我国科学家全面描绘DUX在小鼠胚胎基因组激活中的作用
2019年10月7日，来自同济大学的高绍荣教授研究团队在Cell Research杂志上在线发表了题为“Precise temporal regulation of Dux is important for embryodevelopment”的文章，对Dux在早期胚胎中的作用做了全面描绘。 该团队通过设计直接靶向所有Dux重复序列区域的小向导RNA（sgRNA）得到的Dux敲除小鼠。由于Dux在早期2-细胞胚胎瞬时表达及Dux敲除胚胎的发育走向不同，该团队通过严格的单细胞RNA测序技术发现，与正常胚胎相比，Dux敲除胚胎在2-细胞的早中晚三个时期都表现出MERVL和一定数量合子基因组激活（ZGA）基因的表达量下降。但是这些在Dux敲除2-细胞胚胎早期和中期下降的ZGA基因在2-细胞晚期都达到了与正常胚胎相当的表达量；Dux敲除晚期2-细胞胚胎中的部分ZGA基因与正常胚胎相比表达量较低，但是与2-细胞胚胎早期相比表达量是上......阅读全文
分离小鼠胚胎实验
实验方法原理 胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期，三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟，称神经沟，沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合，致使神经演变为纵贯胚体的神经管。神经管和神经
分离小鼠胚胎实验
实验方法原理 无菌条件下切除孕鼠（已知怀孕时间）子宫，分离胚胎。实验材料 DBSS试剂、试剂盒 70%乙醇仪器、耗材 培养皿尖镊子尖剪刀超净工作台本生灯实验步骤 1. 交配。将分笼的雄鼠和雌鼠合笼进行交配，雌鼠 3 天后可进入动情期，此时交配的成功率最高。这一过程可以有计划地进行，使胚胎在适宜的时间
分离小鼠胚胎实验
分离小鼠胚胎可以用于：（1）体外培养小鼠胚胎，摸索适宜培养条件。（2）使用胚胎进行发育生物学研究。实验方法原理胚胎是怀孕最初两个月内的幼体。囊胚、胚的早期发育和胚胎发育是一个连续过程。在体节时期，三个胚层都发生了变化。外胚层在背部中线凹陷成沟，称神经沟，沟的两岸称神经脊。神经脊逐渐接近、愈合，致使神
小鼠胚胎干细胞的培养
实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺（200mM） MEM NEAA（10mM） HEPES（1M） β-巯基乙醇（55Mm） 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮（20μM） 腐
小鼠胚胎干细胞的培养
完全培养基: 高糖DMEM (GIBCO 12430); 15%胎牛血清(BIOCHROM S0615); 0.1 mmol/L非必需氨基酸(GIBCO 11140-050); 2 mmol/L谷氨酰胺(GIBCO 25030); 0.1 mmol/L β-巯基乙醇(GIBCO 21985); 1
小鼠胚胎首次在太空中生长
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2023/10/511300.shtm近日，日本山梨大学的研究人员首次在国际空间站(ISS)上成功培养了小鼠胚胎，以探索人类在太空怀孕是否安全。相关研究结果发表于《交叉科学》。 ?小鼠胚胎从国际空间站返回后的
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
原代细胞培养可应用于：（1）分子生物学；（2）细胞生物学；（3）遗传学；（4）免疫学；（5）肿瘤学；（6）病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养，是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官，在体外培养，直到第一次传代为止。这种培养，首先用无菌操作的方法，从动物体内取出所需的组织（或器官），经胰酶消化，
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养，是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官，在体外培养，直到第一次传代为止。这种培养，首先用无菌操作的方法，从动物
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养，是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官，在体外培养，直到第一次传代为止。这种培养，首先用无菌操作的方法，从动物
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存
小鼠胚胎干细胞培养实验
实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存在的情况下扩增（第4步）并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃，5％CO2，100％湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化，也可以采用低浓度的RA进
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择（第3步），在有bFGF存
炎症对小鼠雄性胚胎的致死率更低？
根据本周《自然》在线发表的一篇论文Female-biased embryonic death from inflammation induced by genomic instability，睾酮或能预防炎症的有害影响，提高雄性小鼠胚胎的存活率。给怀孕小鼠注射布洛芬能够复制睾酮的这种保护作用，不
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基 细胞复苏 冻存细胞 明胶包被 细胞传代 体外分化 培养基 包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片） 体外分化方法 注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎
关于小鼠胚胎干细胞的研究情况
自1981年Evans和Kaufman首次成功分离小鼠ES细胞，国内外研究人员已在仓鼠、大鼠、兔、猪、牛、绵羊、山羊、水貂、恒河猴、美洲长尾猴以及人类都分离获得了ES细胞，而且已经证明小鼠ES细胞可以分化为心肌细胞、造血细胞、卵黄囊细胞、骨髓细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、内皮细
