细胞毒的定义

是免疫中T淋巴细胞杀灭靶细胞的一种方式。发挥细胞毒作用的是一类细胞毒T细胞(CTL),这类细胞具有高度的特异性,只杀伤表面带有特异抗原和相应组织相融性抗原复合体(MHC)的瘤细胞(主要是CD8阳性T细胞识别MHC-1分子)。这是因为CTL细胞表面具有特异性抗原受体,能与带有相应抗原的瘤细胞相结合。它杀伤肿瘤细胞的机理目前认为主要是通过释放多种介质和因子来实现。如穿孔素(又称溶细胞素),当CTL与瘤细胞相结合时,CTL即可把含有穿孔素的颗粒从细胞中排出,穿孔素即从颗粒中释放出来,在有钙离子的条件下,12—16个穿孔素分子就可在瘤细胞膜上聚集形成管状并插入到细胞膜中,这样一来瘤细胞就被管状的穿孔素打成无数个小孔,最后终于导致细胞溶解。CTL还可分泌多种丝氨酸脂酶,这种酶能活化穿孔素而促进杀伤作用。此外,CTL还可分泌淋巴毒素(又称为肿瘤坏死因子—β)它可直接杀伤瘤细胞。......阅读全文

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

            实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen

细胞介导的细胞毒作用(CMC)检测法:细胞的制备

CMC中效应细胞的制备1)用淋巴细胞分离液分离PBMC1.抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加2倍量磷酸盐(PBS)悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上,400×g离心30分钟。2.离心后红细胞在管底,PBMC在血浆和淋巴细胞分离液的交界面。收集PBMC,用PBS洗涤细胞两次,每次离心150×

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

实验方法原理Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quench试剂(一种以Ca2+螯合的小牛血红蛋白主要成分、还含溴化乙啶试

细胞毒药物引起的药物性肺炎的介绍

  细胞毒药物引起的药源性肺疾病非常复杂,主要因为这种疾病病情较重,致死率高;其次,它的临床症状如发热和影像学改变与肺部感染性等其他疾病表现相似,临床不易鉴别。自从1961年首次报道马利兰引起肺纤维化后,细胞毒药物引起的肺部病变逐渐被重视,成为一个主要的药物副作用,尤其是对博来霉素、甲氨蝶呤和环磷酰

特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定

一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL,然后再进行细胞毒试验。其原理为:外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆,在体外经某一特定(或同种异体细胞)抗原刺激后,能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖,而其他T细胞克隆则逐渐死亡;经3~4次刺激后,存活的均为识别

Calcein释放实验检测细胞毒性T淋巴细胞活性实验

            实验方法原理 Calcein acetoxymethy1酯(Calcein-AM)是一种胞浆荧光标记物,本身无荧光,渗入细胞后细胞内酯酶催化生成的水溶性绿色荧光物质不易透出细胞。靶细胞用其标记后与效应细胞共育,再加Fluoro-Quen

细胞毒性药物治疗肾病综合征的介绍

  激素治疗无效,或激素依赖型或反复发作型,可以细胞毒药物协助治疗。由于此类药物多有性腺毒性、肝脏损伤及大剂量可诱发肿瘤的危险,因此,在用药指征及疗程上应慎重掌握。目前此类药物中,环磷酰胺(CTX)和苯丁酸氮介(CB1348)临床应用较多。

HLA的分型方法淋巴细胞毒试验培养试验

1.淋巴细胞毒试验:为HLA抗原分型常用方法。原理:淋巴细胞膜上的HLA抗原与相应抗体结合后,在补体作用下,细胞膜损伤,细胞溶解破裂被染色,计算显微镜下观察着色细胞的百分率(>20%为阳性反应)。Ⅰ类抗原分型时可用T淋巴细胞或外周血淋巴细胞;进行Ⅱ类抗原分型时需用B淋巴细胞。 2.混合淋巴细胞培养

淋巴细胞对肿瘤细胞的细胞毒试验方法

  1) 肿瘤细胞培养物制成悬液,并稀释至需要的细胞浓度.   2) 于微量试验班的小孔内分别接种0.2ml肿瘤细胞(内含5×102)个细胞,37℃培育24h.   3) 细胞贴壁后,轻轻轻去培养基,加1mlPBS洗涤,轻去洗涤液及未贴壁细胞.   4) 向小孔分别加入0.2ml不同浓度的淋巴细胞(

