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流式细胞仪和流式细胞术指南篇1

Jay Haron Ph. D.jay dot haron at gmail dot comBD Biosciences, San Diego, United States引用实验材料和方法 从1968年 zui早的商品化 流式细胞术(FC) 和荧光激活细胞分类术(FACS)诞生以来, 它们已得到大大改进。但要成为实验室广泛接受的技术,除成本因素外,还存在不少障碍。技术上的问题主要是细胞内低丰度分子的检测,缺少“通用”细胞通透物 质,细胞自发荧光的干扰效应,荧光分子间发射光谱的重叠,以及缺少可识别目标分子的试剂。特别是对于细胞分拣来说,由于液滴的形成收集、分拣细胞重分析或 培养前的稀释,以及为获得足够数量的可用细胞需要的时间延误的原因,还存在细胞存活问题。zui后,特别是在处理低丰度对象时,数据分析也是很棘手的。有一篇关于 流式细胞仪理论的不错的综述,介绍了流式细胞仪的操作语言。此外,还有另一篇文章涵盖了提供流式细胞......阅读全文

单克隆抗体的制备(三)

3.2 免 疫 B 细胞的制备血清效价有意义(>1 : 1000)的免疫后动物可以提供抗原反应性B 细胞用于融合。这些细胞可以从脾脏或淋巴结中获得。动物用吸人CO2 处死,在无菌操作下取组织,放 在 4°C无血清培养基中,最多可放lh 。用慑子或针头轻轻打开组织脾脏或淋巴结的外包膜获得

师兄攻略:流式细胞术第一期

流式细胞仪和流式细胞术指南篇历史从 1968 年最早的商品化流式细胞术 (FC) 和荧光激活细胞分类术 (FACS) 诞生以来, 它们已得到大大改进。但要成为实验室广泛接受的技术,除成本因素外,还存在不少障碍。技术上的问题主要是细胞内低丰度分子的检测,缺少「通用」细胞通透物质,细胞自发荧光的干扰效应

市场迎新 政策加持 研发突破 CAR-T细胞治疗

  2017年8月,全球迎来首款上市的CAR-T疗法,美国FDA批准诺华的Kymriah用于25岁以下复发难治性B淋巴细胞急性白血病(B-ALL)患者。这是一个历史性的里程碑事件。紧接着的10月,吉利德/Kite Pharma的Yescarta获FDA批准,用于治疗复发难治性大B细胞淋巴瘤的成年患者

生物医药回顾 发展与反思并存

  2017年8月,全球迎来首款上市的CAR-T疗法,美国FDA批准诺华的Kymriah用于25岁以下复发难治性B淋巴细胞急性白血病(B-ALL)患者。这是一个历史性的里程碑事件。紧接着的10月,吉利德/Kite Pharma的Yescarta获FDA批准,用于治疗复发难治性大B细胞淋巴瘤的成年患者

许中伟:异体CAR-T是中国领先世界的一个机会

  诺华CAR-T疗法CTL-019获得FDA肿瘤专家的全票推荐批准,意味着这种革命性的肿瘤治疗手段基本得到了国际最严格的药监机构的认可,距离正式获批上市仅一步之遥。目前,CAR-T正以前所未有的热度席卷全球,引起制药公司、投资人、临床医生和患者的广泛关注。  毫无疑问,CTL-019的成功会让诺华

许中伟:异体CAR-T是中国领先世界的一个机会

  诺华CAR-T疗法CTL-019获得FDA肿瘤专家的全票推荐批准,意味着这种革命性的肿瘤治疗手段基本得到了国际最严格的药监机构的认可,距离正式获批上市仅一步之遥。目前,CAR-T正以前所未有的热度席卷全球,引起制药公司、投资人、临床医生和患者的广泛关注。   毫无疑问,CTL-019的成功会让

异体CAR-T介绍

诺华CAR-T疗法CTL-019获得FDA肿瘤专家的全票推荐批准,意味着这种革命性的肿瘤治疗手段基本得到了国际最严格的药监机构的认可,距离正式获批上市仅一步之遥。目前,CAR-T正以前所未有的热度席卷全球,引起制药公司、投资人、临床医生和患者的广泛关注。毫无疑问,CTL-019的成功会让诺华、宾夕法

原发性血小板增多症的诊断与治疗

原发性血小板增多症(ET)是一种少见的血液病,发病率约为 0.4-2.5/100000 人 / 年,多见于 50-60 岁女性。过去十年,由于分子生物学、临床试验以及回顾性研究的发展,ET 的诊断和治疗方法经历了一次又一次的变化。来自英国的 Alimam 教授结合病例对 ET 的诊断与治疗进行了综述

