英国研究构建叶绿体RNA聚合酶原子模型
叶绿体中的RNA聚合酶比较独特，它拥有比蓝藻还多的亚基，转录机制也更复杂。为进一步探究叶绿体RNA聚合酶的结构，英国约翰英纳斯中心科研人员使用冷冻电镜，对从白芥菜提取出来的叶绿体RNA聚合酶样本进行成像，并研究分析了其中的21个亚基等结构的作用，建立了原子水平的数据模型。该模型揭示了超氧化物歧化酶、赖氨酸甲基转移酶和氨基酸连接酶（亚基）的详细信息，为进行下一步分析各个蛋白的功能，理解叶绿体转录及其在植物生长过程中的作用机制提供了基础。相关研究成果发表在《细胞》（Cell）杂志上。 本文摘自国外相关研究报道，文章内容不代表本网站观点和立场，仅供参考。......阅读全文
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基因表达实验」中「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA
T7RNA聚合酶的基本信息
T7RNA聚合酶具有高度启动子专一性，且只会转录T7噬菌体中位于T7启动子下游的的DNA或DNA复制品。此酶在合成RNA的过程中，需要DNA模板与镁离子（Mg2+）作为辅因子。牛血清蛋白（bovine serum albumin，BSA）及精胺（spermidine）对此酶具促进效果。与细菌的RNA
从－PEI－沉淀洗脱σ32－和－RNA－聚合酶实验
试剂、试剂盒 缓冲液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A 仪器、耗材
从－PEI－沉淀洗脱σ32－和－RNA－聚合酶实验
试剂、试剂盒 缓冲液 A 含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol LNaCl 的缓冲液 A仪器、耗材 SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶实验步骤 材料与设备SDS-PAGE 电泳装置聚丙烯酰胺小胶（10%)试剂缓冲液 A含 0、0.3、0.5、0.7、0.9 和 1.1mol
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
两种重组痘苗病毒共感染细胞 单病毒感染OST7-1细胞 利用VOTE系统 实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基
T7RNA聚合酶的基本信息
T7RNA聚合酶具有高度启动子专一性，且只会转录T7噬菌体中位于T7启动子下游的的DNA或DNA复制品。此酶在合成RNA的过程中，需要DNA模板与镁离子（Mg2+）作为辅因子。牛血清蛋白（bovine serum albumin，BSA）及精胺（spermidine）对此酶具促进效果。与细菌的RNA
英国研究构建叶绿体RNA聚合酶原子模型
叶绿体中的RNA聚合酶比较独特，它拥有比蓝藻还多的亚基，转录机制也更复杂。为进一步探究叶绿体RNA聚合酶的结构，英国约翰英纳斯中心科研人员使用冷冻电镜，对从白芥菜提取出来的叶绿体RNA聚合酶样本进行成像，并研究分析了其中的21个亚基等结构的作用，建立了原子水平的数据模型。该模型揭示了超氧化物歧化
3类不同的RNA聚合酶的功能介绍
真核细胞含有3类不同的RNA聚合酶,根据其对α-鹅膏蕈碱的敏感性不同,分为RNA聚合酶Ⅰ(A)、RNA聚合酶Ⅱ(B)、RNA聚合酶Ⅲ(C),如下:酶的种类存在功能对抑制物的敏感性RNA聚合酶Ⅰ核仁合成rRNA前体不敏感RNA聚合酶Ⅱ核质合成mRNA前体及大多数snRNA敏感RNA聚合酶Ⅲ核质合成5S
RNA聚合酶复合物晶体结构获解析
中科院武汉病毒所研究员龚鹏带领研究小组解析了RNA病毒基因组复制和转录中重要物质——RdRP转位中间体的晶体结构。这将为相关抗病毒研究提供重要依据。相关成果日前发表于美国《国家科学院院刊》。 核酸聚合酶是核酸生物合成的分子机器，也是实现核酸遗传信息复制和传递的关键蛋白。在模板序列的指导下，聚合
荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验
实验步骤 ##一、 从组织和培养细胞中分离RNA1.TRIzol试 剂（Invitrogen)。该试剂含有苯酚和硫氰酸盐化合物，操作时应穿实验服，戴手套，存放于 4°C 。2.氯仿。3.异丙醇。4.乙醇。5.焦炭酸二乙酯（DEPC) 处理的水