特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定

实验试剂丝裂霉素C(Sigma):用培养液或PBS配制300μg/ml含20%的新生牛血清的RPMI 1640实验材料EB病毒转化的B淋巴母细胞株实验步骤1.   特异性CTL的诱导和制备1)   取作者外周血分离PBMC,无血清1640洗两遍,用含20%的新生牛血清的RPMI 1640调成1.5×

细胞介导细胞毒作用检测法7:单细胞CMC试验

单细胞CMC试验1.用细胞培养液等量混合效应细胞和靶细胞,30℃水浴10分钟。室温中250×g离心5分钟,去上清液。同量靶细胞不加效应细胞同样处理作为对照。2.用少量细胞培养液轻轻悬浮细胞,吸管上下吹打5~6次。这一分散细胞的步骤关系到试验的准确性和重复性,应当设法保持技术的一致性。取少许细胞悬液,

PNAS:细胞毒性CD4-T细胞竟是长寿的关键

  日本RIKEN综合医学科学中心(IMS)和庆应大学医学院的科学家利用单细胞RNA分析发现,超级百岁老人(超过110岁)拥有一种称为细胞毒性CD4 T细胞的免疫细胞。这项研究于近期发表在《PNAS》上。  超级百岁老人是一个独特的群体,他们非常罕见,例如,2015年日本的100岁以上人口超过61,

特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定

实验概要本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL,然后再进行细胞毒试验。其原理为:外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆,在体外经某一特定(或同种异体细胞)抗原刺激后,能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖,而其他T细胞克隆则逐渐死亡;经3~4次刺激后,存活的均为识别特异

抗体依赖性细胞毒性检查作用及检查过程

  抗体依赖性细胞毒性检查作用  抗体依赖性细胞(K细胞)毒性对癌症及免疫系统疾病的诊断有作用。异常结果:K细胞的杀伤作用在肿瘤免疫、抗病毒免疫、抗寄生虫免疫、移植排斥反应及一些自身免疫性疾病中均有重要作用,产生的免疫应答有免疫防护及免疫病理两种类型。肾移植中的排斥反应,机体自身免疫性疾病的受累器官

特异性抗原诱导的细胞毒性T细胞功能测定

一、基本原理本方法先借助长期混合淋巴细胞培养法获得抗原特异性CTL,然后再进行细胞毒试验。其原理为:外周血淋巴细胞包含针对不同抗原的特异性CTL克隆,在体外经某一特定(或同种异体细胞)抗原刺激后,能识别该抗原的T细胞克隆被选择性激活、增殖,而其他T细胞克隆则逐渐死亡;经3~4次刺激后,存活的均为识别

细胞介导的细胞毒作用(CMC)检测法:效应细胞和靶...

细胞介导的细胞毒作用(CMC)检测法:效应细胞和靶细胞的制备CMC中效应细胞的制备:1)用淋巴细胞分离液分离PBMC:1、抽取正常人静脉血加到肝素抗凝管中,加2倍量磷酸盐(PBS)悬浮细胞。将此悬液小心加在淋巴细胞分离液上,400×g离心30分钟。2、离心后红细胞在管底,PBMC在血浆和淋巴细胞分离

细胞介导细胞毒作用检测法:时间分辩荧光分析法

1)铕荧光检测法:标记靶细胞:1、EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2、用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml,加50μl 10mg/ml硫酸葡聚糖

淋巴细胞毒试验的临床意义及注意事项

  临床意义  本试验可以作为体外测定肿瘤患者细胞免疫的指标;也可以通过测定机体免疫活性细胞杀伤肿瘤细胞的能力,来判断肿瘤患者的预后;还可以鉴定淋巴细胞的功能性亚群。  注意事项  (1)在测定受检者淋巴细胞攻击肿瘤细胞的能力时,实验组中加入肿瘤细胞和受检者淋巴细胞,对照组中加入肿瘤靶细胞和培养液。

淋巴细胞毒试验的注意事项及临床意义

  注意事项  (1)在测定受检者淋巴细胞攻击肿瘤细胞的能力时,实验组中加入肿瘤细胞和受检者淋巴细胞,对照组中加入肿瘤靶细胞和培养液。若检测其它样品如肿瘤抗原或免疫原、治疗药物等与细胞免疫的关系,则应增设第3组,在此试验组中先使淋巴细胞与待测样品作用,继经洗涤后再观察此“致敏淋巴细胞”对肿瘤靶细胞的

