细胞活性和细胞毒性检测的实验方法
细胞数量确定1.将细胞悬浮液(100μL/孔)接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育(例如,在37℃,5%CO2下)。2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡,因为它们会干扰O.D.读数。3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。细胞增殖和细胞毒性测定1.将种子细胞以103-104个细胞/孔的密度在96孔板中在100μL培养基中培养。将细胞在CO2培养箱中于37℃培养24小时。2.将不同浓度的待测物质加入板中。3.将培养板在培养箱中孵育适当的时间(例如,6,12,24或48小时)。4.使用重复移液器向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡,因为它们会干扰O.D.读数。5.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。6.在读取孔板之前,重要的是在轨道振动器上轻轻混合1分钟,以确保颜色均匀分布。7.使用酶标仪测量450 nm处的吸光度。数据分析统......阅读全文
Cell:癌基因控制干细胞活性
近日,刊登在国际杂志Cell上的一项研究论文中,来自海德堡干细胞研究所等机构的研究人员通过对胚胎干细胞进行研究发现了可以控制胚胎发育暂停的因子。我们都知道,在很多类型的癌症中都会产生大量的MYC(癌基因),而且MYC产生地越多,肿瘤的恶性程度就会愈发明显。 研究者指出,MYC同样在胚胎干细胞中
MTT法细胞活性检测实验步骤
MTT是一种粉末状化学试剂,全称为3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,汉语化学名为 3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐,商品名:噻唑蓝,是一种黄颜色的染料。MTT主要有两个用途:
LSCM细胞内活性氧基
细胞内活性氧基 活性氧(active oxygen species)可影响细胞代谢,与蛋白质、核酸、脂类等发生反应,有些反应是有害的,因此测量活性氧在毒理学研究中有一定的意义。根据检测活性氧的不同可选择不同的荧光探针。常用荧光探针有Dichlorodihydrofluorescein diaceta
细胞活性检测DNA合成增殖实验
BrdU检测法BrdU为胸腺嘧啶核苷(Thymine)的衍生物,可用于标记活细胞中新合成的DNA(细胞活性周期S期),BrdU可随着DNA复制进入子细胞,因此在加入BrdU后分裂增殖的细胞DNA都会带有BrdU标记,可通过抗BrdU单克隆抗体检测,借此检测细胞的增殖能力,但BrdU单克隆抗体检测过程
自然杀伤细胞活性测定方法介绍
【概述】自然杀伤细胞(NK)介导天然免疫应答,它不依赖抗体和补体,即能直接杀伤靶细胞,如肿瘤细胞或受病毒感染的细胞等;此外,尚有免疫调节功能,也参与移植排斥反应和某些自身免疫病的发生发展。【参考值】51Cr释放法:自然释放率
辅佐细胞的免疫活性介绍
1.抗原递呈作用辅佐细胞能够以容易识别的方式将抗原递呈给T细胞,从而使T细胞活化;具有这项功能的细胞统称为抗原呈递细胞(antigen-presentingcell,APC)。APC通常指那些表达MHCⅡ类分子、可向TH细胞递呈抗原的细胞,一般情况下用作辅佐细胞的代名词。还有一类细胞可将表面抗原与M
-Cell:癌基因控制干细胞活性
近日,刊登在国际杂志Cell上的一项研究论文中,来自海德堡干细胞研究所等机构的研究人员通过对胚胎干细胞进行研究发现了可以控制胚胎发育暂停的因子。我们都知道,在很多类型的癌症中都会产生大量的MYC(癌基因),而且MYC产生地越多,肿瘤的恶性程度就会愈发明显。 研究者指出,MYC同样在胚胎干细胞中
