A431(人表皮癌细胞)培养攻略

细胞名称:A-431(人表皮癌细胞) 细胞别称:A431;A431/P 细胞货号:SNL-066 生长特性:贴壁 培养条件:DMEM+10%FBS+1%P/S 培养环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃ 细胞简介:A-431源自一位患有皮样癌的85岁女性表皮,是由D·J·Giard等人建立的一系列细胞株中的一株。A-431细胞在抗胸腺细胞球蛋白、血清处理的NIH瑞士小鼠中形成类似于恶性黑素瘤快速增长的皮下肿瘤,在普通成纤维细胞饲养层和琼脂上形成克隆。A-431细胞是一个超三倍体人细胞株。A-431可用于3D细胞培养、高通量筛选、癌症研究、毒理学和免疫肿瘤学研究,也是一种合适的转染宿主。 1、A-431细胞消化时间较长,具体时间因胰酶浓度、效价、消化条件有所不同,第一次对该细胞进行消化时要摸索最佳时间(具体步骤见后文)。传代时注意消化至细胞部分脱落后,先用胰酶将细胞都吹下来后再加入完培终止消化,避免......阅读全文

A431(人表皮癌细胞)培养攻略

  细胞名称:A-431(人表皮癌细胞)  细胞别称:A431;A431/P  细胞货号:SNL-066  生长特性:贴壁  培养条件:DMEM+10%FBS+1%P/S  培养环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃  细胞简介:A-431源自一位患有皮样癌的85岁女性表皮,是由D·J

HEp2NS1细胞人喉表皮样癌细胞培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mLHEp-2-NS1细胞人喉表皮样癌细胞。悬液的冻存管在  37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL  培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 2

HEp2NS1细胞人喉表皮样癌细胞培养注意事项

1. 收到HEp-2-NS1细胞人喉表皮样癌细胞。后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现 象发生请及 时和我们联系。2. 仔细阅读HEp-2-NS1细胞人喉表皮样癌细胞。说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致。若由于培

HEp2NS1细胞人喉表皮样癌细胞

  武汉赛默飞生命科技有限公司成立于2019年,注册资金100万元,公司办公场所坐落武汉光谷生物城。赛默飞生命致力于为行业内的客户提供技术开发、技术咨询、技术转让等服务,秉承着“我们用心 客户省心”的服务理念打造出一支敢于创新、敢于挑战的综合服务团队。   赛默飞生命主营业务:HEp-2-NS1细

说说人表皮永生化细胞HACAT的培养步骤

 说说人表皮永生化细胞HACAT的培养步骤。  1、复苏细胞:在37℃水浴中快速摇动装有1mL细胞悬液的冷冻管融化,加入5mL培养基并充分混合。在1000RPM下离心5分钟,弃去上清液,加入4-6mL完全培养基并充分吹扫。然后将所有细胞悬浮液添加到培养瓶中,并培养过夜(或将细胞悬浮液添加到6cm皿中

HEp2NS1细胞人喉表皮样癌细胞注意事项

1. 上述操作方案的数据可作为参考,实际操作已实验室配备的耗材为准,2. 冻存时含 10%DMSO,事先加 9ml 培养液是为了稀释 DMSO,理论上 1%DMSO对细胞性3. 隔着 PE 手套能有效防止水浴过程中导致污染4. 重悬的体积只是作为参考,具体的根据需要可进行调整5. 由于复苏过程中已经

HEp2NS1细胞人喉表皮样癌细胞复苏操作流程

1. 准备工作,开水浴锅,预热试剂,超净工作台紫外照射 30min,找到对应细胞在液氮罐中的位置2. 紫外照射后风机吹 10min 后,酒精擦拭台面,放入试剂和离心管,取 15ml 离心管,加入 9ml 培养液3. 在液氮罐中取出细胞,先拧松放液氮,再拧紧,将冻存管放入 PE 手套中,然后水浴融化后

