蛋白质提取分离纯化鉴定的实验方案
一.血清ǐ-球蛋白的初步提取1. 血细胞与血清分离：取人血液 1000ml,放置10min, 1000rpm离心20min .弃沉淀,留上清备用(沉淀为血细胞，上部为血清).2. 乳糜粒分离：4000rpm 10°C离心10分钟,采用密度梯度离心梯度液配置：离心管下部3/4容积加血浆，上部1/4容积加0.5MnaCl+0.3MEDTA,PH7.4 乳糜粒上浮，将乳糜粒吸出,留其余液体备用。3. 血清蛋白分离：除去球蛋白，白蛋白及其它蛋白质。5000rpm 10°C离心1h,密度梯度离心梯度.液配置：管容量1/3为血清，2/3为1。31g/ml,NaCl+NaBr,搅拌后终密度为1。21g/ml .管上部1/6容积为血清脂蛋白，下部5/6为其它蛋白。4.取2ml下部5/6血清于小试管中,加0.9％氯化钠溶液2.0ml，边搅拌混匀边缓慢滴加饱和硫酸铵溶液乙4.0ml，加入PBS洗脱液2ml,混匀后于室温中放置10min，此步骤可重复......阅读全文
蛋白质(六）病症
病症过量表现蛋白质如果摄取过量的话也会在体内转化成脂肪，造成脂肪堆积。肾脏要排泄进食的蛋白质，当分解蛋白质时会产生大量的氮素这样会增加肾脏的负担。蛋白质，尤其是动物性蛋白摄入过多，对人体同样有害。首先过多的动物蛋白质的摄入，就必然摄入较多的动物脂肪和胆固醇。其次蛋白质过多本身也会产生有害影响。正常情
蛋白质化学概述
蛋白质(Protein)是生物体的基本组成成份。在人体内蛋白质的含量很多，约占人体固体成分的45%，它的分布很广，几乎所有的器官组织都含蛋白质，并且它又与所有的生命活动密切联系。例如，机体新陈代谢过程中的一系列化学反应几乎都依赖于生物催化剂－酶的作用，而本科的质就是蛋白质；调节物质代谢的激素有许多也
蛋白质定量实验
试剂、试剂盒 考马斯亮蓝 G250乙醇磷酸实验步骤 (1) 准备 100~1500 ug/ml 的标准品, 溶于 Bradford 法相兼容缓冲液中。对于较稀的样品，可能通过增加样品在试剂体积中的比率而扩大灵敏度（microBradfordassay:1~25ug/mL)。如果样品与染料的比
关于蛋白质简介
蛋白质是生命的第一要素，是构成一切细胞和组织结构必不可少的成分，并以不同形式参与维持生命的重要化学反应。生命的产生、存在与消亡，无不与蛋白质有关，故有人称蛋白质为“生命的载体”。恩格斯说：“蛋白质是生命的物质基础，生命是蛋白质存在的一种形式。” 构成蛋白质的基本单位是氨基酸，就像26个英文字母
蛋白质如何提取
大部分蛋白质都可溶于水、稀盐、稀酸或碱溶液,少数与脂类结合的蛋白质则溶于乙醇、丙酮、丁醇等有机溶剂中,因些,可采用不同溶剂提取分离和纯化蛋白质及酶.（一）水溶液提取法稀盐和缓冲系统的水溶液对蛋白质稳定性好、溶解度大、是提取蛋白质最常用的溶剂,通常用量是原材料体积的1-5倍,提取时需要均匀的搅拌,以利
蛋白质的纯化
实验概要本实验介绍了用蛋白纯化试剂盒(HisTrap HP Kit)进行蛋白质纯化的过程。主要试剂高分子量蛋白Marker购自上海华舜生物工程有限公司蛋白纯化所用的试剂盒(HisTrap HP Kit)购自Amersham Biosciences ( USA)公司0.45 pm滤膜，磷酸缓冲液，咪唑
蛋白质合成实验
实验步骤 材料 无菌 细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要
蛋白质的复性
是恢复原有性质的意思。变性的生物大分子恢复成具有生物活性的天然构象的现象。 变性的一种逆转。
血浆蛋白质（一）
血浆蛋白是血浆中最主要的固体成分，含量为60～80g/L，血浆蛋白质种类繁多，功能各异。用不同的分离方法可将血浆蛋白质分为不同的种类。最初用盐析法只是将血浆蛋白分为白蛋白和球蛋白，后来用分段盐析法可细分为白蛋白、拟球蛋白、优球蛋白和纤维蛋白等组分。用醋酸纤维薄膜电泳法可分为白蛋白、α1球蛋白、α2球
