免疫荧光间接法测抗体法的原理和实验步骤
⑴基本原理染色程序分为两步，第一步，用未知未标记的抗体（待检标本）加到已知抗原标本上，在湿盒中37℃保温30min，使抗原抗体充分结合，然后洗涤，除去未结合的抗体。第二步，加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应，标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合，从而可鉴定未知抗体。⑵试剂与仪器磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4荧光标记的抗人球蛋白抗体：以0.01mol/L，pH7.4的PBS进行稀释。搪瓷桶三只（内有0.01mol/L，pH7.4的PBS 1500ml）有盖搪瓷盒一只（内铺一层浸湿的纱布垫）荧光显微镜玻片架滤纸37℃温箱等。⑶实验步骤1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于已知抗原标本片，10min后弃去，使标本片保持一定湿度。2）滴加以0.01mol/L，pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本，覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内，......阅读全文
噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤（二）
四、实验步骤 1、噬菌体的诱导和裂解液的制备 （ 1 ） 供菌体的活化与培养：取一环供体菌，接种于盛有 5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中， 37 ℃培养 16 h 后，吸 0.5 ml 菌液，接种于盛有 4.5 ml 肉汤液体培养基的三角瓶中，继续培养 4-6 h 。 （
噬菌体转导实验原理、材料和实验步骤（一）
一、实验目的 以局限性转导为例来说明转导的基本原理，进一步验证 DNA是遗传物质，并初步掌握转导实验的基本方法。 二、实验原理与意义 转导是以噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展，转导已成为基因精细结构分析的常用方法。 转导实验中常用的是λ噬菌
免疫细胞化学技术的某些新进展
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述，本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【
免疫细胞化学技术的新进展半抗原交联抗体法
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章叙述，本节仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。【半抗原交
免疫细胞化学技术的某些新进展
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述，本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【
间接法测抗体所需试剂与仪器
磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4荧光标记的抗人球蛋白抗体：以0.01mol/L，pH7.4的PBS进行稀释。搪瓷桶三只（内有0.01mol/L，pH7.4的PBS 1500ml）有盖搪瓷盒一只（内铺一层浸湿的纱布垫）荧光显微镜玻片架滤纸37℃温箱等。
免疫荧光检查的检查方法及临床意义
检查方法 免疫荧光检查可分直接法、间接法、夹心法和补体法。 1. 直接法 将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。 （1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10分钟后弃去，使标
微库仑硫含量测定仪测硫的原理和步骤
微库仑硫含量测定仪采用动态微库仑法原理设计而成，采用氧化法把样品引入裂解管反应，被测物转化为可滴定离子，由载气带入滴定池中滴定，测量电解滴定过程中所消耗的电量，依据法拉第定律，计算出样品的总硫含量。微库仑硫含量测定仪用于石油、石油化工、医药、卫生、环保、煤炭、地质、冶金、商检、质检、学校等生产、科研
微库仑硫含量测定仪测硫的原理和步骤
微库仑硫含量测定仪采用动态微库仑法原理设计而成，采用氧化法把样品引入裂解管反应，被测物转化为可滴定离子，由载气带入滴定池中滴定，测量电解滴定过程中所消耗的电量，依据法拉第定律，计算出样品的总硫含量。微库仑硫含量测定仪用于石油、石油化工、医药、卫生、环保、煤炭、地质、冶金、商检、质检、学校等生产、科研
细胞免疫荧光步骤
细胞免疫荧光可应用于：可以观察组织或细胞内抗原物质的定位，以及一些特殊信号分子蛋白的出核/入核的定位变化。实验方法原理在进行细胞免疫荧光过程中，需要用到细胞爬片，通过将爬片浸在细胞培养基内，细胞在爬片上生长，进而进行细胞的免疫荧光。实验材料细胞样品试剂、试剂盒多聚甲醛70%甲醇丙酮PBSTriton
细胞免疫荧光步骤
实验材料 细胞样品试剂、试剂盒 多聚甲醛70%甲醇丙酮PBSTriton BSADAPI染液DABCOTris甘油仪器、耗材 玻片实验步骤 细胞爬片免疫荧光实验步骤第一天：1. 在培养板中将已爬好细胞的玻片用PBS浸洗3次，每次3min；2. 用4%的多聚甲醛固定爬片15min， PBS浸洗玻片3次
简述儿童呼吸道感染常见病毒检测的原理
间接免疫荧光抗体法（IFA）检测基于待测样本中的抗体与吸附在载玻片上的抗原发生特异性结合，而未与抗原结合的其他非特异抗体在洗涤步骤中被去除，随后抗原-抗体复合物与荧光素标记的抗人球蛋白发生反应，并可通过荧光显微镜进行观察。
微机自动测硫仪实验步骤
微机自动测硫仪实验步骤1.打开主机电源，点击微机桌面图标，可以进入测硫仪界面，温度自动向设定温度升温2.温度升到设定温度时，向电解池里加入配置好的电解液，打开气泵，检查气密性，调节气流量到1.0左右，调节搅拌速度到合适转速，3.在“用户信息设置”里输入相关信息，先做1-2个废样（平衡电解液）。在瓷舟
微机自动测硫仪实验步骤
