细胞化学技术常用显示方法
1. 金属沉淀法：利用金属化合物在反应过程中生成有色沉淀，借以辨认所检查的物质或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后，反应产物最终生成CoS 或PbS有色沉淀，而显示出酶活性。2. 偶氮偶联法：酚类化合物与偶氮染料结合后可以形成耐晒染料。3. Schiff 反应：细胞中的醛基可使Schiff 试剂中的无色品红变为红色。这种反应通常用于显示糖和脱氧核糖核酸（Feulgen 反应）。4. 联苯胺反应：过氧化氢酶分解H2O2。产生新生氧，后者再将无色的联苯胺氧化成联苯胺蓝，进而变成棕色化合物。5. 普鲁士蓝反应：三价铁与酸性亚铁氰化钾作用，形成普鲁士蓝。6. Formazane 反应：显示脱氢酶。7. “Nadi”反应：显示细胞色素氧化酶。8. 脂溶染色法：借苏丹染料溶于脂类而使脂类显色。9. 茚三酮反应：显示蛋白质。......阅读全文
细胞化学技术常用显示方法
1. 金属沉淀法：利用金属化合物在反应过程中生成有色沉淀，借以辨认所检查的物质或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后，反应产物最终生成CoS 或PbS有色沉淀，而显示出酶活性。2. 偶氮偶联法：酚类化合物与偶氮染料结合后可以形成耐晒染料。3. Schiff 反应：细胞中的醛基可使Schiff 试剂中的无
植物组织和细胞显微化学染色_显示细胞壁化学组成方法
实验方法原理植物体内含有许多种化学物质。在得到植物组织切片之后，可以通过组织化学（显微化学）染色的方法使不同类型的化学成分在显微镜下得以显示，从而了解这些物质在植物的组织细胞内的空间分布用于组织化学研究的切片，根据研究对象和所要检测的化学物质的不同，可采用石蜡切片，有时要求新鲜材料采用徒手切片或冰冻
植物组织和细胞显微化学染色_显示植物细胞后含物方法
实验步骤(1) 淀粉：淀粉是植物的主要贮藏物质，它们在各种不同的植物细胞中形成各种形状小同的颗粒。一般来说，淀粉本身具有特殊的性状和光学特性，可以不必用专门的显微化学方法来检视，由于碘与淀粉作用可形成碘化淀粉而呈蓝色反应，用碘－碘化钾溶液来测试淀粉粒已成为最常用的方法。(2) 蛋白质：植物细胞中的蛋
免疫细胞化学常用试剂
一、固定剂大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽类）
免疫细胞化学常用试剂
一、固定剂 1、4%多聚甲醛-0.1mol/L磷酸缓冲液（pH7.3） 2、4%多聚甲醛-磷酸二氢钠/氢氧化钠 3、Bouin's液及改良Bouin’s液 4、Zamboni’s（Stefanini‘s）液 5、PLP液 6、Karnovsky's液（pH7.3） 7、0
自由基显示实验_细胞化学法
实验材料组织样品试剂、试剂盒DABMnCl2TrisCaCl2KClNaOHTris 缓冲液多聚甲醛锇酸实验步骤1. 组织取材后，即放入孵育液中，孵育 5 min。孵育液配方如下：DAB 2.5 mmol/L， MnCl2 0.5 mmol/L，Tris 4 mmol/L，CaCl2 2 mmol/
凝集素显示糖类细胞化学实验
实验方法原理 实验材料 组织样品试剂、试剂盒 凝集素-胶体金探针锇酸实验步骤 1. 制备或购买凝集素-胶体金探针。2. 组织常规固定，游离细胞打散，组织切片切薄。3. 漂洗 3 次。4. 5～25 μg/ml 凝集素-胶体金 15～25℃ 孵育 30～60 min。5. 漂洗、锇酸固定同常规注意事项
凝集素显示糖类细胞化学实验
凝集素（lectin）是一种无免疫原性糖蛋白，与糖的结合有一定专一性，如伴刀豆凝集素只与葡萄糖、甘露糖结合，麦胚凝集素只与 N-乙酰葡萄糖结合。并且，凝集素还可与标记物结合，如胶体金、辣根过氧化物酶等，因此可将作为检测糖基的一种简单而具有选择性的探针。不过由于糖类的复杂性以及凝集素特异的相对性，凝集
