免疫荧光间接法测抗体法的原理和实验步骤
⑴基本原理染色程序分为两步，第一步，用未知未标记的抗体（待检标本）加到已知抗原标本上，在湿盒中37℃保温30min，使抗原抗体充分结合，然后洗涤，除去未结合的抗体。第二步，加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、IgM抗体。如果第一步发生了抗原抗体反应，标记的抗球蛋白抗体就会和已结合抗原的抗体进一步结合，从而可鉴定未知抗体。⑵试剂与仪器磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4荧光标记的抗人球蛋白抗体：以0.01mol/L，pH7.4的PBS进行稀释。搪瓷桶三只（内有0.01mol/L，pH7.4的PBS 1500ml）有盖搪瓷盒一只（内铺一层浸湿的纱布垫）荧光显微镜玻片架滤纸37℃温箱等。⑶实验步骤1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于已知抗原标本片，10min后弃去，使标本片保持一定湿度。2）滴加以0.01mol/L，pH7.4的PBS适当稀释的待检抗体标本，覆盖已知抗原标本片。将玻片置于有盖搪瓷盒内，......阅读全文
PCRDHPLC实验原理和步骤
【实验目的】1．了解PCR-DHPLC技术的原理。2．了解并熟悉PCR-DHPLC技术的步骤。【实验原理】DHPLC技术也称为WAVE核苷酸片段分析系统。利用高效液相色谱原理，PCR扩增后的DNA片段与缓冲液（TEAA）混合形成液相，流动相被高压驱动，通过一个DNA分离柱——DNA Sep柱
旷场实验原理和方法步骤
【实验目的】观察实验动物在新异环境中的自主行为、探究行为与紧张度。【实验器材】实验装置由旷场反应箱和数据自动采集和处理系统两部分组成，由上海欣软信息科技有限公司提供。大鼠旷场反应箱高30～40cm，底边长100cm，内壁涂黑，底面平均分为25个4cm×4cm小方格，正上方2 m处架一数码摄像头，其视
elisa间接法原理
在运用ELISA方法测定抗体方面，通常所用的方法称为间接法，也是目前zui常用的方法，其原理：间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM)，再
elisa间接法原理
在运用ELISA方法测定抗体方面，通常所用的方法称为间接法，也是目前zui常用的方法，其原理：间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM)，再
elisa间接法原理
在运用ELISA方法测定抗体方面，通常所用的方法称为间接法，也是目前zui常用的方法，其原理：间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM)，再
elisa间接法原理
在运用ELISA方法测定抗体方面，通常所用的方法称为间接法，也是目前zui常用的方法，其原理：间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM)，再
elisa间接法原理
在运用ELISA方法测定抗体方面，通常所用的方法称为间接法，也是目前zui常用的方法，其原理：间接法首先用抗原包被于固相载体，这些包被的抗原必须是可溶性的，或者至少是极微小的颗粒，经洗涤，加入含有被测抗体之标本，再经孵育洗涤后，加入酶标记抗抗体，(对人的标本来说即加酶标抗人球蛋白IgG、IgM)，再
“荧光素，荧光素酶，能态，基态”是什么意思
免疫荧光法免疫荧光法的基本原理是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素，当与其相对应的抗原或抗体起反应时，在形成的复合物上就带有一定量的荧光素，在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位，检测出抗原或抗体。常用的荧光素有①异硫氰酸荧光素（fluorecein isothiocyante，FITC
ELISA直接法和间接法优缺点