单核巨噬细胞系统的细胞的分泌活性
MPS细胞是一类重要的分泌细胞。在许多组织和器官中,MPS细胞是分泌性蛋白的主要来源,其分泌物种类之多在体内仅肝细胞才能与之相比。一般情况下,活化的MPS细胞才有活跃的分泌能力。现已发现MPS细胞可分泌多达100种以上的酶类和其他生物活性物质。这些物质的分子量不一,从分子量仅32的超氧阴离子至分
单核吞噬细胞系统细胞的分泌活性介绍
MPS细胞是一类重要的分泌细胞。在许多组织和器官中,MPS细胞是分泌性蛋白的主要来源,其分泌物种类之多在体内仅肝细胞才能与之相比。一般情况下,活化的MPS细胞才有活跃的分泌能力。现已发现MPS细胞可分泌多达100种以上的酶类和其他生物活性物质。这些物质的分子量不一,从分子量仅32的超氧阴离子至分子量
细胞动力学参数检测——细胞增殖活性的检测
实验步骤展开
细胞活性和细胞毒性检测的实验方法
细胞数量确定1.将细胞悬浮液(100μL/孔)接种在96洞孔板中。将板在潮湿的培养箱中预孵育(例如,在37℃,5%CO2下)。2.向板的每个孔中加入10μLCCK8溶液。注意不要在孔洞中引入气泡,因为它们会干扰O.D.读数。3.将培养板在培养箱中孵育1-4小时。4.使用酶标仪测量450 nm处的吸光
细胞活性检测的方法有多少种
细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、 3H 放射性同位素掺入法、 MTT 法等。其中 MTT 法以其快速简便,不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但 MTT 法形成的 Formazan 为水不溶性的,需要加有机溶剂溶解,由于在去上清操作时会有可能
自然杀伤细胞活性的临床意义
K细胞主要分布在腹腔渗出液,外周血、脾脏中;NK细胞主要分布在骨髓、外周血和脾脏中。临床主要用于肿瘤、病毒感染、寄生虫感染、自身免疫和移植免疫等病人,检测其K、NK细胞杀伤功能,在维持和调节特异性免疫中起重要作用。
细胞因子生物学活性检测
实验方法原理 白细胞介素1是一种重要的细胞因子,主要由单核-巨噬细胞产生,IL-1不仅对多种免疫活性细胞有重要的调节功能,而且与发热、炎症发生以及某些疾病的病理变化有关。目前对IL-1产生水平的检测主要应用生物学活性检测的方法。一、ConA刺激小鼠胸腺细胞检测IL-1生物学活性 小鼠胸腺细胞在丝裂原
关于辅佐细胞的免疫活性介绍
1、抗原递呈作用辅佐细胞能够以容易识别的方式将抗原递呈给T细胞,从而使T细胞活化;具有这项功能的细胞统称为抗原呈递细胞(antigen-presentingcell,APC)。APC通常指那些表达MHCⅡ类分子、可向TH细胞递呈抗原的细胞,一般情况下用作辅佐细胞的代名词。 还有一类细胞可将表面
用Ki67检测细胞增殖活性
实验步骤展开
细胞活性检测的方法有多少种
细胞活性测定方法有台盼蓝染色法、克隆(集落)形成法、 3H 放射性同位素掺入法、 MTT 法等。其中 MTT 法以其快速简便,不需要特殊检测仪器、无放射性同位素、适合大批量检测的特点而得到广泛的应用。但 MTT 法形成的 Formazan 为水不溶性的,需要加有机溶剂溶解,由于在去上清操作时会有可能
影响冻存细胞活性的因素分析
做试验前要先学会冻存,以备自己在后面的试验中能坚持同一来源、稳定牢靠的细胞,且可减少污染或其它不利影响。你们细胞是怎样冻存的?求解!我的是4度冰箱放半小时,-20度冰箱半小时,然后转移到-80度冰箱!但是放在-80度冰箱1个月后,细胞复苏就感觉状态不太好了!影响冻存细胞活性的因素1,细胞冻存保护剂:
基因改造技术可激活细胞电活性
据美国物理学家组织网近日报道,最近,杜克大学工程师对正常情况下不活跃的细胞进行了基因改造,引入了能形成离子通道的基因,让它们能产生电流并导电。该结果对深入研究生物电行为、开发神经系统和心脏病新疗法具有重要意义,还可用于设计新型传感器来探测疾病和环境毒素等。实验结果发表在《自然通讯》