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（三）
实验方法原理VOTE是最近发展的痘苗病毒/T7 RNA聚合酶混合表达系统，将外源基因克隆到质粒 pVOTE. 1或 pVOTE. 2 中，通过同源重组将其整合到痘苗病毒 vT7lacOI 基因组中，制备重组病毒储液。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）存在的条件下，用重组病毒感染细胞，外源基因
荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验
差异显示聚合酶链反应（PCR) 可促进在诸多物种中与污染暴露相关的新分子标志物的鉴定。至今，已有多种差异显示方法被详细描述。这里，我们描述了一种改良的RNA 随机引物触发的 PCR 方 法（RNAarbitrarily primed PCR， RAP-PCR) , 主要涉及通过 罗 丹 明（rhod
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（二）
单病毒感染OST7-1细胞实验方法原理OST7-1 细胞来源于鼠 L929 细胞，能在细胞质中持续表达噬菌体 T7 RNA 聚合酶，因此，应用此细胞系无需用 vTF7-3 感染细胞。实验材料贴壁培养的单层 OST7-1 细胞含有 pT7 控制的外源基因的重组病毒储液试剂、试剂盒完全 MEM-2.5
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（一）
本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体T7 RNA聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先，将感兴趣的基因插入质粒中，使其位于T7 RNA聚合酶启动子（PT7）的控制下。在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA聚合酶转录。这种转染方案适用于分析的目的，因为不需要构建新的重组病毒，所以比较简单。对于大规
T7－RNA聚合酶/启动子表达实验
实验材料 载体试剂、试剂盒 氨苄青霉素卡那霉素pGP裂解缓冲液仪器、耗材 培养箱分光光度计离心机实验步骤 1. 将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中，转化一种标准大肠杆菌菌株，此菌株不应带有可指导T7 RNA聚合酶合成的质粒。转化物涂布于氨苄青霉素平皿，于37℃温育培养
T7－RNA聚合酶/启动子表达实验
基本方案 备选方案 备选方案2 实验材料 载体 试剂、
我国科学家发现RNA病毒聚合酶独特催化机制
RNA病毒包括SARS冠状病毒、高致病性流感病毒、埃博拉病毒、寨卡病毒等，在过去十五年间多次造成全球性影响，对人类健康构成严重威胁，而针对RNA病毒的药物和疫苗目前严重匮乏。聚合酶作为RNA病毒所必需的复制酶，在病毒RNA基因组复制过程中发挥核心作用，深入了解其催化机制，将为有效应对RNA病毒提
我国科学家发现RNA病毒聚合酶独特催化机制
RNA病毒包括SARS冠状病毒、高致病性流感病毒、埃博拉病毒、寨卡病毒等，在过去十五年间多次造成全球性影响，对人类健康构成严重威胁，而针对RNA病毒的药物和疫苗目前严重匮乏。聚合酶作为RNA病毒所必需的复制酶，在病毒RNA基因组复制过程中发挥核心作用，深入了解其催化机制，将为有效应对RNA病毒提
荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验（一）
实验步骤 ##一、 从组织和培养细胞中分离RNA1.TRIzol试 剂（Invitrogen)。该试剂含有苯酚和硫氰酸盐化合物，操作时应穿实验服，戴手套，存放于 4°C 。2.氯仿。3.异丙醇。4.乙醇。5.焦炭酸二乙酯（DEPC) 处理的水。6.无DNA试剂盒（Ambion)。贮存于一 20°C
T7－RNA聚合酶/启动子表达实验1