直接法（direct ELISA）将抗原直接固定在固相载体上，加入酶标记的一级抗体，即可测定抗原总量，此一级抗体的特异性非常重要。优势：操作手续简短，因无须使用二抗可避免交互反应。缺点：试验中的一抗都得用酶标记，但不是每种抗体都适合做标记，费用相对提高。间接法（indirect ELISA）此测定方
免疫荧光实验原理及操作
免 疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，是标记免疫技术中发展最早的一种。它是在免疫学、生物化学和显微镜技术的基础上建立起来的一项技术。很早以来就有一些学者试图将抗体 分子与一些示踪物质结合，利用抗原抗体反应进行组织或细胞内抗原物质的定位。
免疫细胞化学技术的某些新进展
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述，本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【
免疫细胞化学技术的某些新进展
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章 叙述，本节 仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。 【
免疫细胞化学技术的新进展半抗原交联抗体法
免疫细胞化学技术在继续改进和完善中，新的技术方法不断出现。除目前国内已开始应用的免疫金技术和免疫金银技术外，80年代，新的免疫细胞化学技术还有半抗原交联抗体法和令人瞩目的分子杂交免疫细胞化学技术。免疫金银技术和分子杂交免疫细胞化学技术将分别以专章叙述，本节仅就半抗原交联抗体法作一简要介绍。【半抗原交
免疫组化的二抗还有区别的么！要怎么选？
免疫组化大家基本上都做过，你知道有二抗，也应该知道免疫组化的原理就是一抗结合到目标蛋白，再有二抗来进行信号放大，大概是这样： 但是你知道二抗的信号放大实际上有多种方法……这就需要你进行二抗标记方法的选择，最简单的二抗标记方法是直接法： 就是直接在二抗上标记酶，比如HRP，来进行显色，这样的二
免疫荧光技术荧光抗体染色方法介绍间接法
间接法是根据抗球蛋白试验的原理,用荧光素标记抗球蛋白抗体(简称标记抗抗体)的方法(图）。间接法的检测过程分为两步:第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中在37℃下保温30min,使抗原抗体充分结合,然后洗涤,除去未结合的抗体;第二步,加上荧光标记的抗球蛋白抗体或抗IgG、
免疫荧光技术荧光抗体染色方法介绍直接法
直接法是指用特异荧光抗体直接滴加于待检的标本上,由荧光标记的抗体与抗原发生特异结合(图)。标本中如有相应的抗原存在,即与荧光抗体特异性结合,在镜下可见有荧光的抗原复合物。此法的优点是操作简单、特异性高。其缺点是检查每种抗原均需制备相应的特异性荧光抗体,且敏感性低于间接法。
免疫荧光检查的检查方法及临床意义
检查方法 免疫荧光检查可分直接法、间接法、夹心法和补体法。 1. 直接法 将标记的特异性荧光抗体，直接加在抗原标本上，经一定的温度和时间的染色，用水洗去未参加反应的多余荧光抗体，室温下干燥后封片、镜检。 （1）滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，10分钟后弃去，使标
重组DNA分子的转化实验原理和实验步骤（二）
1.1.4接合转化接合（Conjugation）是指通过细菌细胞之间的直接接触导致DNA从一个细胞转移至另一个细胞的过程。这个过程是由结合型质粒完成的，它通常具有促进供体细胞与受体细胞有效接触的接合功能以及诱导DNA分子传递的转移功能，两者均由接合型质粒上的有关基因编码。在DNA重组中常用的绝大多数
重组DNA分子的转化实验原理和实验步骤（一）
1实验原理DNA重组分子在体外构建完成后，必须导入特定的受体细胞，使之无性繁殖并高效表达外源基因或直接改变其遗传性状，这个导入过程及操作统称为重组DNA分子的转化。对于不同的受体细胞，往往采取不同的转化战略。1.1 DNA重组分子的常用转化方法1.1.1 Ca 2 诱导转化1970年Mandel和H
基因的PCR扩增实验原理、实验材料和操作步骤
