wb胶堵孔是什么原因
wb胶堵孔原因如下:1、胶的水分过分蒸发。2、浓缩胶凝胶太快。3、错用梳子。4、梳子不干净。......阅读全文
wb胶堵孔是什么原因
wb胶堵孔原因如下:1、胶的水分过分蒸发。2、浓缩胶凝胶太快。3、错用梳子。4、梳子不干净。
WB上层胶怎么算跑好了
检测器检测。理论上,从普通培养基中收集分泌蛋白,此时对细胞生长条件的影响最小,是最佳的实验条件:但是这存在隐忧。因为含血清的培养基中含有非常丰富的BSA(牛血清白蛋白)之类的蛋白质,除非你进一步分离纯化,否则直接用这种样品去WB会有非常大的麻烦,尤其当你的蛋白在60-46kDa之间的时候:用“任何”
wb下层胶不平整会有什么影响
v是有较大影响的,胶体薄的位置防水性能与防潮性能较差,其他性能也会随之降低。胶体略厚的位置,很难用针探测元器件,零部件在出现故障后,不容易找出来。胶体固化后高低不平,还会导致电器性能不稳定,在运作过程中,零部件即使用螺丝紧固,胶液层厚的位置依然会出现轻度倾斜,长期使用会增加电器出现故障几率。
wb实验分离胶立马就凝固了行么
透明胶邮票粘在一起,要分而不损伤邮票的确是件很麻烦的事。用电吹风或水泡等也不失为好办法。但刚开始不要盲目用电吹风或水泡等办法用在邮票上,以免损伤邮票。你可以用透明胶粘在和邮票差不多的废纸上(最好是撕下废弃无用的邮票边纸上)做个试验,先用电吹风吹,如果没有效,再用水泡等方法。试验成功取得经验后,再用到
WB跑胶后没有条带是什么原因
提取细胞蛋白加1ml裂解液实在是有点多,你可以减少到200-300ul试试,提取蛋白后做个BCA蛋白定量,在做后续的考蓝染色,确定蛋白没有问题再电泳转膜
WB电泳浓缩胶没压成一条线
第一、样本本身含有高盐。第二、积层胶长度不足,一般样品1-2cm足矣。但是如果样本含有高盐可以考虑将积层胶加长到4cm左右。第三、缓冲液需要更换。使用多次的Buffer缓冲能力会大打折扣,如果样品珍贵难得推荐用新鲜配制电泳缓冲液,反之用3次就丢弃吧!第四、上样量有关。dxylark已经叙述。第五、电
WB转膜时间与分子量及胶厚度的关系
分子量越大转膜时间越长,60KD转膜可以用300毫安恒流100min,20KD的话一个小时足够了,胶越厚越不容易转完全,不建议用1.5的胶。
WB实验中9%和11.5%的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。 而因为western blot的膜应该是完全覆盖SD
WB实验中9%和11.5%的分离胶凝固时间是否不同
western-blot中分离胶浓度的选择取决于目的蛋白分子量。 不同的分离胶浓度对不同的目的蛋白分子量的分辨率不一样,比如15%的分离胶更适合45kDa的分目的蛋白,而10%的分离胶更适合70kDa的目的蛋白。
WB实验中9%和11.5%的分离胶凝固时间是否不同
时间上应该会略有不同。扩展知识:WB,蛋白质印迹(Western blotting)又称免疫印迹(immunoblotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术,具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫
做WB时SDSPAGE胶凝固后多长时间上样最好
配胶时,建议浓缩胶室温凝固20-30分钟后,再加分离胶,室温凝固2-3小时后再用效果佳,如果当天配完不用,需塑料薄膜手套之类的将其包好,放置 4°冰箱过夜,第二天即用,不建议时间过长使用!
