北京大学Nature子刊发表蛋白质特异标记新成果

铜离子催化的叠氮—炔基环加成反应是标记生物大分子的重要手段。然而,由于一价铜离子的生物毒性,这类反应通常难以应用于活细胞内部标记。北京大学化学与分子工程学院陈鹏课题组最近在《自然—通讯》在线发表了题为“Biocompatible click chemistry enabled compartment-specific pH measurement inside E. coli”的研究论文(Nat. Commun. 2014,doi:10.1038/ncomms5981),利用铜催化的点击化学反应对大肠杆菌胞质内的蛋白质进行了特异标记。该工作被美国化学会官方杂志“C&E News”进行了报道。 大肠杆菌是一种典型的革兰氏阴性细菌,由外膜和内膜将细菌体分隔为膜间质和胞质两部分。陈鹏课题组之前的研究工作表明,铜催化的点击化学反应可以对膜间质区域的蛋白质进行特异标记(Angew. Chem. Int. Ed. 2012,......阅读全文

单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...2

单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和生物素标记)(3)移入透析袋中,在1000ml 0.01mol/L PH9.5碳酸盐缓冲液中,4℃透析过夜,更换三次缓冲液,注意避光。 (4)吸取上述醛化好的HRP溶液3ml,加入5mg IgG的碳酸盐缓冲液1ml,室温轻搅2-3小时,避光;加入5m

单克隆抗体的标记(酶标记、荧光素标记、同位素标记和...1

目前动物用单抗,在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用,大多以诊断试剂(盒)的形式提供,其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。 一、酶标记 1、辣根过氧化物酶(HRP)标记 辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖

生化与细胞所发现人胞质ProX编校误氨基酰tRNAPro的机理

  近日,英国《生物化学杂志》在线发表了中科院上海生命科学研究院生化与细胞所题为Human cytoplasmic ProX edits mischarged tRNAPro with amino acid but not tRNA specificity的最新研究成果,报道了人胞质ProX

抗肝细胞胞质1型抗体的适应症及临床意义

  适应证  进行抗肝细胞胞质1型抗体检测的指征有:①黄疸、发热、皮疹、关节炎等各种全身症状。②肝功能异常:转氨酶和胆红素水平较高。③黄疸、纳差、腹胀等病毒性肝炎症状。④呕血和(或)黑便等失代偿期肝硬化,肝衰竭。  临床意义  抗LC1抗体为AIH-Ⅱ型的血清特异性抗体,阳性率为56%~72%。在临

紫外可见分光光度法检测通过光催化降解的芳香标记物

用 Agilent Cary 60 紫外-可见分光光度法检测通过光催化降解的芳香标记物 作者 Fyfe, DJ* 和 **Dong, XW *Fyfe Science, West Lakes Shore, SA 5020, Australia **School of Chemi

科研人员利用可见光催化破解蛋白质标记选择性瓶颈

  近日,中国科学院上海有机化学研究所研究团队等,在生物正交标记技术领域取得进展。研究团队发展出可见光驱动的酮基自由基偶联新策略,在活细胞层面实现了蛋白质的原子级精度标记与交联。该方法通过可见光催化,高效生成稳定的二芳基酮自由基,有效规避了传统紫外激发技术因高能光照导致的选择性差、副反应多、背景干扰

cell:细菌的脂多糖是如何进入胞浆激活天然免疫系统的

  在天然免疫反应过程中,宿主的免疫细胞可以通过多种机制识别外源微生物信号,其中包括位于细胞膜表面的Toll样受体,这类受体能够识别胞外的微生物组分,比如LPS。另外还有一些存在于胞浆中的受体,它们能够特异性识别入侵细胞内部的微生物成分。此前研究发现LPS如果进入胞浆中,则能够引发caspase-1

RNA标记

RNA labeling (Amersham Pharmacia)For the generation of radiolabelled, single stranded RNA for use as hybridization probes  32P-pCp 3' End-labeling

DNA标记

DNA标记(主要内容如下)  DNA Labeling by Nick Translation  Random Primed Labeling  End-Labeling  Purification of Labeled DNA  Non-isotopic Labeling  OthersDNA L

RNA标记

RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求: 1.  操作简单,灵敏度高 2.  不影响碱基配对的特异性 3.  不影响RN