LAK/TIL细胞的制备与活性测定
LAK/TIL细胞的制备与活性测定:淋巴因子激活的细胞毒性细胞(lymphokine activated killer,LAK)和肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)在机体的免疫防御中起着十分重要的作用,特别是在肿瘤免疫过继疗法中具有重要的
自然杀伤细胞的自然杀伤活性简介
由于NK细胞的杀伤活性无MHC限制,不依赖抗体,因此称为自然杀伤活性。NK细胞胞浆丰富,含有较大的嗜天青颗粒,颗粒的含量与NK细胞的杀伤活性呈正相关。NK细胞作用于靶细胞后杀伤作用出现早,在体外1小时、体内4小时即可见到杀伤效应。NK细胞的靶细胞主要有某些肿瘤细胞(包括部分细胞系)、病毒感染细胞
LAK/TIL细胞的制备与活性测定
淋巴因子激活的细胞毒性细胞(lymphokine activated killer,LAK)和肿瘤浸润性淋巴细胞(tumor infiltrating lymphocyte,TIL)在机体的免疫防御中起着十分重要的作用,特别是在肿瘤免疫过继疗法中具有重要的应用前景,其制备及活性的检测对于评价
细胞因子的生物学活性
细胞因子具有非常广泛的生物学活性,包括促进靶细胞的增殖和分化,增强抗感染和细胞杀伤效应,促进或抑制其它细胞因子和膜表面分子的表达,促进炎症过程,影响细胞代谢等。 一、免疫细胞的调节剂 免疫细胞之间存在错综复杂的调节关系,细胞因子是传递这种调节信号必不可少的信息分子。例如在T-B细胞之间,T细
细胞活性检测的多种方法应用
做细胞实验的亲们,经常需要对细胞的活性进行验证,如何知道自己研究的细胞是否还活着,活性怎么样? PCR、抗体IHC染色等细胞分析方法进行活性检测,由于只能反映某个时间点的细胞行为而具有局限性。当传统细胞分析方法无法获得预期结果时,使用实时细胞分析方法通常会得到很多新的生物学发现,因此活细胞分析技
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m乙烷32p标记的细胞带螺帽的聚丙烯离心管测量范围PH4~8的PH试纸小心:高氣酸■ 三-n -辛胺; U 1,2-三氯三氟乙烧;
Molecular-Devices在细胞成像系统上检测细胞活性或毒性
EarlyTox™细胞完整性试剂盒由一系列易于识别活细胞和死细胞的优化试剂组成。可用于检测不同处理对细胞活性的影响,也可评估不同机制产生的细胞毒性,包括凋亡和坏死。该试剂盒设计工作于多种细胞类型,贴壁和悬浮均可。简单的操作流程和优异的试剂表现使其能应用到高通量扫描上。试剂盒中使用了两种结合DNA的荧
用增殖的细胞核抗原(PCNA)检测细胞增殖活性
实验步骤展开
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP 用发光分析定量测定ATP 用高效液相层析定量测定ATP 测定[γ-32P]ATP的比活性 实验步骤
透化细胞和退化细胞器中测定比活性实验
从标记的细胞或者细胞裂解物中提取ATP用发光分析定量测定ATP用高效液相层析定量测定ATP测定[γ-32P]ATP的比活性实验步骤1.从标记细胞提取ATP1) 备下列材料:本实验用到的所有溶液必须用Mlli - Q纯化的水或它的等价物配制。冰冷的4%高氣酺(v/v)三-n-辛胺1,1,2-三氮三m
关闭CML干细胞活性有望攻克白血病干细胞
美国亚特兰大12月9日召开的第54届美国血液协会年会暨博览会上,天普大学医学院报告了他们在研究慢性(CML)治疗方面的进展。他们设计出一种关闭CML活性的方法,以此遏制病情的进一步发展。研究人员指出,该发现有望带来攻克癌症干细胞耐药性的个体化新疗法。 在CML中,骨髓干细胞中的基因ABL1