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤
1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基：包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片） 体外分化方法 注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的pr
着床前小鼠胚胎线粒体功能障碍胚胎与胎盘发育的影响
实验概要本研究利用线粒体功能高度被抑制的体外胚胎模型，直接研究线粒体功能损伤对着床前后胚胎以及胎盘发育的影响。实验步骤1. 胚胎培养基用含4mg/ml BSA的MOPS-G1工作液收集受精卵。胚胎培养液分对照组培养液与试验组培养液(G1.2/G2.2，注：G1.2为对照组培养液；G2.2为试验组
人胚胎干细胞系:衍生与培养—小鼠胚胎饲养细胞的制备
实验步骤2.3 小 鼠 胚 胎 饲 养 细 胞（MEF) 的 制 备最广泛地用于支持 h E S 的伺养层细胞来自小鼠胚胎 [丁]^〇 1113 〇 1161&1,， 1998;Reu-binoffetal. ， 2000]，如小鼠胚胎饲养细胞（MEFs) ，尽管它们可能是最原始的间叶细胞的前体细胞
小鼠干细胞可在体外形成“类胚胎”结构
两个“类囊胚” 图片来源：《自然》杂志官网 一个欧洲科学家团队3日在英国《自然》杂志发表医学论文称，他们仅利用小鼠干细胞，在培养皿中培育出了类似早期胚胎的结构。其为研究人员提供了一个关于早期发育的细胞培养模型，有助于阐明支撑这一重要生命阶段的关键过程。 哺乳动物的受精卵经过卵
小鼠胚胎成纤维细胞传代培养
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞传代培养主要试剂0.05%Trypsin、细胞基础培养液、DPBS主要设备100 mm培养皿、15 mL离心管、倒置显微镜实验步骤（1）预先37℃温热细胞基础培养液及0.05%Trypsin。（2）用枪头吸弃培养皿中的培养液，并用DPBS冲洗一遍，然后加入2 mL 0.05
小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)原代培养
实验方法原理 将小鼠的胚胎成纤维细胞（MEF）从机体中取出，经胰酶、螯合剂（常用EDTA）处理，分散成单细胞，置MEF生长培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料 孕鼠试剂、试剂盒 PBSEDTA胰酶MEF生长培养基FBS高糖DMEM仪器、耗材 眼科直剪眼科直镊眼科弯镊玻璃平皿3尼龙滤网离
小鼠胚胎培养、操作用液配制注意事项
实验概要胚胎学实验中需要应用到很多试剂，其中一部分需要实验人员来配制。本Protocol的目的是告知胚胎学实验中常规的试剂配制注意事项。实验步骤1. 每次配液应该使用Sigma公司的商品水，配液前要检测水的PH值。2. 配液时使用表格将每项药品的名称、用量对齐，纸制文件塑封，放在配液者可清晰
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（四）
第3步--ITSFn培养基在最少量培养基中选择神经前体细胞1．在胚状体接种在组织培养皿一天后将培养基换成ITSFn培养基2．并非所有胚状体在这一时期都已经发生粘附，因此在移除培养基时要小心谨慎以使大部分胚状体留在培养皿内。3．保持细胞在ITSFn中培养大约10天，根据需要更换培养基--大约每隔一天。
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（一）
一般培养-保持胚胎干细胞处于未分化状态培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代体外分化培养基包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板（使用或不使用盖玻片）体外分化方法注：以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系，其它胚胎干细胞的培养可以参考。不过人的胚胎干细胞培养不可以采用下面的protocol，需要用专用
人类胚胎干细胞移植恢复小鼠记忆能力
近日，复旦大学张素春团队首次将人类胚胎干细胞成功转化成特定的神经细胞，并将转化后的中间细胞注入到小鼠大脑中，使已丧失学习和记忆功能的小鼠恢复了学习和记忆能力。近日，相关研究成果发表于最新一期的学术期刊《自然—生物技术》。业内专家认为，该成果对治愈各种神经功能缺陷疾病有重大意义。 据介绍，张
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（二）
Geltin（明胶）包被准备500ml 0.1％geltin溶液1．将0.5 g明胶溶解在500ml无钙镁的PBS中（50－65℃水浴15～30分钟）。2．最好在溶液没有冷却的情况下通过0.22 μm滤膜过滤，贮存在4℃。包被培养板或培养皿1．加入足量的明胶溶液覆盖培养平面（15 cm培养皿加2ml
小鼠胚胎干细胞培养实验步骤（三）
ITSFn and N3（分化培养基）：配制一20×不含DMEM/F12的溶液。分装在15ml 离心管中，（稀释为1×，ITSFn 7.05ml，N3 12.55ml），0.2μm滤膜过滤，贮存在-20℃。将该溶液加入DMEM/F12中制备培养基，贮存于4℃。 贮存液 DMEM(高
小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养
实验概要小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养主要试剂75%酒精、0.05%Trypsin、SP、DPBS、细胞基础培养液 主要设备35 mm培养皿、60 mm培养皿、100 mm培养皿、15 mL离心管、50 mL离心管、冻存管、眼科剪、眼科弯镊、离心机实验材料怀孕13.5天【将成年雌、雄小鼠放在同笼中饲养
揭示小鼠胚胎的发育时钟和从头细胞极化机制
在植入前发育的过程中，顶-底细胞极性（apicobasal cell polarity）的建立是从全能性向多能性过渡的关键，从而诱导细胞向滋养外胚层（trophectoderm）分化。在小鼠胚胎中，这一事件被设定在8个细胞阶段发生，这一时间遵循一种内在的发育时钟，与胚胎大小或细胞周期进展无关。尽管顶
以胚胎小鼠为例进行原代培养的方法
1．取材：将孕鼠拉颈椎处死，投入75%酒精浸泡数秒消毒，提出孕鼠控掉酒精，放置于蜡盘中用大头针固定。用手术器械逐层分离皮肤和肌肉组织，打开腹腔。注意不同的解剖层次使用不同的消毒器械。最后取出双角子宫置于无菌平皿内。2．用Hanks液洗涤3次，剪开子宫取出胚胎。除去子宫、血液和筋膜等组织。3．用弯头剪