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽
常用血细胞化学染色-3
五、中性粒细胞碱性磷酸酶染色染色原理中性粒细胞碱性磷酸酶染色的方法有Gomori钙-钻法和kaplow偶氮偶联法，因为钙-钻法操作较为繁琐且所需时间长，偶氮偶联法的试剂盒操作方便，染色时间短，故目前国内常用偶氮偶联法，下面介绍该方法的原理。kaplow偶氮偶联法成熟中性粒细胞碱性磷酸酶(neutro
免疫细胞化学常用试剂介绍
一、固定剂 大多数神经激素、肽类物质为水溶性，在用于免疫细胞化学研究之前，常需固定。但肽类和蛋白质的物理、化学性质不同，因而对不同的固定方法或固定剂的反应也不尽相同。某些固定剂甚至可同时破坏和/或保护同一抗原的不同抗原决定簇。因此，在进行免疫细胞化学研究之前，很有必要了解所要研究的物质（蛋白质或肽
常用血细胞化学染色-2
三、α一醋酸荼盼醋酶染色 染色原理 血细胞内的α-醋酸荼酚酯酶(α-naphythyol acetate esterase,α-NAE)在pH中性的条件下可水解基质液中的α-醋酸荼酚，释放出α-荼酚与基质液中的重氮盐偶联形成不溶的有色沉淀，定位于细胞质内酶所在的部位。本试验
乙酰胆碱受体显示细胞化学实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 磷酸钾戊二醛KOH蔗糖焦锑酸钾锇酸实验步骤 1. 组织切成约 1 mm3 的小块，用 0.09 mol/L 磷酸钾（或草酸钾）-3％ 戊二醛（pH 7.3，用 0.1％～1％ KOH 调 pH）固定 4 h 以上，4℃。也有人推荐固定早期用微波照射，以加速固定
乙酰胆碱受体显示细胞化学实验
乙酰胆碱受体分布于神经肌肉接头等处，蛇毒素可与之紧密结合，并连接过氧化物酶，通过化学反应可在电镜下观察到乙酰胆碱受体分布。实验材料组织样品试剂、试剂盒磷酸钾戊二醛KOH蔗糖焦锑酸钾锇酸实验步骤1. 组织切成约 1 mm3 的小块，用 0.09 mol/L 磷酸钾（或草酸钾）-3％ 戊二醛（pH 7.
原代细胞常用纯化方法
人工纯化是利用人为手段造成对某一细胞生长有利的环境条件，抑制其他细胞的生长从而达到纯化细胞的目的。 1、细胞时间差酶消化法： 酶消化法是比较常用的纯化方法，不仅对贴壁细胞可行，能利用上皮细胞和成纤维细胞对胰蛋白酶的耐受性不同，是两者分开，达到纯化的目的；另外对贴壁细胞与半贴壁细胞及黏附细胞
显示细胞色素的显色方法介绍
1. 金属沉淀法：利用金属化合物在反应过程中生成有色沉淀，借以辨认所检查的物质或酶活性。如磷酸酶分解磷酸酯底物后，反应产物最终生成CoS 或PbS有色沉淀，而显示出酶活性。2. 偶氮偶联法：酚类化合物与偶氮染料结合后可以形成耐晒染料。3. Schiff 反应：细胞中的醛基可使Schiff 试剂中的无
酶细胞化学技术的实验方法介绍
样品制备酶细胞化学的一个重要问题是既要保存好细胞内酶的活性，又要保存好细胞的结构，因此选择适当的固定剂种类、浓度、固定的方式和时间是细胞化学技术的一个关键问题。光镜样品固定多选用中性福尔马林或多聚甲醛,4℃、24小时，常规的石蜡包埋切片可以满足相当一部分酶的细胞化学要求；电镜样品固定通常用0.5～2
常用化学物质分离方法介绍
1、萃取萃取，又称溶剂萃取或液液萃取，亦称抽提，是利用系统中组分在溶剂中有不同的溶解度来分离混合物的单元操作。即，是利用物质在两种互不相溶（或微溶）的溶剂中溶解度或分配系数的不同，使溶质物质从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中的方法。萃取是有机化学实验室中用来提纯和纯化化合物的手段之一。通过萃取，能从固
分离和提纯常用的化学方法
1、加热法 当混合物中混有热稳定性差的物质时，可直接加热，使热稳定性差的物质分解而分离出去。如，NaCl中混有NH4Cl，Na2CO3中混有NaHCO3等均可直接加热除去杂质。 2、沉淀法 在混合物中加入某种试剂，使其中一种以沉淀的形式分离出去的方法。使用该方法一定要注意不能引入新的杂质。
