RNAi两篇热点文章回顾

自从Andrew Fire 和Craig Mello于1998年提出了RNAi概念后,怎样将小RNA插入哺乳动物细胞成为萦绕科学家心头的一道难题。siRNA可以破坏特定基因的信号,为实现精致的以遗传为基础的治疗带来希望。面临的挑战包括寻找不涉及其他途径、绕过免疫反应,且穿过细胞膜的恰当机制。 面对活体生时,研究人员需要从细胞膜着手。Intradigm公司Martin Woodle说:“我们主要关心的是高电量核酸进入细胞到达有靶标活性的蛋白的困难。” 突破障碍 这篇热点文章证明了包装和运载siRNAs到达特异细胞靶标的各种方法。两种方法都可以通过对小鼠静脉注射实现离散的siRNA递送和沉默。2004年,Woodle与同事们设计和构建了一个纳米颗粒“集装箱(shipping container)”,利用吸附在聚乙二醇(PFG)远端的Arg-Gly-Asp (RGD)小肽配体,靶向表达整合素的肿瘤新生血管。这些纳米颗粒传递一组以......阅读全文

构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验

实验方法原理 实验材料 E.coli MC 1061 (Bio-Rad)硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液试剂、试剂盒 DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶(CIP)限制性内切核酸酶反应缓冲液 4dNTPTris·Cl培养基仪器、耗材 QIAquick 胶回收试剂盒质粒制备试剂盒DNA 合

肽适配体的亲和力成熟实验

实验材料质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒Taq 聚合酶10×缓冲液引物dATPdGTPdCTPdTTPMgCl2MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器30℃ 培养箱实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 制备

构建硫氧还蛋白肽适配体组合库实验

实验材料E.coli MC 1061 (Bio-Rad)硫氧还蛋白表达载体质粒DNA 洗脱液试剂、试剂盒DNA 聚合酶DNA 连接酶小牛肠碱性磷酸酶(CIP)限制性内切核酸酶反应缓冲液4dNTPTris·Cl培养基仪器、耗材QIAquick 胶回收试剂盒质粒制备试剂盒DNA 合成仪16℃ 和 95℃

用肽适配体正向分析细胞过程实验

实验方法原理 实验材料 用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒 完全极限(CM) 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材 30℃ 培养箱实验步骤 1. 用高效乙酸锂转化法将 50~100 ug 肽适配体库(在 pJM-2 或 pJM-3 中)转化酵母筛选株(106~107 转化株)。将转化株涂布到

肽适配体的亲和力成熟实验

实验方法原理 实验材料 质粒 DNA酵母株试剂、试剂盒 Taq 聚合酶10×缓冲液引物 dATPdGTP dCTPdTTPMgCl2 MnCl2完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板Xgal 平板仪器、耗材 PCR 管PCR 纯化柱自动热循环器 30℃ 培养箱实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「

用肽适配体正向分析细胞过程实验1

实验材料用于遗传学筛选的酵母株肽适配体库试剂、试剂盒完全极限(CM) 缺失成分液体培养基和平板仪器、耗材30℃ 培养箱实验步骤1. 用高效乙酸锂转化法将 50~100 ug 肽适配体库(在 pJM-2 或 pJM-3 中)转化酵母筛选株(106~107 转化株)。将转化株涂布到 10 cm Glu/

用肽适配体正向分析细胞过程实验2

辅助方案 肽适配体靶点的鉴定实验方法原理通过配对相互作用或捕获法鉴定的肽适配体的假定靶点应当通过遗传学测试进行验证,例如:1. 用免疫沉淀法确定体内适配体的相互作用;2. 通过上位(显)性分析以确定适配体在与靶蛋白相同的区域发挥功能;3. 比较由靶蛋白删除或过表达引起的表型与由适配体造成的表型。实验

利用纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术对药物输送纳米颗粒...

