细胞生命四阶段全部可见
英国《自然·方法》杂志10月31日在线发表的一篇论文,描述了一种使用新型荧光蛋白在活细胞中同时可视化4个细胞周期的方法。这项技术有助于改进对细胞周期及其调控的表征,增进人们对发育生物学和癌症形成的理解。 细胞的生命是一个持续更新、持续从头开始的过程。从它的母细胞分裂开始,到它的子细胞形成或细胞自身死亡结束。而细胞周期就是指从一次细胞分裂形成子细胞开始,到下一次细胞分裂形成子细胞为止所经历的过程。细胞在这种前期、生长、DNA复制和分裂等阶段间循环。一直以来,区分细胞这4个阶段并非易事,因为要同时对来自许多不同报告蛋白(作为报告基因的蛋白)的信号进行成像,在技术上是非常困难的。 为了克服这一限制,美国斯坦福大学研究人员迈克尔·林及其同事,此次开发了一种名为mMaroon1的荧光蛋白,其荧光位于可见光谱远红端,能同时与青绿、绿色和橙色荧光蛋白成像。研究团队使用这种远红报告蛋白来标记一种标志着S期(DNA复制)和G2期(细胞生长......阅读全文
全自动活细胞实时荧光成像系统的主要功能
实验课题需要解决大量样本在活细胞状态下进行观察和成像的问题,并对细胞的图像进行深度分析,并对细胞现象进行背后的分子机理的解读和阐释。活细胞系统需要长时间观察下,光毒性要求最小,自动化程度高,同时具有一定的软件学习能力。
研究人员合成高性能荧光RNA实现活细胞RNA成像
2019年11月5日,华东理工大学生物反应器工程国家重点实验室杨弋教授等在Nature Biotechnology(《自然—生物技术》)杂志上发表了封面学术论文,题为“Visualizing RNA dynamics in live cells with bright and stable fl
监测活细胞内脂滴动态过程-“缓冲荧光探针”立大功
近日,大连化物所分子探针与荧光成像研究组(1818组)徐兆超研究员团队利用“缓冲”策略,发展了细胞内脂滴动态识别荧光探针LD-FG,该探针具有优异的光稳定性,可在空间超分辨成像的基础上实现高时间分辨率和长时间稳定成像,从而发现了多种新的脂滴动态过程。 脂滴是维持脂质和能量稳态的关键细胞器,由中
酵母活细胞染色
实验步骤展
活细胞的简介
活细胞就是能进行新陈代谢、繁殖、复制的细胞。例如:筛管细胞,酵母菌,花粉,精子,血小板等。活细胞也称作活化细胞。
富集活细胞实验
实验方法原理 在 25 ml 缧口盖离心管中加人6 ml Ficoll-Hypaque溶液,将 9 ml 含 2×107 个细胞的培养基加在上面,离心,从交界部位收集活细胞。实验材料 细胞悬液D-PBSA试剂、试剂盒 Ficoll-Hypaque溶液或其他类似物仪器、耗材 离心管或常规容器生长培养基
监测活细胞浓度,
活细胞浓度测量在发酵过程中具有非常重要的作用。通过它可以了解生物反应器中菌体或细胞生长状况,也可以了解一些描述菌体或细胞生长或生产能力的间接参数,如比生产速率,比基质消耗速率,细胞代谢流衡算等。 然而由于活细胞浓度传感技术的困难,传统的测量方法还是通过手工取样测量,操作复杂,滞后时间长
活细胞的简介
活细胞就是能进行新陈代谢、繁殖、复制的细胞。例如:筛管细胞,酵母菌,花粉,精子,血小板等。活细胞也称作活化细胞。
活细胞蛋白质光遗传控制技术获重要进展
近日,华东理工大学药学院教授杨弋团队在《自然—通讯》发表论文,描述了一种超高灵敏的光诱导蛋白质稳定标签,可用于调控活细胞蛋白质稳定性。 基因编辑、转录调控和RNA干扰是目前广泛应用的活细胞蛋白质操纵方法,可以用于研究特定蛋白在复杂生物过程中的功能。作为一种灵活而强大的基因组编辑工具,CRISP
Cell:阐明活细胞中蛋白质凝缩的新工具
一种利用光来控制活细胞内物质的工具,已经开始为我们解释“蛋白质如何组装成不同的液体和凝胶状固态”,这对于理解许多关键的细胞运转,是至关重要的。延伸阅读:Science:新结构揭示细胞的蛋白质生产机器是如何组装的。 由于极大的复杂性,宿主细胞会同时发生成千上万的化学反应。一些反应发生在专门的隔间
活细胞蛋白质光遗传控制技术获重要进展
基因编辑、转录调控和RNA干扰是目前广泛应用的活细胞蛋白质操纵方法,可以用于研究特定蛋白在复杂生物过程中的功能。作为一种灵活而强大的基因组编辑工具,CRISPR-Cas系统近年来得到了广泛应用。然而,这些技术是在基因或mRNA水平对蛋白质进行控制,而mRNA转录生成和翻译均需要时间,使得这些方法在表
蛋白纯化后,缓冲中的咪唑是否影响细胞测活?