尿液有形成分检查及镜检筛选标准的制定

作者:解放军总医院 丛玉隆教授尿液有形成分是指来自泌尿道,并以可见形式渗出、排出、脱落和浓缩结晶所形成的物质的总称;通过离、心方式得到的浓缩的尿有形成分称之为尿沉渣。尿液有形成分检查是一项经典的检验项目,它和理学检查、化学检查共同构成尿常规检查的全部内容,相辅相成、互相弥补和互相印证。但有形成分检查

尿液有形成分检查及镜检筛选标准的制定

尿液有形成分是指来自泌尿道,并以可见形式渗出、排出、脱落和浓缩结晶所形成的物质的总称;通过离、心方式得到的浓缩的尿有形成分称之为尿沉渣。尿液有形成分检查是一项经典的检验项目,它和理学检查、化学检查共同构成尿常规检查的全部内容,相辅相成、互相弥补和互相印证。但有形成分检查对于临床医生了解泌尿系统各个

血液肿瘤常用体内外模型总结&工具病毒使用指南

  血液肿瘤主要包括各类白血病、多发性骨髓瘤以及恶性淋巴瘤。急性白血病占常见恶性肿瘤的第八位,淋巴瘤也是在前十位,并且发病率逐年升高,多发性骨髓瘤的整个发病率在血液恶性肿瘤里面占10%。   血液肿瘤发病急,在传统的放疗、化疗、骨髓移植等治疗方式下,治疗周期长、费用高昂、过程痛苦,但治愈率却并不很

如何治疗白血病化疗后中性粒细胞缺乏伴感染

  中性粒细胞缺乏(粒缺)伴感染是白血病患者化疗后最常见、最严重的并发症之一。由于中性粒细胞低下,炎症的临床表现常不典型,也很难明确感染部位和病原菌,发热可能是唯一的临床征象。因此,需要临床医师迅速识别感染,并及时给予恰当、有效的抗菌药物治疗,以降低感染相关的死亡风险。  在《中国中性粒细胞缺乏伴发

ASCO | “中国声音”最新发布

   美国临床肿瘤学会年会 (ASCO) 是肿瘤领域规模最大、水平最高、最具权威性的国际性学术会议之一。2019ASCO年会以 "Caring for Every Patient, Learning from Every Patient" 为主题,汇聚数万世界专业的肿瘤专家、学者

immudex MHC右旋异构体产品

  immudex MHC右旋异构体产品   MHC-右旋糖酐是荧光标记的MHC多聚体,用于检测血液、脑脊髓液和组织切片中的抗原特异性T细胞。这些试剂用于基础研究、疫苗开发和细胞治疗等方面的抗gen e特异性T细胞的定量或分类,或用于免疫缺陷患者的免疫重建,如移植后。   我们提供优质的正负

BD最新款流式细胞仪,引领血液肿瘤临床检验新高度

  在近日召开的2014年东方检验医学学术会议上,BD(Becton, Dickinson and Company)公司下属BD生物科学业务在展台现场发布了最新款BD FACSCanto至尊版流式细胞仪。其将通过更优的激光配置,更精确的检验结果,更快速的检测速度,更便捷可靠的临床操作平台,再创流式技

权威更新2018年ASCO临床肿瘤年度进展!

  在过去的一年,针对超过16种肿瘤的31种新的治疗方法被美国食品药品监督局(FDA)批准上市。美国东部时间2018年1月30日,美国临床肿瘤学会(ASCO)公布去年肿瘤治疗领域进展。  CAR-T技术被提名为年度最重要的进展  美国临床肿瘤学会的专家提名2018年度最重要的进展为肿瘤免疫治疗——C

ASCO:T-DM1携手帕妥珠单抗再传佳讯

  早期乳腺癌的治疗目标是治愈。2019 St. Gallen共识指出,对于临床分期II-III期的HER2阳性乳腺癌患者,无论其是否适合接受乳腺肿瘤切除术,均应将新辅助治疗作为首选的初始治疗。并且,对于II期(淋巴结阳性)或III期HER2阳性乳腺癌患者,帕妥珠单抗(P)联合曲妥珠单抗(H)及化疗

两篇Cell共同揭秘热量限制为何能延缓衰老

  本周回顾,2017年国家自然科学基金申请项目评审结果公布,国家优青获得者等名单相继出炉,美国疾控中心表示仅4 种癌症可以有效筛查,ASCO更新肺癌治疗指南,药物、医疗器械临床试验报告造假可判5年,9月1日起施行,张锋又上头条了,免疫疗法关键靶点PD-L1竟有不为人知的“帮手”,热量限制为何能延缓