蛋白质的纯化
蛋白质的分离纯化方法很多，主要有：（一）根据蛋白质溶解度不同的分离方法1、蛋白质的盐析 中性盐对蛋白质的溶解度有显著影响，一般在低盐浓度下随着盐浓度升高，蛋白质的溶解度增加，此称盐溶；当盐浓度继续升高时，蛋白质的溶解度不同程度下降并先后析出，这种现象称盐析，将大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子
蛋白质的定位
在体液中，一些疏水的分子输送非常困难。所幸的是，在体液中存在着多种这些疏水分子的运载蛋白。不仅有各种不同的载脂蛋白以专一性较广的方式运输着不同的脂质类分子(包括脂肪、胆固醇等)，而且还有一些非常专一的运载蛋白负责着一些特殊疏水分子的运输，如维生素B12结合蛋白、视黄醇/甲状腺素运载蛋白(transt
蛋白质质谱仪类型
蛋白质质谱仪类型有多种。1、按分析目的可分：蛋白质化验室质谱仪和蛋白质工业质谱仪。2、按联用方式可分：蛋白质气质联用仪、蛋白质液质联用仪和蛋白质多级质谱仪等。3、按分析规模可分：小型蛋白质质谱仪和大型蛋白质质谱仪。4、按质量分析器的时空属性可分：时间型蛋白质质谱仪和空间型蛋白质质谱仪。5、按质量分析
蛋白质合成实验
实验步骤材料无菌细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定）非无菌SLS 或 SDS，1% (35m mol/L ) 溶于 0 .3 mol/L NaOH三
蛋白质合成实验
实验步骤 材料 无菌 细胞培养，如 1X104～ 1X106 个细胞，24 孔板 3H-亮氨酸。无血淸培养基中 2 MBq /ml (～50uCi/ml) (特异活性并不重要，因为它将由培养基中的亮氨酸浓度决定） 非无菌 SLS 或
蛋白质测序仪
主要用途： 测量蛋白质或多肽一级结构的氨基酸序列应用于生物、化学、医学等领域的结构分析结构预测，药物设计等 仪器类别： 0303090701 /仪器仪表 /成份分析仪器 /蛋白质顺序分析仪 指标信息： 重复产率97% 最初产率60% 最灵敏检测量5pmol 适于各种方法制备
蛋白质透析原理
透析膜是半透膜，蛋白质是大分子物质，它不能透过透析膜，而小分子物质（无机盐、单糖等）可以自由通过透析膜与周围的缓冲溶液进行溶质交换，进入到透析液中。在实验室分离纯化蛋白质的过程中，常利用透析的方法除去蛋白质溶液中的小分子物质。
蛋白质回收实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 SDSDTT脱色液染色液仪器、耗材 电泳仪透析膜实验步骤 1. 凝胶浸泡在染色液中于室温缓慢摇动染色15~20 min，然后移至脱色液中于4℃温和摇动下脱色2~3 h。2. 切下染色后的凝胶条带，于4℃水中浸泡2~3 h，期间换几次水。然后分别将每条胶移入Petri
蛋白质靶向分选
线粒体大多数线粒体蛋白被合成为含有摄取肽信号的胞质前体。胞质伴侣将前蛋白递送至线粒体膜中的通道连接受体。具有针对线粒体的前序列的前蛋白在外膜处与受体和通用输入孔(GIP)结合，统称为外膜转位酶(TOM)。然后它作为发夹环通过TOM易位。前蛋白通过膜间隙运输通过小的TIM（也充当分子伴侣）到内膜的TI
蛋白质测定方法
蛋白质测定方法在生化研究中经常涉及到，它是很多实验的基础。因此，了解蛋白质测定方法相当重要。目前，常用的蛋白质测定方法有 以下五种方法：凯氏定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）、紫外吸收法和考马斯亮蓝法（Bradford法）。在这 五种测定法中，考马斯亮蓝法（Br
蛋白质染色介绍
染色液种类繁多，各种染色液染色原理不同，灵敏度各异。使用时可根据需要加以选择。常用的染色液有：1．氨基黑10B(amino black 10B又称为amidoschwarz 10B或naphthalene blueblack，2B 200)氨基黑10B分子式为C22H13N6S3Na3，MW=7