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如

JEG3(人绒毛膜癌细胞)培养操作

1)复苏细胞:将含有 1mLJEG-3(人绒毛膜癌细胞)。悬液的冻存管在  37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL  培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 250px

细胞培养大攻略8

79、细胞传代消化时所用胰酶浓度越高越好吗? 不见得!因为胰蛋白酶溶液的消化能力是和溶液的pH、温度、胰酶浓度及溶液中是否含有Ca++, Mg++离子和血清等因素有关。通常情况下,pH 8.0 , 温度 37℃其作用能力最强。另外,钙、镁离子及血清均能大大降低其消化能力。我们每次进行传代消化前,一定

细胞培养大攻略9

85、培养液出现沉淀,但pH值不变 可能原因 (1)洗涤剂清洗后残留有磷酸盐,将培养基成分沉淀下来。 (2)冰冻保存培养液。 建议解决方法 (1)用去离子水反复冲洗玻璃器皿,然后灭菌。 (2)将培养液加热到37℃,摇动使其溶解如沉淀仍然存在,丢弃培养液。 86、培养液出现沉淀, 同时pH 发生变化 

细胞培养大攻略3

70、 血清解冻后发现有絮状沉淀物出现,该如何处理?血清中沉淀物的出现有许多种原因,但最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清

细胞培养大攻略2

26、PFHM-II 和HYBRIDOMA-SFM之间有什么差别? PFHM-II (Protein-free Hybridoma Medium)是不包含有蛋白质的单克隆抗体生产培养基。如果作为杂交瘤生产培养基使用,PFHM-II可能需要补充低水平的血清。HYBRIDOMA-SFM即是杂交瘤生产培养

细胞培养大攻略4

10、为什么培养基中可以省去加酚红?   酚红在培养基中被用来作为PH值的指示剂:中性时为红色,酸性时为黄色,碱性时为紫色。研究表明,酚红可以模拟固醇类激素的作用(特别是雌激素)。为避免固醇类反应,培养细胞,尤其是哺乳类细胞时,用不加酚红的培养基。由于酚红干扰检测,一些研究人员在做流式细胞检测时,不

细胞培养大攻略6

44、细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别注明对DMSO 敏感之细胞外, 绝大部分细胞株(包括悬浮性细胞), 在解冻之后, 应直接放入含有10-15 ml新鲜培养基之培养角瓶中, 待隔天再置换新鲜培养基以去除DMSO 即可, 如此可避免大部分解冻后细胞无法生长或贴附之问题。 

细胞培养大攻略7

62、贮存在冰箱中的瓶口已开的培养基,在放置几天后颜色变紫? 这主要是由于在暴露到周围的CO2水平时,碳酸氢纳导致了pH值的上升。您可以在使用前松开瓶口,在CO2培养箱孵育培养基10-15分钟,来校正溶液的pH值(确定松开瓶口以保证气体交换)。 63、 细胞培养基偶然被冻,可否继续使用? 如果细胞培

细胞培养大攻略5

24、昆虫细胞培养的最适PH值和渗透压是多少?   生长培养基的PH值对细胞的增值和病毒或重组蛋白的生产均会产生影响。对于大部分鳞翅类昆虫细胞系,在PH值 6.0-6.4范围的大部分应用效果良好。培养鳞翅类昆虫细胞系时,培养基的最适渗透压是 345-380 mOsm/kg.。为保证可靠和持久的细胞培

人单核细胞白血病(THP1)细胞培养攻略

THP-1细胞系是1980年Tsuchiya等人建立的人单核细胞白血病细胞系。它来自一位急性单核细胞白血病患者的血液,有分化为多种巨噬细胞的能力,是各领域研究常用的细胞系之一。THP-1是人外周血的单核细胞系,最初来源于急性单核细胞性白血病患者。属于悬浮细胞,适合用于转染或感染实验。其表面抗原HLA