耳堵的病因
突聋病因不明,文献记载引起本病的原因共100多种,其中许多是罕见的。据Mattox(1977年)的意见,本病的原因顺序为病毒感染、血管疾病、内淋巴水肿、迷路膜破裂及上述诸因素的联合。
耳堵的诊断
(一)耳聋。此病来势凶猛,听力损失可在瞬间、几小时或几天内发生,也有晨起时突感耳聋。慢者耳聋可逐渐加重,数日后才停止进展。其程度自轻度到全聋。可为暂时性,也可为永久性。多为单侧,偶有双侧同时或先后发生。可为耳蜗聋,也可为蜗后聋。 (二)耳鸣。耳聋前后多有耳鸣发生,约占70%。一般于耳聋前数小时
WB操作规程
一、设备和试剂1.设备① 电泳电源Mini-PROTEAN 3 Elecreophoresis Cell,Mini Teans-Blot Module,and PowerPac Basic Power Supply (BIO-RAD,Catalog#165-3323)② 电泳仪及附件Mini-PRO
WB显影要多久
每个显影试剂盒都不一样,建议看说明书。实际情况视荧光强度而定,你看显出一点儿样子了,就赶紧捞出来,不然片子就太黑了。在加荧光剂后,反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里,放好后再也不要移动膜,否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜,小心,铺展。将准备好的胶片放在膜上,放上去后也不要再移动了。然后压片。可
WB显影要多久
每个显影试剂盒都不一样,建议看说明书。实际情况视荧光强度而定,你看显出一点儿样子了,就赶紧捞出来,不然片子就太黑了。在加荧光剂后,反应大概一到四分钟。小心把膜放到暗盒里,放好后再也不要移动膜,否则荧光会消失。膜上覆盖一张保鲜膜,小心,铺展。将准备好的胶片放在膜上,放上去后也不要再移动了。然后压片。可
WB实验问题总结
答:原因有很多:a) 你的细胞中不表达这种蛋白质,换一种细胞;b) 你的细胞中的蛋白质被降解掉了,你必需加入PMSF,抑制蛋白酶活性;c) 你的抗体不能识别目标蛋白,多看看说明,看是否有问题。答:a) 有沉淀可能因为你的蛋白没有变性完全,可以适当提高SDS 浓度,同时将样品煮沸时间延长;b) 也不排
WB实验小问答
WB又称免疫印记法.是将生物大分子物质通过不同途径转移到固相载体的过程。其灵敏,可达ng级,用Ecl显色法理论上可达pg 级。方便,特异性高。今天给大家分析的是western blot实验中那些常见的问题,这份干货内容,请收好啦! western blot 常见问题有那些? 1.为什
城市治堵频出各种招数-治堵没有特效药
堵车这一“城市病”越来越厉害,怎么治才管用?近年来,国内各大城市纷纷使出各种招数,已经实施的有尾号限行、中心城区限行、停车费涨价、车牌加价、大力发展公共交通等,停留在建议阶段的有收取中心城区拥堵费、买车必须先买车位、提高燃油税、控制机动车数量增长等。遗憾的是,办法想了不少,堵车仍然严重。
简介冷胶喷胶机的供胶装置
组成部份说明:胶桶、泵 胶桶的容量为30L,桶盖用于安装活塞泵活塞泵 4:1活塞泵用于泵起和供应胶水,配有不锈钢胶管和过滤器过滤器 不锈钢过滤器具有过滤胶水和消除泵的震动双重功能调压器 4:1不锈钢调压器能自动控制胶量 I/P自动压力追踪阀 根据糊盒机的速度自动调节胶水的压力与流量技术参数泵的
自动滴胶匀胶机
自动滴胶匀胶机/真空旋转涂层机 型号:MHY-29071MHY-29071产品简介:主要用于液体,胶体在材料表面薄膜的形成,适用于硅片,晶片,玻璃,陶瓷等制版表面涂覆工艺。可在科研,教育,生产中应用。 MHY-29071主要特点:1可设定存储26个不同样片的旋转涂敷工艺过程。2每个涂敷工艺过程可以
蛋白胶如何干胶保存
最好有个干胶仪的,直接按照仪器要求做就可以了。如果你要让胶自然干,需要很长时间,而且胶容易变形破裂。
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白
wb转膜条件公式
wb转膜条件公式:10% SDS溶液(m/v)。将电泳后分离的蛋白质从凝胶中转移到固相载体(例如NC膜)上,通常有两种方法:毛细管印迹法和电泳印迹法。常用的电泳转移方法有湿转和半干转。两者的原理完全相同,只是用于固定胶/膜叠层和施加电场的机械装置不同。前者操作容易,转移效率高;而后者适用于大胶的蛋白
wb二抗怎么融化
wb 二抗融化,wb 抗体用5%的脱脂奶粉或者1%的BSA (千分之一的TBST的溶液 )配置,可以先让抗体和奶粉或者BSA 蛋白非特异结合,这样就不会与PVDF 膜上的蛋白结合了。
WB实验的那些事儿
1.二抗需和一抗宿主的物种相同(如一抗来自兔,二抗为抗兔抗体)。原因: 一抗和二抗不匹配。2.参照说明书,设置阳性对照。原因:一抗不识别检测物种蛋白。3.每泳道蛋白上样量不低于20~30μg,设置阳性对照。原因:抗原量不足。4.使用可逆染色剂如丽春红S检测转膜效果,检测转膜操作是否正确。PVDF膜预
WB实战之抗体孵育
由于抗原和抗体特异性结合的效率是非特异性结合的数百万--数十亿倍,所以当特异性抗体与非特异性'抗体'(不好描述,指添加在抗体稀释液中的封闭蛋白,我们可以把它们看成非特异性的一抗)竞争时,尽管抗体稀释液中封闭蛋白的浓度是一抗浓度20K:1以上,在碰撞几率相同的条件下,由于时间的积累