如何鉴定蛋白质
双缩脲反应产物双缩脲结构双缩脲试剂是由双缩脲试剂A和双缩脲试剂B两种试剂组成. 双缩脲试剂A的成分是氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的水溶液； 双缩脲试剂B的成分是硫酸铜的质量分数为0.01 g/mL的水溶液。 双缩脲试剂可以验证蛋白质的存在。 具体方法是： 先将双缩脲试剂A加入组织样液，摇荡均
蛋白质沉淀技术
蛋白质沉淀技术 实验步骤 一、AS 沉淀 1.原理 虽然有些其他盐类也可以用做沉淀剂，但是 AS
耐高温蛋白质
科技名词定义 中文名称： 溶菌酶 英文名称： lysozyme 其他名称： 胞壁酸酶(muramidase) 定义： 编号：EC 3.2.1.17。存在于卵清、唾液等生物分泌液中，催化细菌细胞壁肽聚糖N-乙酰氨基葡糖与N-乙酰胞壁酸之间的1，4-β-糖苷键水解的酶。 应用学科：
蛋白质纯化方法
蛋白质的提纯 蛋白质纯化方法属于生物化学技术。1、超速离心法 此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同，使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内，达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。 用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时，除个
蛋白质测定方法
蛋白质测定方法一般来说，有以下五种：凯氏定氮法，双缩尿法（Biuret法）、Folin－酚试剂法（Lowry法）、紫外吸收法和考马斯亮蓝法（Bradford法）。表 五种蛋白质测定方法的比较 从以上表格中可以得出，不同的方法有不同的特点和优势，如紫外吸收法测定时间快。但是综合起来，最后一种考马斯亮蓝
对于胶上蛋白质的鉴定要提供多少蛋白质
一般情况下，考染能看得见的点都有机会鉴定出来。分子量在 2 － 5 万之间的蛋白质，鉴定成功率一般比较大。分子量小的蛋白酶切位点少，合适的肽段（ 1000 ～ 3000 Da ）就少，所以鉴定的成功率相对较低。而分子量太大的蛋白质，在同等质量的情况下，蛋白的摩尔数 (pmol) 较少；而
蛋白质测定仪测定样品蛋白质的原理介绍
蛋白质测定仪是根据其功能特性来命名，是专业测定样品蛋白质的仪器。事实上它还有一个大家更为熟知的名称，那就是定氮仪。一般来说，蛋白质测定仪测定样品蛋白质是基于经 典的凯氏定氮法，因此其测定原理实际上也就是凯氏定氮法。只不过与传统的测定方式相比，使用蛋白质测定仪测定样品蛋白质，更加安全、高效、准确和简单
蛋白质测定仪检测蛋白质含量的操作方式
蛋白质是动植物和人类生存的最重要营养成分,氮是蛋白质构成的特有元素。根据含氮量可以换算出食品中蛋白质的含量。采用蛋白质测定仪以及配套使用的多功能高温消解仪测定蛋白质的含量,与其它方法比较,该方法省时,省力,数据准确可靠,便于检测分析。 吸取210ml液体样品或称取011g固体样品于消化罐内
蛋白质的分离纯化根据蛋白质带电性质进行分离
蛋白质在不同pH环境中带电性质和电荷数量不同，可将其分开。1、电泳法各种蛋白质在同一pH条件下，因分子量和电荷数量不同而在电场中的迁移率不同而得以分开。值得重视的是等电聚焦电泳，这是利用一种两性电解质作为载体，电泳时两性电解质形成一个由正极到负极逐渐增加的pH梯度，当带一定电荷的蛋白质在其中泳动时，
丙酮能使蛋白质变性,也可以溶解蛋白质吗
丙酮不能使蛋白质变性,不可以溶解蛋白质，但能让蛋白质沉淀。极性有机溶剂因引起蛋白质脱去水化层和降低介电常数而增加电荷间的相互作用而引起蛋白质沉淀。而如果控制在低温下操作并尽量缩短处理时间则可使变性速度减慢。使用丙酮沉淀时，必须在0～4℃低温下进行，丙酮用量一般10倍于蛋白质溶液体积，蛋白质被丙酮沉淀