利用纳米颗粒跟踪分析(NTA)技术对药物输送纳米颗粒进行直接观察、测定大小和计数简介 纳米颗粒在药物输送中的应用持续迅猛发展。 纳米颗粒可提供优良的药代动力学特性、长效和缓释以及特定细胞、组织或器官的靶定。 可利用的能用于疾病治疗的新生物活性化合物的发现速度在不断递减,这推动了人们对纳米颗粒

纳米颗粒跟踪分析技术对药物输送纳米颗粒的观察

纳米颗粒在药物输送中的应用持续迅猛发展。 纳米颗粒可提供优良的药代动力学特性、长效和缓释以及特定细胞、组织或器官的靶定。 可利用的能用于疾病治疗的新生物活性化合物的发现速度在不断递减,这推动了人们对纳米颗粒药物输送的关注。 每年进入市场的新药越来越少,利用纳米颗粒的多用途和多功能结构进行药物输送的兴

RNAi两篇热点文章回顾

自从Andrew Fire 和Craig Mello于1998年提出了RNAi概念后,怎样将小RNA插入哺乳动物细胞成为萦绕科学家心头的一道难题。siRNA可以破坏特定基因的信号,为实现精致的以遗传为基础的治疗带来希望。面临的挑战包括寻找不涉及其他途径、绕过免疫反应,且穿过细胞膜的恰当机制。 面对

基于多肽的脑靶向纳米传递系统的最新成果

  10月11日,国际学术期刊Nature Communications(《自然-通讯》)在线发表了中国科学院广州生物医药与健康研究院巫林平课题组和英国纽卡斯尔大学教授Moein Moghimi研究团队共同合作,基于多肽的脑靶向纳米传递系统的最新成果“Crossing the blood-brain

纳米颗粒的分散技术

    颗粒分散是指粉体颗粒在液相介质中分离散开并在整个液相中均匀颁的过程,根据分散方法的不同,可分为以下几种:一、机械搅拌分散主要借助外佛罗里达剪切力或撞击力等机械能,使纳米粒子在介质中充分分散,通过对分散体系施加机械力,引起体系内物质的物理、化学性质变化以及伴随的一系列化学反应来达到分散目的,但

纳米颗粒识别血管斑块

  现行医疗技术中,医生只能识别由于血小板聚集而变窄的血管。方法是从手臂、腹股沟或颈部的血管处开一个切口植入导管,从导管注入染色剂,使X射线显示狭窄部位。日前,由凯斯西储大学科学家率领的一组研究人员开发了一种多功能纳米颗粒,能使磁共振成像(MRI)定位动脉粥样硬化引起的血管斑块。此项技术向无创性

纳米颗粒的分散技术

颗粒分散是指粉体颗粒在液相介质中分离散开并在整个液相中均匀颁的过程,根据分散方法的不同,可分为以下几种:一、机械搅拌分散主要借助外佛罗里达剪切力或撞击力等机械能,使纳米粒子在介质中充分分散,通过对分散体系施加机械力,引起体系内物质的物理、化学性质变化以及伴随的一系列化学反应来达到分散目的,但是研磨过

RNAi

1995年,康乃尔大学的Su Guo博士在试图阻断秀丽新小杆线虫(C. elegans)中的par-1基因时,发现了一个意想不到的现象。她们本是利用反义RNA技术特异性地阻断上述基因的表达,而同时在对照实验中给线虫注射正义RNA(sense RNA)以期观察到基因表达的增强。但得到的结果是二者都同样

肽纳米载体靶向治疗心脏病

  肽在治疗心血管等疾病中具有高度选择性和有效性,但目前最大的挑战是无法提供靶向心脏的非侵入式方法。这期封面文章,研究人员通过猪建立的动物模型证明,生物相容性和可生物降解的磷酸钙纳米颗粒,可作为载体,将肽快速从肺部转移到血液和心肌组织。只需简单吸入,这些肽纳米载体为心力衰竭等疾病提供了一种开创性治疗

配体配体相互作用特点

中文名称配体-配体相互作用英文名称ligand-ligand interaction定  义泛指不同配体之间的相互作用。如受体上有多个配体结合位点时,一个配体与受体的结合可能影响另一个配体与受体的结合。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)

研究人员揭示配体金纳米团簇生长机制

  中科院上海应用物理研究所高嶷课题组与美国内布拉斯加大学林肯分校教授曾晓成合作,提出了一个用于解释配体金纳米团簇的结构稳定性及其生长机制的普适模型。相关研究成果日前发表于《自然—通讯》。  长期以来,配体金纳米团簇因其独特的结构和物理化学性质以及在催化、纳米技术及生物医学等领域广泛的应用前景得到了

开发肽siRNA偶联物,向肝外组织定向递送siRNA疗法!

