普渡大学转让12项RNAi相关ZL
普渡大学研究基金会日前宣布,印度的一家叫做Kylin的制药企业获得了使用该基金会超过12项RNAi相关ZL的使用权。 Kylin公司已经从印度投资集团IN-vivo Ventures等机构获得了项目启动资金。该公司最初机会主要集中力量开发癌症药物,并且之后计划开发病毒性疾病如艾滋病药物。 普渡基金会表示,转让给Kylin公司的pRNA技术能够用于向特定基因传递靶向的RNA治疗性药物。 这些ZL技术是由普渡大学的前华裔教授郭沛轩(Peixuan Guo,音译)研发出来的。郭教授现在是美国辛辛那提州大学纳米医学生物纳米技术中心的主管。郭教授还是Kylin的其中一名缔造者,并且是该公司科学顾问团的主席。......阅读全文
哺乳动物细胞的RNAi技术策略(1)
目前RNAi技术已经进入了生物科学研究的许多领域,成为了一种主要的生物学研究工具,发展得相当迅速,并受到了此次诺贝尔奖评审委员会的青睐,获得2006年诺贝尔奖医学/生理奖。然而这一才历经十个年头的技术依然对于许多研究人员来说还是很陌生的,以下是有关 i技术在哺乳动物细胞中应用的具体设计策略,主要
哺乳动物细胞的RNAi技术策略(2)
1.化学合成尽管化学合成是最贵的方法,但是却是最方便的――研究人员几乎不需要做什么工作。包括Ambion和Qiagen公司都可以根据用户要求提供高质量的化学合成si 。主要的缺点包括价格高,定制周期长,特别是有特殊需求的。由于价格比其他方法高,为一个基因合成3―4对si s 的成本就更高了,
RNAi技术在功能基因组中的应用
在功能基因组研究中,需要对特定基因进行功能丧失或降低突变,以确定其功能。由于RNAi具有高度的序列专一性,可以特异地使特定基因沉默,获得功能丧失或降低突变,因此RNAi可以作为一种强有力的研究工具,用于功能基因组的研究。将功能未知的基因的编码区(外显子)或启动子区,以反向重复的方式由同一启动子控制表
RNAi的实验原理和操作实用技术(3)
3.DEAE-葡聚糖和polybrene带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。两种试剂都已成功用于转染。DEAE-葡聚糖仅限于瞬时转染。4.机械法转染技术也包括使用机械的方法,
RNAi的实验原理和操作实用技术(2)
2.体外转录以DNA Oligo为模版,通过体外转录合成siRNAs,成本相对化学合成法而言比较低,而且能够比化学合成法更快的得到siRNAs。不足之处是实验的规模受到限制,虽然一次体外转录合成能提供足够做数百次转染的siRNAs,但是反应规模和量始终有一定的限制。而且和化学合成相比,还是需要占
哺乳动物细胞的RNAi技术策略(3)
5. si 表达框架si 表达框架(si expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的si 表达模版,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。这个方法最早是由Castanotto和其同事(5)采用,包括一个 pol III启动子,一段发夹结构si ,一个
印度发布新的生物技术战略
印度启动了一项全国性的生物技术战略,集中力量发掘生物技术长期有益于农业、卫生和环境方面的潜力。 印度新的战略将强化研究与教育 这一战略由印度科学部长Kapil Sibal在11月13日发布,其中包括让生物技术产值在2012年达到70亿美元这一目标,以及改革生物技术教育体制来创建全球性的教育与
RNAi-实验介绍
1. RNAi 介绍 RNA 干扰(RNAi:RNA interference)是由诺贝尔生理学/医学奖得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在线虫实验中发现的,2001 年 Elbashir 等人发现哺乳类的 siRNA 可以进行 RNAi 诱导
RNAi的功能
1.高通量的研究基因功能在后基因组时代,需要大规模高通量的研究基因的功能,由于RNAi能高效特异的阻断基因的表达,因而RNAi成为研究基因功能的很好的工具。研究者将线虫三号染色体上2232个基因对应的dsRNA合成出来,并注射到线虫性腺内,然后观察子代细胞分裂时出现的异常表型,结果发现了133个基因
RNAi的特征
①RNAi是转录后水平的基因沉默机制;②RNAi具有很高的特异性,只降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA;③RNAi抑制基因表达具有很高的效率,表型可以达到缺失突变体表型的程度,而且相对很少量的dsRNA分子(数量远远少于内源mRNA的数量)就能完全抑制相应基因的表达,是以催化放大的方式进行的;
RNAi-实验介绍
1. RNAi 介绍RNA 干扰(RNAi:RNA interference)是由诺贝尔生理学/医学奖得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在线虫实验中发现的,2001 年 Elbashir 等人发现哺乳类的 siRNA 可以进行 RNAi 诱导。这个方法与常规方
RNAi相关术语
1.RNAi :(RNA interference)RNA干扰一些小的双链RNA可以高效、特异的阻断体内特定基因表达,促使mRNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型,称为RNA干扰(RNA interference,RNAi ,也译作RNA干预或者干涉)。它也是体内抵御外在感染的一种重要保护机制
浙大科学家研究分子马达-解释病毒为何能稳定复制
一个组装中的病毒的示意图。绿色为外壳,淡黄色为DNA链,红色即分子马达。 也许你还对2016年诺贝尔化学奖的主角“分子机器”记忆犹新:3位科学家以人工方法创造了世界“最小机器”,而仿照的对象正是大自然中千姿百态的分子机器。在我们体内,就存在许多生物分子机器,它们把化学能转变为机械能,从而为
RNAi的机理与应用
