细胞克隆实验的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成年个体的组织容易培养,分化程度低的组织比分化高的容易培养,肿瘤组织比正常组织容易培养。取材后应立即处理,尽快培养,因故不能马上培养时,可将组织块切成黄豆般大的小块,置4℃的培养液中保存。取组织时应严格保持无菌,同时也要避免接触其他的有害物质。取病理组......阅读全文

细胞克隆实验的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

关于克隆实验的过程介绍

  先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物子宫中使动物怀孕,便可产下与提供细胞者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相

简述细胞克隆的培养过程

  将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养,则直接将组织块接入培养器皿底部,几个小时后组织块可贴牢在底部,再加入培养基。如系细胞培养,一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数,按要求以一定的量(以每毫升细胞数表示)接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后,立即放入培养

关于克隆实验的过程相关介绍

  先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物子宫中使动物怀孕,便可产下与提供细胞者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相

细胞培育的一般过程

一、细胞准备工作 准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培育基与其他试剂的制造、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培育箱及其他仪器的检查与调试等。 二、选材 在无菌环境下从机体取出某种安排细胞,通过必定的处理后接入培育器血中,这一进程称为选材。理论上讲各种动物和人体内的所有安排都可以用于培

关于细胞克隆的取材过程介绍

  在无菌环境下从机体取出某种组织细胞(视实验目的而定),经过一定的处理(如消化分散细胞、分离等)后接入培养器皿中,这一过程称为取材。如是细胞株的扩大培养则无取材这一过程。机体取出的组织细胞的首次培养称为原代培养。理论上讲各种动物和人体内的所有组织都可以用于培养,实际上幼体组织(尤其是胚胎组织)比成

单克隆抗体的提纯实验过程

1.材料(1)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液20mMol/LNaCl(2)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液40mMol/LNaCl(3)20mMol/LpH7.8~7.9Tris—HCl缓冲液80mMol/LNaCl(4)20mMol/LpH7.8~

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行.准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献. 二、取材在无

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

细胞培养的一般过程

 一、准备工作    准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行.准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献.

细胞培养细胞复苏的一般过程

1.从液氮容器中取出冻存管,直接浸入37℃温水中,并不时摇动令其尽快融化。2. 从37℃水浴中取出冻存管,打开盖子,用吸管吸出细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上培养液,混匀;3. 离心, 1000rpm,5min;4. 弃去上清液,加入含10%小牛血清培养液重悬细胞,计数,调整细胞密度,接种培养瓶

X射线衍射的一般实验过程

1.样品制备对于粉末样品,通常要求其颗粒的平均粒径控制在5mm左右,即过320目(约40mm)的筛子,还要求试样无择优取向.因此,通常应用玛瑙研钵对待测样品进行充分研磨后使用.对于块状样品应切割出合适的大小,即不超过铝制样品架的矩形孔洞的尺寸,另外还要用砂轮和砂纸将其测试面磨得平整光滑.2.充填试样

细胞培养细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

血细胞发育过程的一般规律

血细胞发育成熟中的形态演变规律(如下表)

贴壁细胞的克隆形成实验

实验方法原理用不同浓度的实验试剂将细胞处理24h 。经胰蛋白酶消化后,以低细胞密度接种,温育1~3 周,染色后(见彩图6a,e) 计集落数(图22.1)。实验步骤材料无菌生长液D-PBSA0.25%粗制胰蛋白酶待测化合物配制成最大使用浓度的10倍,溶于无血清生长液中;检査试验溶液的pH 和渗透压,若

克隆的基本过程

先将含有遗传物质的供体细胞的核移植到去除了细胞核的卵细胞中,利用微电流刺激等使两者融合为一体,然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎,当胚胎发育到一定程度后,再被植入动物子宫中使动物怀孕,便可产下与提供细胞核者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行基因改造,那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同

细胞克隆实验操作的具体步骤

一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5

细胞克隆实验操作的注意事项

(1)第一次开始培养某种细胞时,一定要在WWW. ATCC. ORG上用该细胞的名称进行检索,可以得到关于该细胞的详细信息,包括需要使用的培养基、血清、添加剂、通常的消化时间、传代时间等。对于特定的细胞(如原代培养的细胞),需要查阅相关文献来获得更准确的培养方法。(2)进入细胞间开始细胞培养时,必须

关于细胞培养的一般过程的介绍

  一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试。  二、取材 在无菌环境下从机体

亚克隆的基本过程

亚克隆的基本过程包括:(1)目的DNA片段和载体的制备;(2)目的DNA片段和载体的连接;(3)连接产物的转化;(4)重组子筛选。

DNA的克隆过程概述

DNA的克隆是指在体外将含有目的基因或其它有意义的DNA片段同能够自我复制的载体DNA连接,然后将其转入宿主细胞或受体生物进行表达或进一步研究的分子操作的过程,因此DNA克隆又称分子克隆,基因操作或重组DNA技术。DNA克隆涉及一系列的分子生物学技术,如目的DNA片段的获得、载体的选择、各种工具酶的

单克隆抗体的细胞融合(cell-fusion)过程

融合的方法很多,常用的有转动法和离心法。 融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1最为常用。 1.试剂与材料 (1) 供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。 (2) 1640培养液100ml。 (3) 完全1640液100ml。 (4) 2.5%FCS-1640液50ml。 (5

分子克隆实验引入寄主细胞的常用方法

常用两种方法:①转化或转染,方法是将重组质粒DNA或噬菌体DNA(M13)与氯化钙处理过的宿主细胞混合置于冰上,待DNA被吸收后铺在平板培养基上,再根据实验设计使用选择性培养基筛选重组子,通常重组分子的转化效率比非重组DNA低,原因是连接效率不高,有许多DNA分子无转化能力,而且重组后的DNA分子比

中等量细胞克隆的杂交法筛选实验

实验方法原理 这一方法适用于任何大小的细菌克隆,但小的克隆可以给出最清楚的结果。小克隆可以产生尖锐的杂交信号,而且在克隆从琼脂板转到膜的过程中不会弥散。操作中 采用能够包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保证没有气泡的情况下,用更大的滤膜很难正好覆盖于 150 mm 板。实验材料

中等量细胞克隆的杂交法筛选实验

            实验方法原理 这一方法适用于任何大小的细菌克隆,但小的克隆可以给出最清楚的结果。小克隆可以产生尖锐的杂交信号,而且在克隆从琼脂板转到膜的过程中不会弥散。操作中 采用能够包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保证没有气泡的情况下

中等量细胞克隆的杂交法筛选实验

这一方法适用于任何大小的细菌克隆,但小的克隆可以给出最清楚的结果。小克隆可以产生尖锐的杂交信号,而且在克隆从琼脂板转到膜的过程中不会弥散。操作中采用能够包含 2500 克隆的 90 mm 板效果最好。在保证没有气泡的情况下,用更大的滤膜很难正好覆盖于 150 mm 板。本实验来源「分子克隆实验指南第

方案22.3-贴壁细胞的克隆形成实验

            实验方法原理 用不同浓度的实验试剂将细胞处理24h 。经胰蛋白酶消化后,以低细胞密度接种,温育1~3 周,染色后(见彩图6a,e) 计集落数(图22.1)。 实验步骤

关于单克隆抗体细胞融合的过程介绍

  融合的方法很多,常用的有转动法和离心法。融合时脾细胞和骨髓瘤细胞的比例为1:1至10:1不等。3:1或5:1最为常用。  1.试剂与材料  (1)供融合用的脾细胞及骨髓瘤细胞。  (2)1640培养液100ml。  (3)完全1640液100ml。  (4)2.5%FCS-1640液50ml。