分子标记

内容:一、遗传标记 二、DNA分子标记 三、染色体原位杂交 四、DNA分子标记的应用 长期以来,植物育种中选择都是基于植株的表型性状进行的,当性状的遗传基础较为简单或即使较为复杂但表现加性基因遗传效应时,表型选择是有效的。但水稻的许多重要农艺性状为数量性状,如产量等;或多基因控制的质量性状,如抗性等

基于细菌纤维素的高性能纳米纤维固体酸催化剂

  由于具有安全、绿色、腐蚀性小、易于回收等诸多优点,固体酸催化剂(SACs)逐渐取代传统液体酸催化剂,在各类化工生产中发挥着重要作用。目前固体酸催化成为酸催化领域的重要研究方向,受到研究人员的广泛关注。传统的SACs存在酸密度低、稳定性差、成本较高及催化性能有待提高等缺点。近年来,研究人员相继开发

质谱技术鉴定放射性同位素标记

为了更直观快速地锁定代谢产物,获取更多的代谢产物结构信息,人们引入了放射性同位素标记鉴定。该法是寻找、鉴定代谢产物非常直观有效的方法,适用于所有有机化合物的分析,其常用方法分为2类,一类是直接标记,另一类是间接标记。放射性同位素直接标记是在进行代谢反应前对所研究化合物进行放射性同位素标记,药物经代谢

气单胞菌属与邻单胞菌属

  (一)气单胞菌属  气单胞菌属广泛分布于自然界,可从水源、土壤以及人的粪便中分离。本属细菌有的种可引起人类腹泻等多种感染。  1.生物学特性  (1)形态染色:革兰阴性短杆菌,大小为(1~4)μm×(0.1~1)/μm,菌体两端钝圆,单极鞭毛,运动极为活泼(除杀鲑气单胞菌外)。无芽胞,有窄的荚膜

杀虫真菌侵染附着胞分化形成的表观遗传机制及调控通路

  3月26日,中国科学院分子植物科学卓越创新中心昆虫发育与进化生物学重点实验室王四宝研究组与中国科学院上海营养与健康研究所魏刚研究组合作在国际学术期刊《科学进展》(Science Advances)上在线发表了题为Coordinated regulation of infection-relate

细菌胞浆内钙离子浓度荧光(Fura2)检测试剂盒使用说明

细菌胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途 细菌胞浆内钙离子浓度荧光(Fura-2)检测试剂是一种旨在通过胞浆钙离子特异性荧光探针Fura-2-AM,与钙离子结合后,其荧光强度显著增强,在荧光酶标仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值,来测定细菌胞浆总钙离子浓度

揭秘脑神经元线粒体与胞质之间钙瞬变的概率性耦合

  Nature Communications在线发表了北京大学分子医学研究所程和平团队和纽约大学医学院甘文标团队的合作论文“Brain Activity Regulates Loose Coupling between Mitochondrial and Cytosolic Ca2+ Transi

合适的小鼠胚胎干细胞胞质分裂阻断微核试验CBMn分析

实验概要观察表明,加入细胞松弛素-B到小鼠胚胎干细胞(mESC)的培养诱导细胞凋亡作CBMn分析。另一方面,加入 cyt-B是(CBMn)技术的最关键的部分。因此,改变传统CBMn分析方法是必要的。在本实验中,我们试图解决这个问题。研究表明,CBMn可作为一个可靠的工具用于胚胎干细胞研究,特

胞化学基础​氢键

氢原子与电负性大的原子X以共价键结合,若与电负性大、半径小的原子Y(O F N等)接近,在X与Y之间以氢为媒介,生成X-H…Y形式的一种特殊的分子间或分子内相互作用,称为氢键。[X与Y可以是同一种类分子,如水分子之间的氢键;也可以是不同种类分子,如一水合氨分子(NH3·H2O)之间的氢键]。

胞外转录反应

实验概要RNA聚合酶由一条多胜肽  (polypeptides)所构成,其在进行转录反应时所须辨认的启动子长度仅20bp左右,而且转录起始位置非常明确,转录效能良好,成了目前进行胞外转录反应时的最佳选择。要进行胞外转录反应时,仅需将目标基因次选殖   (subclone)至带有SP6,T3或T7启动