血液肿瘤常用体内外模型总结&工具病毒使用指南(二)

二、细胞实验效果不错,那动物实验怎么做?稳定性、重复性较好的动物模型可在肿瘤基础性研究和抗肿瘤药物筛选中发挥重要作用。血液肿瘤常用的动物模型主要有:I皮下移植瘤模型;II血液模型。皮下移植瘤模型较容易建立,易于动态观察肿瘤的生长状态。血液模型则一般以生存天数作为观察终点,用活体成像、病理切片、流式细

H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤材料无菌培养细胞生长液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml),75 GBq/mmol (约

3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

经验交流(0)实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤 材料 无菌 培养细胞 生长液 0.25% 粗制胰蛋白酶 D-PBSA 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml)

方案21.11 3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

            实验方法原理 细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。 实验步骤

肿瘤标志物助力癌症筛查

   根据世界卫生组织(WHO)2014年《世界癌症报告》,癌症已成为全世界人类首位致死原因,发病率与死亡率呈持续上升趋势。  面对严峻的肿瘤防治形势,肿瘤标志物在肿瘤早期诊断、治疗中的重要临床价值受到越来越多的认可,基于肿瘤标志物的癌症筛查、防癌体检已逐渐走入健康体检市场。  为优化健康体检套餐设

3H-胸腺嘧啶脱氧核苷的标记指数实验

实验方法原理细胞培养至适当密度,用1H -胸腺嘧啶脱氧核苷标记 30min,清洗后固定细胞,除去未掺入的前体物,准备同位素放射自显术。实验步骤材料无菌培养细胞生长液0.25% 粗制胰蛋白酶D-PBSA3H-胸腺嘧啶脱氧核苷,2.0MBq/ml (约 50uCi/ml),75 GBq/mmol (约

去甲变肾上腺素ELISA试剂盒使用说明(一)

前言说明儿茶酚胺类肾上腺素、去甲肾上腺素、多巴胺都是在肾上腺髓质、交感神经系统和脑中合成的。它们几乎影响所有的组织,并与其它激素和神经系统一起参与各种生理过程的调节。因为儿茶酚胺类物质以及它们的代谢产物变肾上腺素和去甲变肾上腺素在许多疾病中的分泌都会增加,因此对它们进行检测可用于这些疾病的诊断。在这

侵袭海绵窦垂体腺瘤的治疗进展

  垂体腺瘤是颅内常见的良性肿瘤,根据肿瘤有无功能,可分为功能型和无功能型垂体腺瘤;根据肿瘤生长方式,可分为侵袭性垂体腺瘤和非侵袭性垂体腺瘤,部分侵袭性垂体腺瘤可向鞍旁侵袭海绵窦;对于这部分累及海绵窦的垂体腺瘤,可表现为内分泌异常的症状或肿瘤占位效应所引起的症状,其对海绵窦的侵袭累及重要血管及神经是

遗传修饰(转基因)风险评估(二)

3. 慎重向环境释放未经事先批准的转基因植物是不能够释放到环境中去的。在欧洲,2001/18 号欧盟指令( 见注 7 ) 专门规定了慎重向环境中释放转基因植物。该指令涵盖了两种类型的环境释放: 实验释放 ( B 部分)和投放市场的商业释放( C 部分)( 见注 8) 。对于每个授权的 B 释

cDNA文库的构建和筛选

材料许多生物是疾病研究或探索使细胞和机体应对和存活于不同刺激下的分子适应机制的优良模型。 cDNA 文库的构建和随后目的基因的筛选可促使研究者发现在调节和响应某些外部特定环境压力中有重要作用,而在其他体系中可能不表达或者不存在的新基因。确定这些新基因的可读框,进一步分析其编码蛋白质的功能可以开创全新

降钙素原监测在感染性疾病诊治中的研究进展

由感染导致的脓毒症、脓毒症休克、多器官功能障碍综合征具有很高的致死率,治疗延迟将导致死亡率明显增加。降钙素原(PCT)是近十余年来应用于临床的一个指标,其在感染的诊断、治疗,尤其是细菌导致的重症感染的早期诊断与干预治疗中有重要价值。本文将从其发现、生化特点、病理生理功能、主要适应证、特殊人群中的应用

被高估还是被忽视?——肿瘤标志物在临床诊断中的价值

作者:中山大学孙逸仙纪念医院检验科  谢晓英 肿瘤标志物(tumor marker,TM)应用至今已有三十余年,早期、特异是所有人对“肿瘤标志物”的期待,然而现状是:TM由于其高度灵敏被广泛使用,却又由于其不够特异被人诟病,它到底被“滥用”了还是“忽视”了? 今天想聊一