实验原理单链DNA在互补寡聚核苷酸片段的引导下，可以利用DNA聚合酶按5’→3’方向复制出互补DNA。这时单链DNA称为模板DNA，寡聚核苷酸片段称为引物（Primer），合成的互补DNA称为产物DNA。双链DNA分子经高温变性后成为两条单链DNA，它们都可作为单链模板DNA，在相应的引物引导下，用
ELISA测定的常用模式间接法测抗体
基本方法的操作如下: 1．将病原体的抗原在碳酸盐缓冲液中4~C过夜包被，形成固相抗原，洗涤去除未与固相结合或结合不紧的抗原后，用小牛血清或牛血清白蛋白等封闭，洗涤去除未结合的部分及杂质。 2．加入含待测抗体的临床样本如血清等，温育一定时间后洗板；此时，待测抗体就会与固阳上特异抗原反应而
重组DNA的转化实验原理和操作步骤
实验目的制备出感受态细胞，把体外重组的DNA引入受体细胞，使受体菌具有新遗传性，并从中选择出转化子。实验原理感受态就是细菌吸收转化因子的生理状态，只有发展为感受态的细胞才能稳定摄取外来的DNA分子。pUC18的LacZ基因区域当有DNA片段插入时，LacZ基因失活，转化进入大肠杆菌并在含有IPTG和
粗提取植物DNA的实验步骤和原理
提取植物DNA常用的方法是CTAB法。原理：CTAB是一种阳离子去污剂,具有从低离子强度溶液中沉淀核酸与酸性多聚糖的特性。在高离子强度的溶液中(>0.7mol/L NaCl)，CTAB与蛋白质和多聚糖形成复合物，只是不能沉淀核酸。通过有机溶剂抽提，去除蛋白，多糖，酚类等杂质后加入乙醇沉淀即可使核酸分
霉菌的形态观察实验原理和操作步骤
一、实验目的1、学习自制水浸片观察微生物的形态；2、学习并掌握观察霉菌形态的基本方法，了解四类常见霉菌的基本形态特征。二、基本原理霉菌可产生复什分枝的菌丝体，分基内菌丝和气生菌丝，气生菌丝生长到一定阶段分化产生繁殖菌丝，由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝体(尤其是繁殖菌丝)及孢子的形态特征是识别不同种类霉
DNA的酶切实验原理和操作步骤
一、实验目的 本实验学习、了解限制性内切酶的特性，学习根据具体目的设计适当的酶切体系并实施之。 二、实验原理 利用限制性内切酶切割DNA是DNA重组过程中的关键步骤之一。成功的酶切为后续工作提供了有效的实验材料。限制性内切酶是细菌体内限制修
免疫荧光技术的起源和原理
免疫荧光(immunofluorescence technic)Coons等于1941年首次采用荧光素进行标记而获得成功。这种以荧光物质标记抗体而进行抗原定位的技术称为荧光抗体技术(fluorescentantibodytechnique)。用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧
间接法测抗体所需试剂与仪器
磷酸盐缓冲盐水（PBS）：0.01mol/L，pH7.4荧光标记的抗人球蛋白抗体：以0.01mol/L，pH7.4的PBS进行稀释。搪瓷桶三只（内有0.01mol/L，pH7.4的PBS 1500ml）有盖搪瓷盒一只（内铺一层浸湿的纱布垫）荧光显微镜玻片架滤纸37℃温箱等。
PCRSSCP实验原理和操作步骤
【实验目的】1．了解PCR-SSCP技术的原理。2．了解并熟悉PCR-SSCP技术的步骤。 【实验原理】 PCR-SSCP是1989年日本Orita等创建的筛查突变的新技术。它是一种简单、快速、经济的点突变筛查手段。PCR-SSCP技术的基本原理是PCR扩增后的DNA片段经变性成单链DNA，
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物（sequence specific primer,SSP）分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR扩增检测序列多态性的方法，也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。[实验原理]根据决定某等位基因的碱基性质，设计3′端第一
PCRSSP分析实验原理和步骤
PCR 序列特异性引物（sequence specific primer,SSP）分析法是使用能够特异识别特定等位基因的引物通过PCR 扩增检测序列多态性的方法，也称作等位基因特异性引物PCR 法。本实验是应用PCR-SSP 法检测MN 基因型。 [实验原理] 根据决定某等位基因的碱基性质，