如果你要测活的话,最好要先对你纯化的蛋白进行除盐,去除小分子干扰物。除盐,去除小分子干扰物的方法有很多,这里我就说说适合你的方法。第一,因为你手头上有超滤管,这个东西除了能浓缩蛋白,还有一个很重要的功能就是更换缓冲液,去除小分子。你选用3KD的超滤管,边浓缩边加入你测酶活想选择的缓冲溶液,重复几次的
一种HIV表面糖蛋白可让B细胞失活
位于HIV病毒表面的糖蛋白gp120可让人体B免疫细胞失去活性,这是《自然―免疫学》上一项研究给出的结论。这项发现解释了为什么HIV病人抗体反应比较弱。 人们已经发现HIV能够引起CD4+辅助性T免疫细胞不断丧失,导致免疫系统功能受损、其他感染更容易乘机而入。但人们一直没有弄清为何在HIV
机制“协同”提高荧光蛋白和荧光染料细胞成像性能
近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员徐兆超、副研究员苗露团队通过调控荧光蛋白与荧光染料之间的荧光共振能量转移,提高了荧光蛋白的光稳定性,并基于化学遗传学策略赋予外源荧光染料遗传编码荧光,解决了荧光染料因非特异性标记而产生背景荧光信号的问题,协同提高了荧光蛋白和染料在活细胞成像中对靶蛋白标记和成像
我所发展细胞膜缓冲荧光探针实现活细胞质膜形态动力学的超分辨荧光成像
近日,我所生物技术研究部分子探针与荧光成像研究组(1818组)乔庆龙副研究员和徐兆超研究员团队发展了组装介导的细胞膜缓冲荧光探针,实现了对细胞质膜的长时间稳定标记和超分辨动态荧光成像,观察到了质膜丝状伪足的动态运动和细胞外囊泡的分泌过程,发现了两种细胞外囊泡的融合模式,为细胞质膜的超分辨动态成像提供
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(三)
细胞骨架如微管、微丝等一直是生命科学研究的重点。近期Johnsson等科学家将SiR直接标记于与微管和微丝分别特异性结合的小分子docetaxel和jasplakinolide,即形成SiR-tubulin和SiR-actin,实现了在不对细胞或组织进行任何转染或基因组修饰的条件下直接进行活细胞成像
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(一)
如何免除活细胞标记中的清洗(washout)步骤?SNAP-tag等标记方法为活细胞显微成像带来了革命性的变化,也因此被Nature杂志评为2004年最热门的科研技术之一。但是传统的SNAP-tag标记仍然有很大的缺陷。将带有荧光探针的底物BG加入细胞后需要多次清洗细胞,才能将未结合的BG去除从而消
研究实现活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像
近期,中国科学院合肥物质科学研究院智能机械研究所智能微纳器件研究室研究员张忠平和王振洋领导的团队在生物体核酸结构的同步原位影像分析方面取得新进展,合成了一种具有高效生物膜穿透能力的阳离子碳量子点,实现了对活细胞及线虫体内DNA和RNA的同步荧光成像。相关研究成果发表在国际化学期刊《德国应用化学》
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(二)
图5.EGFR在细胞中转运的实时记录。(a)示意图,用于解释如何利用FAPL探针来实时追踪EGFR相关的细胞膜转运过程。(b)COS7细胞中表达的EGFR用DRBG-488标记(绿色),溶酶体用lysosometracker(红色)标记。(c)对表达SNAP-EGFR–CFP的MDCK细胞进行共聚焦
一种活细胞倒置荧光显微镜温度校准方法(一)
活细胞培养荧光显微镜由于可以进行活细胞常规培养条件,例如:温度控制,湿度控制,CO2浓度控制,O2浓度控制,同时配置高速摄像头可以进行时间序列(Time-Lapse),结合多色荧光滤片切换,LED单波长光源激发,可配备相差(Phase Contrast),微分干涉(DIC),荧光等对照方式可