在适宜的条件下，T7 RNA聚合酶/启动子系统表达的基因产物可占细胞总蛋白的25%以上，但多数情况下产量比这个比例要低得多。实验材料载体试剂、试剂盒氨苄青霉素卡那霉素pGP裂解缓冲液仪器、耗材培养箱分光光度计离心机实验步骤1. 将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中，转化
MCB：RNA聚合酶III调控巨噬细胞功能促进肿瘤存活
近日，来自英国的科学家在生物学期刊Molecular and Cellular Biology在线发表了他们关于RNA聚合酶III调控巨噬细胞功能的最新研究进展。 研究人员指出，肿瘤微环境中的炎症具有许多促癌症发展效应。特别是肿瘤相关巨噬细胞（TAM）能够产生许多细胞因子，促进恶性肿瘤细胞存活
荧光RNA随机引物触发的聚合酶链反应实验（二）
##六、从组织或培养细胞提取 RNARNA可以从各种来源的样本包括培养的细胞（例如神经元细胞、肝细胞等）和组织中分离得到（见 注 释 1) 。 mRNA 的 纯 化 对 FRAP-PCR 方法来说并不需要，因为mRNA 仅占细胞总 R N A 的 3 % 〜5 % (13)。因而在本章所描述
T7－RNA聚合酶/启动子表达实验2
实验材料蛋白质试剂、试剂盒氨基酸混合物M9培养基甲硫氨酸甲醇仪器、耗材荧光显微镜离心机分光光度计实验步骤1. 将含有待表达基因的片段亚克隆于pT7-5、pT-6或pT7-7中，转化一种标准大肠杆菌菌株，此菌株不应带有可指导T7 RNA聚合酶合成的质粒。转化物涂布于氨苄青霉素平皿，于37℃温育培养过
研究发现鞘磷脂能够激活丙型肝炎病毒RNA聚合酶
HCV聚合酶的鞘磷脂结合结构域 10月，病毒研究领域著名学术期刊Journal of Virology在线发表了中科院上海巴斯德所最新研究成果，该研究揭示了作为脂筏主要结构成分之一的鞘磷脂能够以基因型特异性的方式激活丙型肝炎病毒（HCV）1b亚型的RNA聚合酶，并且找到了其结合和激
Nature－Microbiology：流感病毒聚合酶调控RNA合成机制
流感病毒是危害全球公共卫生健康的重要病原之一，能在人群中引起大规模流行和季节性流感，每次暴发都会引起人类死亡并造成巨大的经济损失。流感病毒（Influenza virus）是分节段的负链RNA病毒（Segmented Negative-Sense RNA virus, sNSV），属于正粘病毒科
T7－RNA聚合酶/启动子表达实验3
实验材料噬菌体试剂、试剂盒PEGIPTG仪器、耗材培养箱离心机实验步骤1. 制备从M13噬菌体mGP1-2原种，加PEG溶液沉淀浓缩噬菌体。重悬噬菌体于M9培养基，滴定其滴度。 2. 将由“基本方案”步骤1所得的含T7 启动子表达质粒转化M13许可性大肠杆菌细胞，转化物涂布于氨苄青霉素平皿上，3
Nature：重磅！抑制RNA聚合酶III可延长寿命
在一项新的研究中，来自英国伦敦大学学院、肯特大学和荷兰格罗宁根大学的研究人员发现抑制一种所有动物都拥有的酶的活性可延长果蝇和线虫的寿命。相关研究结果于2017年10月29日在线发表在Nature期刊上，论文标题为“RNA polymerase III limits longevity downs
三域生物RNA聚合酶“最后一块拼图”被补上
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2024/3/518213.shtm2016年1月，回国不满半年的张余，在《中国科学院分子植物科学卓越创新中心人员遴选申请书》里写到：“申请人拟开展的工作是运用结构生物学研究叶绿体编码的RNA聚合酶（PEP）的工作机理和
抑制RNA聚合酶就能延长寿命！请看Nature最新文章
伦敦大学学院UCL领导的研究发现：果蝇和线虫的寿命可以通过对一种在动物身上很普遍的酶的活性进行限制而延长。相关研究于11月29日在线发表在Nature上。 这一文章揭示：酵母细胞的存活期、果蝇及线虫的寿命可以在机体成年后将RNA聚合酶III（Pol III）的活性略微削减而延长平均10%。
抑制RNA聚合酶就能延长寿命！请看Nature最新文章
这一文章揭示：酵母细胞的存活期、果蝇及线虫的寿命可以在机体成年后将RNA聚合酶III（Pol III）的活性略微削减而延长平均10%。 第一作者Danny Filer说：“我们已经发现了Pol III在成年果蝇及线虫中的一个基本作用：它的活动对干细胞功能、肠道健康和动物的生存产生了负面影响。当