微机自动测硫仪实验步骤1.打开主机电源，点击微机桌面图标，可以进入测硫仪界面，温度自动向设定温度升温2.温度升到设定温度时，向电解池里加入配置好的电解液，打开气泵，检查气密性，调节气流量到1.0左右，调节搅拌速度到合适转速，3.在“用户信息设置”里输入相关信息，先做1-2个废样（平衡电解液）。在瓷舟
细菌的局限性转导实验原理、材料和实验步骤
一、实验原理： 转导是由噬菌体为媒介将一个细胞的遗传物质转移给另一个细胞的过程。随着分子遗传学的发展，转导已成为基因精细结构分析的常用方法。转导可分为局限性转导和普遍性转导二大类。 本实验试图用局限性转导为例，用噬菌体（λ）专一性转导半乳糖发酵基因的现象来说明转导的基
免疫荧光技术简介
免疫荧光技术（Immunofluorescence technique） 1941年，Coons等于首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescent antibody technique）。该技术的主要特点是：特异性强、敏
免疫荧光技术简介
免疫荧光技术（Immunofluorescence technique）1941年，Coons等于首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术（fluorescent antibody technique）。该技术的主要特点是：特异性强、敏感性
植物总RNA的提取实验原理和操作步骤
一、实验目的通过本实验学习从植物组织中提取RNA的方法二、实验原理RNA是一类极易降解的分子，要得到完整的RNA，必须最大限度地抑制提取过程中内源性及外源性核糖核酸酶对RNA的降解。高浓度强变性剂异硫氰酸胍，可溶解蛋白质，破坏细胞结构，使核蛋白与核酸分离，失活RNA酶，所以RNA从细胞中释放出来时不
免疫荧光细胞化学染色方法1
一、标本制作可制作涂片、印片、细胞单层培养物、组织切片，经适当固定或不固定，作免疫荧光染色用。 二、荧光抗体染色方法 （一）直接法 1．染色 切片经固定后，滴加经稀释至染色效价如1：8或1：16的荧光抗体（如兔抗人γ-球蛋白荧光抗体或兔抗人IgG或IgA荧光抗体等），
Western－免疫印迹实验原理和操作步骤
[实验原理]Western免疫印迹（Western Blot）是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测。对已知表达蛋白，可用相应抗体作为一抗进行检测，对新基因的表达产物，可通过融合部分的抗体检测。与Southern或Northern杂交方法类似，但Western Blot采用的是聚丙烯酰胺凝胶
免疫组化实验原理和步骤（三）
免疫组化技术的关键问题1.组织处理恰当的组织处理是做好免疫组化染色的先决条件，也是决定染色成败的内部因素，在组织细胞材料准备过程中，不仅要求保持组织细胞形态完整，更要保持组织细胞的抗原性不受损戒弥漫，防止组织自溶。如果出现自溶坏死的组织，抗原已经丢失，即使用很灵敏的检测抗体和高超的技术，也很难检出所
免疫组化实验原理和步骤（二）
免疫组化问题解答1、染色过强 a 抗体浓度过高戒孵育时间过长 。降低抗体滴度、抗体孵育时间：室温1小时、或4度过夜 b 孵育温度过高超过37度。 一般在室温20-28度 c DAB显色时间过长戒浓度过高 显色时间不超过5-12分钟，以显微镜下观察为准。2、非特异性背景染色a 操作过程中冲洗不充分 ：
免疫组化实验原理和步骤（一）
实验原理：抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原抗体结合的部
肿瘤细胞侵袭试验原理和实验步骤2
（3）NE+IFN-DMEM（-6M，50ng）NE---A液（1μg/μl，1mg/ml） 20.5μlIFN-γ（25ng/μl） 25 μlDMEM UP TO 100 ml过滤消毒，4℃保存（4）低血清DMEM培养基（上室）（5）20%FBS-DMEM培养基（下室）2、准备（1）溶胶，4℃过
肿瘤细胞侵袭试验原理和实验步骤1
一、原理Matrigel 是从小鼠EHS肉瘤中提取的基质成分，含有LN、IV型胶原、接触蛋白和肝素硫酸多糖，铺在无聚乙烯吡硌烷酮的聚碳酸酯滤膜上，能在DMEM培养基中重建形成膜结构，这种膜结构与天然基质膜结构极为相似。滤膜孔径一般为8um，而且膜孔都被Matrigel覆盖，细胞不能自由穿过，必须分泌
免疫组化实验原理和步骤（四）
免疫组化染色注意事项免疫组化染色方法已不是什么很难的问题，操作步骤简单也易掌握，但要染好免疫组化，其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事，但最基本的应从以下方面加以注意：（1）去除内源酶及内源性生物素一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织，其中自身含有一定量的内源酶和内源性
免疫组化实验原理和步骤（五）
（6）结果判断免疫组化的结果判断有两种方法：一是对以检测结果阳性细胞指数来定性(如核抗原的标记)，判断方法是以一个规野中阳性细胞数不总细胞癿百分比，再取10个相同视野算取平均指数。另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定，一般阳性细胞数在0-25为阴性，25-50为十，50-75为十十，75以
免疫荧光检查的检查方法
免疫荧光检查可分直接法、间接法、夹心法和补体法。 1. 直接法 将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。 （1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10分钟后弃去，使标本保持一定湿
免疫组织化学染色方法
实验概要免疫组织化学染色法是指在抗体上结合荧光或可呈色的化学物质，利用免疫学原理中抗原和抗体间专一性的结合反应，检测细胞或组织中是否有目标抗原的存在，此方式不只可以用来测知抗原的表现量也可观察抗原所表现的位置。只要是能够让抗体结合的物质，也就是具有抗原性的物质包括蛋白质、核酸、多糖、病原体等都可侦测
滤膜孔径测算方法直接法测膜孔径
扫描电镜（SEM）和透射电镜（TEM）电子显微镜表征膜的孔径、孔径分布及膜的形态结构。 制样至关重要。湿膜样品要经过脱水、蒸镀、复型等处理。 逐级脱水法：膜样品用5%饿酸固定，然后在提取器中用CCl4或乙醇逐级脱水，再用环氧树脂包埋固化，最后用超薄切片机切成薄片。适用透射电子显微镜的观察。