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(四)
荧光显微镜在研究活细胞中蛋白质分子的定位、相互作用及动力学等生命活动中起着不可或缺的作用。将荧光蛋白如绿色荧光蛋白和目的蛋白融合表达,然后利用荧光蛋白发出的特异性荧光来观察和追踪目的蛋白分子在科学研究中得到了广泛的应用。但是荧光蛋白具有量子产量低、成熟速度受限、光谱容易受到环境因素影响及容易形成聚集
一种活细胞倒置荧光显微镜温度校准方法(二)
三.取出校准专用小工具,校准用温度探头,即一条可插入培养皿内部的线缆。上盖有开孔的校准培养皿。将探头插入校准培养皿的小孔,用此探头监测实时培养皿内部的温度。目的是将内部温度设置为活细胞目标温度(例如:37℃)。四.打开温度控制器电源开关,在控制器的前端LED面板上会显示相关的参数。控制器最多可以控制
活细胞荧光成像的新型标记法及其在STED中的应用(五)
SNAP-tag技术在STED超高分辨率显微成像中的应用近十年中,显微成像技术得到了飞跃的发展,填补光学显微镜(~200 nm)到电子显微镜(~0.1 nm)分辨率缺口,打破光学衍射极限的超高分辨率显微镜也越来越趋于成熟化。其中,德国马普研究所的Stefan Hell教授凭借其研发的受激发射
浙江大学250万采购多通道活细胞单分子荧光成像系统
近日浙江大学发布2022年7月采购意向,预计花费250万元采购多通道活细胞单分子荧光成像系统。多通道活细胞单分子荧光成像系统项目所在采购意向:浙江大学2022年7月政府采购意向采购单位:浙江大学采购项目名称:多通道活细胞单分子荧光成像系统预算金额:250.000000万元(人民币)采购品目:A021
活细胞和死细胞的区别
新陈代谢主要可以看细胞能否和外界进行物质交换。血小板有吞噬病毒、细菌和其他颗粒物的功能,所以是活细胞。花粉能在适宜的条件下发育成种子,所以也是活的。而植物的导管,筛管和木纤维则是植物细胞死亡后留下的细胞壁构成的中空的结构,所以是死细胞。 能够进行生命活动的细胞是活的,不能的就是死的 ,能够进行
绿色荧光蛋白(GFP)标记亚细胞定位
一、原理利用绿色荧光蛋白(GFP)来示踪胞内蛋白的技术。利用GFP融合蛋白技术来进行活细胞定位研究是目前较为通行的一种方法,在光镜水平进行研究,不需要制样,没有非特异性标记的影响。并且GFP的分子量为27kD,经激光扫描共聚集显微镜激光照射后,可产生一种绿色荧光,从而对蛋白质进行精确定位。激光扫描共
走进活细胞浓度监测
活菌细胞浓度测量在发酵过程中具有非常重要的作用。通过它可以了解生物反应器中菌体或细胞生长状况,也可以了解一些描述菌体或细胞生长或生产能力的间接参数,如比生产速率,比基质消耗速率,细胞代谢流衡算等。 然而由于活细胞浓度传感技术的困难,传统的测量方法还是通过手工取样测量。操作复杂,滞后时间长
活细胞直接观察实验
相差观察和摄影方法 实验方法原理 培养的活细胞在一般显微镜下观察时,细胞是透明的,反差很小,难以观察到细胞清晰结构,只有应用附有相差装置的显微镜,才能使目的物
活细胞直接观察实验
实验方法原理培养的活细胞在一般显微镜下观察时,细胞是透明的,反差很小,难以观察到细胞清晰结构,只有应用附有相差装置的显微镜,才能使目的物与背底反差增强,能够看清细胞的轮廓和一些微细结构如线粒体、核仁、染色质等。实验材料细胞仪器、耗材相差聚光器相差接物镜实验步骤一、相差装置的使用相差装置或显微镜都由两
活细胞培养系统
活细胞培养系统能够为大多数细胞培养准确地提供所需的温度、湿度及CO2浓度。适用培养皿(35mm、50/60mm)、多孔板。同时系统也配备Z轴防漂移系统,可以自动补偿显微镜Z轴焦点漂移,始终红外检测目标细胞,保证长时间(几小时到数天)观察,视野始终处于清晰状态,并可实现细胞追踪功能。