细胞介导细胞毒作用检测法6:荧光法检测CMC

荧光法检测CMC1.用含10%小牛血清和抗生素的RPMI-1640培养液将K562细胞配成1×105/ml浓度。用同样培养液将PBMC配成1×106/ml浓度。2.取96孔圆底细胞培养板,每孔加0.1ml K562细胞悬液;每孔加适量PBMC使效靶比为1:1~5:1,每种处理3个复孔;3个对照孔只加

淋巴细胞毒试验的正常值及临床意义

  正常值  形态学检查法:比较受检组与对照组,P0.05。  临床意义  本试验可以作为体外测定肿瘤患者细胞免疫的指标;也可以通过测定机体免疫活性细胞杀伤肿瘤细胞的能力,来判断肿瘤患者的预后;还可以鉴定淋巴细胞的功能性亚群。

关于免疫细胞的功能检测—细胞介导的细胞毒试验的介绍

  一种细胞通过直接接触将另一种细胞杀伤的现象,称为细胞介导的细胞毒作用。在人体内有两种能直接杀伤靶细胞的细胞,即自然杀伤细胞(NK细胞)和特异性杀伤T细胞(特异性Tc细胞)。NK细胞存在于未受抗原刺激的正常人体,对某些受感染的细胞、肿瘤细胞或正常的未成熟造血细胞有杀伤活性。特异性Tc细胞存在于受过

细胞介导细胞毒作用检测法5:用MTT检测法测定CMC

用MTT检测法测定CMC1. Fen细胞培养于含10%小牛血清的RPMI-1640培养液中,在625px2培养瓶中生长到接近汇合。用含0.05%胰蛋白酶,0.02% EDTA的PBS消化细胞5分钟,洗涤后,用细胞培养液将细胞配成1×105/ml。2. 取96孔细胞培养板,每孔加0.1ml细胞悬液,在

使用自动细胞成像系统进行细胞毒性评价和细胞活死测定

简介细胞活 / 死测定被广泛应用于各种研究领域,包括各种化合物的细胞毒性作用、实验处理或基因表达变化的研究。自动细胞成像和分析系统提供了一种评价细胞活性和细胞死亡的最佳方法。在本篇应用文献中,我们介绍了使用 ImageXpress®Pico 自动细胞成像系统以及 CellReporter

MTT法和CCK-8测定细胞毒性和增值的优劣比较

Cell Counting Kit-8简称CCK-8试剂盒,是一种基于WST-8的广泛应用于细胞增殖和细胞毒性的快速高灵敏度检测试剂盒。Ø WST-8是一种类似于MTT的化合物,在电子耦合试剂存在的情况下,可以被线粒体内的一些脱氢酶还原生成橙黄色的formazan。细胞增殖越多越快,则颜色越深;细胞

上海应物所镉系量子点细胞毒性研究取得系列进展

  量子点是一种具有卓越荧光性能的新型纳米材料,在生物医学领域具有广泛的应用前景。然而,如何解决量子点,特别是发光效率最高的镉系量子点的生物相容性问题,成为这种纳米材料临床应用的瓶颈问题,其研究受到广泛关注。   中国科学院上海应用物理研究所物理生物学实验室的黄庆和樊春海课题组对镉系量子点的细胞毒

人细胞毒素相关蛋白A-(CagA)检测试剂盒使用说明

实验原理此试剂盒基于酶联免疫法,采用HRP酶联物;第一次孵育中,样本中的抗CagA IgG 抗体与包被的CagA 抗原结合,洗板除去未结合的,再次孵育,二抗(过氧化物酶标记的抗人IgG)与CagA-抗原-抗体复合物结合,再次洗板后,无色的显色剂(TMB)底物液加入微孔内,与过氧化物酶反应生成

乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒使用说明

乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒产品编号产品名称包装C0017乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒500次产品简介:一基的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit),也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Relea

细胞介导细胞毒作用检测法4:时间分辩荧光分析法

时间分辩荧光分析法1)铕荧光检测法标记靶细胞1.EuCl3的制备:称取58.08mg Eu2O3,用少量1N HCl搅拌至溶解,再用1N NaOH调节pH至4.0。加双蒸水配成33~100mmol/L的保存液,4℃保存备用。2.用预冷的标记液将靶细胞浓度调整到5×106/ml,加50μl 10mg/

人产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG酶联免疫分析(ELISA)

人产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG的含量。实验原理:  本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中产细胞毒素幽门螺杆菌抗体IgG水平。用纯化的人产细胞毒素幽