铜绿假单胞菌

一、细菌的传播与致病    假单胞菌普遍存在,而在潮湿环境尤甚。铜绿假单胞菌是存在于人类中最常见的一种假单胞菌,它偶尔可在腋下和肛门生殖道周围的正常皮肤,但除非给服抗生素,在粪中甚为罕见。该菌通常伴随毒力较强的细菌存在于病灶中,但偶尔也可单独引起暴露于外部的组织感染.假单胞菌感染通常发生于医院内。洗

免疫标记技术常用的标记物介绍

  常用的标记物有荧光素、酶、放射性核素及胶体金等。免疫标记技术具有快速、定性或定量甚至定位的特点,是应用最广泛的免疫学检测技术。  常用的免疫荧光素主要有:  1 .异硫氰酸荧光素 (FITC) ,最大吸收光谱为 490~495nm ,最大发射光谱为 520~530nm ,呈黄绿色荧光。  2 .

焦化脱硝市场持续打开-低质低价催化剂后患多

  ●《炼焦化学工业污染物排放标准》(GB 16171-2012)要求,从去年开始,所有炼焦炉排放污染物执行此新排放标准。为此,国内绝大部分炼焦企业在进行焦炉脱硝改造。按每条焦化生产线的烟气脱硝治理投资1500万元~3000万元来计算,全国焦化行业的脱硝装置投资约为300亿元~600亿元。  ●行业

李新建团队揭示衣康酸溶酶体增强机体抗菌免疫能力机制

  先天免疫是宿主细胞抵抗病毒、细菌等病原体入侵的防御机制,在此防御过程中溶酶体依赖于其内部的水解酶分解入侵的病原体,因此增加细胞内溶酶体的数量能够提高宿主的先天免疫防御能力。已有研究报道TFEB是调控溶酶体生物合成的关键转录因子,在非应激状态下TFEB依赖于蛋白激酶mTOR介导的磷酸化与锚定蛋白1

抗体标记方法

Biotinylation of Antibody ( Contributed by Nanci Donacki)  Antibody labeling (House Ear Institute)Labeling protocols using affinity markers.  Coupling

核酸探针标记

实验概要核酸探针根据核酸的性质,可分为DNA和RNA探针;根据是否使用放射性标记物与否,可分为放射性标记探针和非放射性标记探针;根据是否存在互补链,可分为单链和双链探针;根据放射性标记物掺入情况,可分为均匀标记和末端标记探针。实验原理分子生物研究中,最常用的探针即为双链DNA探针,它广泛应用于转基因

酶标记抗体

酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗体和酶标记SPA等。酶标记物质量的好坏直接关系到免疫酶技术的成功与否,因此被称为关键的试剂。酶标记物中最常用的是酶标记抗体,它是将酶与特异性抗体经适当方法连接而成。酶标记抗体的质量主要取决于纯度好、活性强及亲和力高的酶和抗体,其次要有良好的制备方法。目前,高质量的酶(

甘露糖结合凝集素的结构及其对细菌胞壁碳水化合物的...

甘露糖结合凝集素的结构及其对细菌胞壁碳水化合物的识别A.甘露糖结合凝集素由六个糖识别结构域(CRD)组成,年个结构域与汇集成束的胶原主茎以。—螺旋相连。  CRD端部识别细菌胞壁伸展出的糖链。  注意两个CRD识别结构之间需相隔45A;B.甘露糖结合凝集素CRD专一性识别端部糖分子第3位和第4位羟基

大肠杆菌胞质中工程化支架能聚集酶蛋白实现代谢途径

  Nature Chemical Biology在线发表了英国研究者的文章Engineered synthetic scaffolds for organizing proteins within the bacterial cytoplasm。研究者在细菌中构建了一种可以充满整个细胞质的细胞支架

施一公团队构建目前最精确的NPC胞质环结构模型

《科学》以封面专题的形式发表了 5 篇NPC论文,施一公团队的论文是其中一篇。 大约在12至16亿年前,原始的真核细胞出现。除细菌和蓝藻外,真核生物几乎涵盖了所有动物和植物,当然也包括人类。 在真核细胞的微观世界中,核孔复合物(nuclear pore complex, NPC)是其中