主要作为其它医药蛋白质产品的保护剂和载体。HSA的市场需求量大,每年约需要500吨,其市场价值可达15亿美元。由于血浆来源的HSA存在着被病原物(

医学院重组药物蛋白实验室举办“2018年实验室开放日”活动

   为弘扬科学精神、普及科学知识、加快提升公民科学文化素质,根据省科技厅“2018年全省科技活动周”活动安排部署,由中国生物化学与分子生物学会主办,新乡医学院河南省重组药物蛋白表达系统国际联合实验室承办的“2018年实验室开放月”活动于近日在该校成功举行。 活动在该校院系楼(科技楼)三