  此次合作,将超越肝脏范畴,为多种肝外疾病开启siRNA治疗机会。  行业领先的RNAi治疗公司Alnylam与行业领先的肽基药物发现公司PeptiDream近日宣布了一项许可及合作协议,发现和开发肽-siRNA偶联药物,创造多种机会,为肝外组织递送RNAi疗法。通过这一合作,2家公司将合作选择和

利用双杂交系统相互作用阱/筛选特定蛋白肽适配体实验

实验材料DNA酵母株试剂、试剂盒PCR 引物聚乙二醇甘油存储液Tris·ClX-gal 平板完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板仪器、耗材30℃ 和 42℃ 培养箱或水浴实验步骤实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其他」1. 使用标准的亚克隆技术,将编码诱饵蛋白的 DNA 插入 PEG20

利用双杂交系统相互作用阱/筛选特定蛋白的肽适配体...

利用双杂交系统相互作用阱/筛选特定蛋白的肽适配体实验实验方法原理 实验材料 DNA酵母株试剂、试剂盒 PCR 引物聚乙二醇甘油存储液Tris·ClX-gal 平板完全极限(CM) 缺失成分培养基和平板仪器、耗材 30℃ 和 42℃ 培养箱或水浴实验步骤 实验所需「材料」、「试剂」、「耗材」具体见「其

基于纳米颗粒的疫苗平台

  科研人员报告了一种基于纳米颗粒的疫苗平台,它能够带来针对多种病原体的免疫力。对正在进化的病原体和突然的疾病暴发的有效响应需要安全而有效的疫苗,能够迅速且在床边按需生产。Daniel Anderson及其同事开发了一个基于纳米颗粒的疫苗平台,这些纳米颗粒是由大的重复分支的分子组成,它们聚集并俘获了

纳米颗粒如何加速医学研究?

  近年来,科学家们在很多研究中都利用纳米颗粒来进行疾病的治疗和诊断等,比如有研究人员就利用纳米颗粒开发出了能检测胰腺癌的新型生物传感器;那么近期纳米颗粒还在哪些方面推动了医学研究呢?本文中,小编对相关研究进行了整理,分享给大家!  【1】Nat Biotechnol:重磅!科学家开发出能携带CRI

定点“爆破”的纳米颗粒药物

  以纳米药物制药剂为基础的纳米微粒药物输送技术是当今药学的重要发展方向之一。虽然纳米技术问世不久,但在医药领域,致力于分子水平上的研究已有较长历史。本文介绍利用纳米颗粒为载体实现对药物的选择性释放,用于肺肿瘤的治疗。  纳米粒子作为载体的药物可以用来防治肺癌:来自德国的NIM和

配体配体相互作用的功能

中文名称配体-配体相互作用英文名称ligand-ligand interaction定  义泛指不同配体之间的相互作用。如受体上有多个配体结合位点时,一个配体与受体的结合可能影响另一个配体与受体的结合。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),信号转导(二级学科)

美让拟肽自我组装成纳米绳子

  据美国物理学家组织网1月18日报道,美国科学家在最新一期的《美国化学学会会刊》上表示,他们“诱导”聚合物自我编织成了束状的纳米绳子,该纳米绳基本达到了生物材料所具有的复杂性和功能,且非常坚固,足以应付受热和干燥等恶劣环境,这是科学家在研制具备天然材料复杂性和功能的自组装纳米材料道路

RNAi-protocol

 siRNA protocolsOur current strategy with siRNA is to synthesis relatively small amounts enzymatically and use these to test for efficiency by western

RNAi总结

RNA干涉(RNAi)是指双链RNA分子使基因表达沉寂的现象,是在线虫中发现的,在 1998年的一篇Nature论文中被公诸于众。过去几年中,科研工作者已明确转录后基因沉默现象普遍存在于动、植物中,在机体防御病毒入侵和转座子沉默效应中起着重要作用。近年来的研究表明,将与mRNA对应的正义RNA和反义

RNAi技术

 DNA芯片检测siRNA专一性  长片断的双链RNA  (dsRNA) 导入例如植物,真菌,果蝇,线虫等生物的细胞中会引发同源mRNA的降解——这就是所谓的RNA interference  (RNAi)。RNAi分两个步骤,首先是长片断双链dsRNAs被核酶Dicer切割成21—25个碱基的sm

单颗粒ICPMS应用:西红柿吸收金纳米颗粒

伴随着工程纳米材料在各个不同产品和过程的使用不断增加,人们开始对纳米颗粒的释放对环境和人类健康造成的影响产生了担心。要研究纳米颗粒对环境的影响,就必须探索纳米颗粒如何通过在水和土壤中的迁徙而被植物吸收的。如果纳米颗粒最终为食品作物所吸收,那么人类就直接面临ENPs释放造成的影响。 这项研究工作的目标