GBCSD人胆囊癌细胞传代培养

细胞培养过程中,传代是非常重要的环节,若操作不当会给细胞带来不可逆转的伤害,原代细胞因其培养难度高且传代次数有限,细胞消化的步骤需要格外细心与谨慎。根据其丰富的原代细胞培养经验,总结出一套细胞消化的方法,有效降低了消化步骤对细胞的操作。文韧生物现分享给大家:1. 当细胞达到80-90%融合时需要传代

人胰腺腺癌细胞BxPC3细胞培养步骤

悬浮细胞:计数将要冻存的活细胞。细胞应该处于对数生长期,以大约200~400g离心5分钟沉淀细胞,使用移液管移去上清到zui小体积,不要搅乱细胞。MCF7细胞 (1×T25培养瓶#密度75%提供技术服务)复苏细胞以1×107到5×107细胞/ml密度,在包含有血清的冷冻培养基中再次悬浮细胞,或者以0

表皮葡萄球菌的培养特性

  营养要求不高,普通培养基上生长良好。需氧或兼性厌氧,最适生长温度37℃,最适pH7.4。具有耐盐性,生长时需要生物素。在肉汤培养基中经37℃,24小时孵育后,呈均匀混浊生长。在普通琼脂平板上形成凸起、光滑不透明的圆形菌落,直径1-2毫米。表皮葡萄球菌一般产生白色或柠檬色色素,故菌落呈现白色或柠檬

细胞培养攻略:细节决定成败

培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。-好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。 那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧! 1.细胞生长的营养来源

细胞培养攻略:细节决定成败

  培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。  那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧!  1.细胞生长的

如何消除AV3人宫颈癌细胞培养的污染?

   当重要的培养细胞污染时,研究者可能试图消除或控制污染。首先,确定污染物是细菌、真菌、支原体或酵母,把污染细胞与其它细胞系隔离开,用实验室消毒剂消毒培养器皿和超净台,检查HEPA过滤器。  高浓度的抗生素和抗霉菌素可能对一些细胞系有毒性,因而,做剂量反应实验确定抗生素和抗霉菌素产生毒性的剂量水平

A549(人非小细胞肺癌细胞)细胞培养的优点

1.研究的对象是活细胞在实验过程中,根据要求可始终保持细胞活力,并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况,包括活细胞的形态、结构、生命活动等。2.研究条件可以人为控制pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件,可以根据实际需要进行人为的控制,同时,可以施加化学、物理、生物等因素作为条

人胰腺癌细胞培养中如何预防老化呢

防止细胞老化主要还是要做到勤观察、勤换液、勤传代、勤保种,特别是传代,不能等细胞太密了之后传,一般细胞建议长到70%融合度传代H;换培养液应该根据自己细胞消耗培养基的情况来确定是否该换。如果感觉时间不好把握的话就多培养几瓶细胞,在不同的时间换液,后再来比较下,看什么时候换液好,得出自己的结论;选择正

HeLa人宫颈癌细胞

HeLa人宫颈癌细胞注意事项:  原代动物细胞培养:1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组

关于人表皮生长因子的简介

  人表皮生长因子(hEGF)是由53个氨基酸组成的小分子多肽,分子量约为6000道尔顿,等电点约为4.6,分子内有三对二硫键,因而对酸、碱、热等理化因素均较稳定。  hEGF具有广泛的生物学效应,能极强地促进各种表皮组织生长,在医学上己用于烧烫伤、溃疡、各类创伤以及角膜损伤等的治疗。EGF还能促进

PCR反应实验操作注意事项

SSR分子标记实验:   PCR反应实验操作注意事项:PCR 反应过程中应特别注意不要使样品相互污染, 以免造成试验结果不准确, 同时也要注意所加试剂或样品必须是经过混匀后的液体, 这样才能保证反应液各成分的浓度和体积的均一性 所用试剂需从正规商家购进, 以保证试剂的质量。BEAS-2B细胞 人正常

人癌细胞染色体制备

实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法,了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系,体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞,可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法,该方法的关键包括