细胞化学技术-3
三、放射自显影技术放射自显影（radioautography）是利用放射性核素（同位素）的射线作用于感光材料的卤化银晶体，产生潜影，然后通过显影过程把“像”显示出来，以研究用放射性核素标记的物质在生物体内的定位和定量的一种技术。放射自显影技术有光镜和电镜两个层次。光镜放射自显影研究同位素标记物在组织
细胞化学技术组成
细胞化学技术不是单一的技术，而是一整套有关联的技术，包括酶细胞化学技术，免疫细胞化学技术，放射自显影技术，示踪细胞化学技术等。
细胞化学技术介绍
细胞化学技术（cytochemistry）是在保持细胞结构完整的基础上，利用某些化学物质可与细胞内某种成分发生化学反应，而在局部形成有色沉淀的原理，对细胞的化学成分进行定性、定位和定量的研究，目的是研究细胞乃至细胞器的结构与代谢变化的一种技术。
细胞化学技术-4
6、基本实验过程 用于大分子合成过程研究的放射自显影技术： 同位素标记示踪化合物→注入动物体内→ 取下器官或组织→切片→ 涂乳胶膜→自显影→显影和定影→染色→观察 用于大分子定位研究的放射自显影技术： 组织固定包埋→切片 ↓ 细胞化学反
细胞化学技术-2
二、 免疫细胞化学技术 免疫细胞化学技术（immunocytochemistry）是根据免疫学原理，利用抗原抗体特异结合的特性定位组织和细胞中特异大分子的一类技术。它包括光镜水平（简称免疫组化）和电镜水平(简称免疫电镜)的免疫细胞化学技术。应用免疫细胞化学技术可在原位检测细胞的各种大分子，
细胞化学技术-1
细胞化学技术（cytochemistry）是在保持细胞结构完整的条件下，通过细胞化学反应研究细胞内各种成分(主要是生物大分子)的分布情况以及这些成分在细胞活动过程中的动态变化的技术，可以通俗地说，这类技术让人们在显微镜下看到细胞内大分子的位置。这类技术包括光镜和电镜水平的酶细胞化学技术、免疫细胞化学
细胞生物基本方法：常用转化细胞
几种常用转化细胞和转化技术1）致癌化学物转化细胞：转化叙利亚地鼠胚胎细胞实验1．取材：妊娠后第13天取材，取数个同窝胚胎，去头和内脏，在无菌条件下剪碎至米粒大小，再用0.25％胰蛋白酶（含0.01％EDTA）37℃消化30分钟，滤过、低速离心、吸除消化液、加入营养液、制备成细胞悬液、接种入1875p
免疫细胞化学常用试剂介绍-2
三、显色液 免疫细胞化学中，由于抗原-抗体反应所形成的复合物本身无色，无法直接观察，因而需借助于某些化学基团的呈色作用，使其得以显示，以利于在显微镜下观察。常用的显色液有： 1．DAB（Diaminobenzidine）显色液 DAB即3，3-二氨基苯联胺 试剂：DAB（常用四盐酸盐） 50
电泳技术：生物化学实验常用技术-2
琼脂糖凝胶电泳琼脂糖凝胶电泳是一种以琼脂糖凝胶为支持物的凝胶电泳，其分析原理与其它支持物电泳的最主要区别是：它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用。琼脂糖凝胶具有网络结构，直接参与带电颗粒的分离过程，在电泳中，物质分子通过空隙时会受到阻力，大分子物质在泳动时受到的阻力比小分子大，因此在凝胶电泳中，带电
层析技术:生物化学实验常用技术(1)
层析技术是近代生物化学最常用的分离技术之一。它是利用混合物中各组分的理化性质（吸附力、分子形状和大小、分子极性、分子亲和力、分配系数等）的差异，在物质经过两相中，不断地进行交换、分配等过程。任何层析都具有两个相，即固定相和流动相。固定相固定不动，流动相对固定相作单相的相对运动，从而推动样品中各组分通
层析技术:生物化学实验常用技术(3)
一、基本原理 是指混合物随流动相流经固定相的层析柱时，混合物中各组分按其分子大小不同而被分离的技术。固定相是凝胶。凝胶是一种不带电荷的具有三维空间的多孔网状结构，凝胶的每个颗粒内部都具有很多细微的小孔，如同筛子一样，小的分子可以进入凝胶网孔，而大的分子则被排阻于凝胶颗粒之外