RNAi 技术的机理与应用 关于 RNAi 技术 RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。 RNAi 受到追捧的
RNAi的机理与应用(一)
关于 RNAi 技术 RNA 干扰(RNA interference,RNAi)是指在进化过程中高度保守的、由双链 RNA( double-stranded RNA,dsRNA) 诱发的、同源 mRNA 高效特异性降解的现象。RNAi 受到追捧的原因主要有两个方面,一方面, RNAi 可以说是基
RNA干扰技术的特点
1.高效性:Elbashir等在研究中发现分别为25 nmol/L与100 nmol/L的起始双链RNA产生的结果是一样的,只是高浓度起始的更有效些。将双链RNA浓度降低到1.5 nmol/L时产生的基因沉默效果变化不大,只有当浓度降低到0.05 nmol/L时,沉默的效果才消失。Holen等也证实
RNA转录的技术特点
转录时,细胞通过碱基互补的原则来生成一条带有互补碱基的mRNA,通过它携带密码子到核糖体中可以实现蛋白质的合成。与DNA的复制相比,转录有很多相同或相似之处,亦有其自己的特点。转录中,一个基因会被读取并复制为mRNA。就是说,以特定的DNA片段作为模板,以DNA依赖的RNA聚合酶作为催化剂,合成前体
RNA干扰实验技术介绍
通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明;一个称为Dicer
Nature里程碑成果:RNAi遗传筛查新技术
基因发现领域出现了一个可与基因敲除小鼠一比高下的新竞争者。来自洛克菲勒大学的研究人员证实,相比于采用特殊培育遗传工程小鼠的传统方法有可能要花费数十年时间,一项利用RNA干扰(RNA interference)的新技术在数月内发现了导致表皮肿瘤生长的基因。研究人员在发表于8月14日《自然》(N
利用RNAi技术进行改良小麦面粉白度的研究
【目的】通过RNAi策略抑制小麦籽粒ppo的表达,获得籽粒PPO 酶活性低、白度高的转基因小麦新种质。 【研究意义】小麦面粉及其面食品的感官品质(尤其色度)是小麦磨粉品质和面食品的主要评价指标(如国标SB/T 10137-93),特别是鲜湿面条、馒头、饺子、烙饼等中式食品对白度的要求相
利用RNAi技术进行改良小麦面粉白度的研究
利用RNAi技术进行改良小麦面粉白度的研究 【目的】通过RNAi策略抑制小麦籽粒ppo的表达,获得籽粒PPO 酶活性低、白度高的转基因小麦新种质。 【研究意义】小麦面粉及其面食品的感官品质(尤其色度)是小麦磨粉品质和面食品的主要评价指标(如国标SB/T 10137-93),特别是鲜湿面条、馒
Alnylam发布临床数据,快速持久减少毒蛋白产生
近日,在阿姆斯特丹举行的阿尔茨海默病协会国际会议上,Alnylam公司报告了其RNAi疗法治疗阿尔茨海默病的1期临床试验的早期数据,结果显示,该RNAi疗法(ALN-APP)迅速且持久减少了患者大脑中与疾病相关的生物标志物淀粉样蛋白前体蛋白(APP)的产生。 这也是Alnylam首次发布向中枢
RNAi的机理与应用(二)
首先,外源的或体内产生的长双链 RNA(long double stranded RNA, dsRNA) 首先被 Dicer 酶降解为长 21 ~ 23bp (碱基对)长度的小分子双链 RNA (称为小干扰核酸, small interfering RNA, siRNA), 这是一个依赖 A
基因技术专题2
RNAi技术RNA干扰(RNA interference, RNAi)是近年来发现的研究生物体基因表达、调控与功能的一项崭新技术,它利用了由小干扰RNA(small interfering RNA, siRNA)引起的生物细胞内同源基因的特异性沉默(silencing)现象,其本质是siRNA与对应
RNAi的生物特性
RNAi抑制转座子活性两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关① 发现蠕虫mut-7 基因参与RNAi 并且与转座子的转座抑制有关;② 在果蝇中,参与RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。RNAi抵御病毒感染在拟南
RNAi的生物特性
RNAi抑制转座子活性两方面的证据提示转座子活性的抑制与siRNA有关① 发现蠕虫mut-7 基因参与RNAi 并且与转座子的转座抑制有关;② 在果蝇中,参与RNAi 的RNA 解螺旋酶Spindle-E 的突变将导致该基因引起的基因沉默的缺失,同时提高了反转录转座子活性。RNAi抵御病毒感染在拟南
RNAi的分子机制
通过生化和遗传学研究表明,RNA干扰包括起始阶段和效应阶段(inititation and effector steps)。在起始阶段,加入的小分子RNA被切割为21-23核苷酸长的小分子干扰RNA片段(small interfering RNAs, siRNAs)。证据表明;一个称为Dicer的酶
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰(RNA interference,RNAi)。siRNA(small interfering RNAs)就是这种短片断双链RNA分子,能够
RNAi基因沉默方法
大约在十年前,2006年诺贝尔生理/医学奖得主CraigMello和AndrewFire发现,他们能够将短RNA 分子插入到线虫中并沉默特定基因的表达。今天,研究人员也常常使用这种强大的RNA 干扰方法来研究哺乳动物系统中的特定基因功能。为了进行这种基因沉默实验,研究人员通常需要依赖化学合成的RNA
RNAi表达载体构建
近年来的研究表明,一些短片断的双链RNA可以通过促使特定基因的mRNA降解来高效、特异的阻断体内特定基因表达,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型, 称为RNA干扰(RNA interference,RNAi).siRNA(small interfering RNAs)就是这种短片断双链RNA分子,能够