北京检验检疫局植物病毒检疫鉴定方法添利器
植物病毒俗称植物上的癌症,其流行和爆发严重威胁着粮食生产和人类食品安全。据不完全统计,全世界每年因植物病毒病造成的农业损失占粮食作物总产量10%。传统的植物病毒检测方法包括血清学检测、电子显微镜观察、指示植物接种、通过PCR或RT-PCR进行的DNA扩增、芯片杂交等,使用这些方法的一个重要前提是对植物病毒的基因组特性、血清学特性、生物学特性、理化特性等有预先的了解;而对于未知病毒的检测,这些方法就显得束手无策。 RNA沉默是一种广泛存在于植物体内的防御机制,当植物病毒入侵植物的时候,植物体内会针对入侵病毒产生大量的特异小RNA分子,可以抑制病毒的进一步危害。由于这些小RNA分子与入侵病毒是相匹配的,因此,如果能获得这些特异小RNA分子序列,就可以鉴定出入侵病毒种类。 基于植物RNA沉默原理,北京检验检疫局结合承担的质检公益性行业科研专项“应用siRNA深度大规模测序技术筛查检疫性植物病毒方法研究”(编号:201310......阅读全文
北京检验检疫局植物病毒检疫鉴定方法添利器
植物病毒俗称植物上的癌症,其流行和爆发严重威胁着粮食生产和人类食品安全。据不完全统计,全世界每年因植物病毒病造成的农业损失占粮食作物总产量10%。传统的植物病毒检测方法包括血清学检测、电子显微镜观察、指示植物接种、通过PCR或RT-PCR进行的DNA扩增、芯片杂交等,使用这些方法的一个重要前提是
腺病毒的鉴定方法
对难于培养的肠道腺病毒,从粪便标本中粗提后,经电子显微镜或免疫电镜观察。病毒分离与鉴定1.分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物,粪便和尿液等,加抗生素处理过夜,离心取上清接种敏感细胞(293、Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝
鉴定植物细胞死活的方法
【实验目的】学习用质壁分离法和用活体染色法鉴定细胞死活【实验原理】活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是通透性的变化最为明显。活细胞的原生质具有选择透过性;而死细胞则为全透性。选择透过性是质壁分离的先决条件。因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的细胞则说明是死的。死活细胞间不仅通
植物病毒病检测方法
植物病毒病是农业生产上一种重要病害,严重影响农作物的产量和质量, 目前还没有1种治疗效果较理想的药剂,对发病植株做到早期诊断及提前检测就显得尤为重要。植物病毒学历经近百年的发展,植物病毒的检测方法与手段也在不断发展与改进。常用的方法有侵染力测定法、血清学方法、电子显微镜计数和分子生物学法等。1.1侵
蕨类植物鉴定实验——蕨类植物鉴定
实验材料石松标本卷柏(或中华卷柏)腊叶标本石松茎横切片石松卷柏抱子叶穗纵切片问荆(或节节草)新鲜叶片(或腊叶标本)蕨腊叶标本蕨地下茎横切片蕨孢子囊群水封 片(或永久封片)蕨原叶体装片常见蕨类植物的标本仪器、耗材显微镜解剖镜放大镜镊子解剖针载玻片盖玻片培养皿滴瓶实验步骤(一)石松亚门 Lycophyt
裸子植物鉴定实验_松科鉴定
实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤(三)松科 Pinaeeae油松 ( 图 2-2
裸子植物鉴定实验_其他常见裸子植物的观察鉴定
实验材料华山松等试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤观察华山松、青海云杉、刺柏、杜松,圆柏,叉子圆柏等植物。
蕨类植物鉴定实验——其他常见蕨类植物鉴定
实验材料石松标本卷柏(或中华卷柏)腊叶标本石松茎横切片石松卷柏孢子叶穗纵切片问荆(或节节草)新鲜叶片(或腊叶标本)蕨腊叶标本蕨地下茎横切片蕨孢子囊群水封 片(或永久封片)蕨原叶体装片常见蕨类植物的标本仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤(四)其他常见蕨类植物的观察另外观察槐
裸子植物鉴定实验_苏铁科鉴定
实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤苏铁科cycadaceae苏铁为常绿乔木,茎短不
裸子植物鉴定实验_柏科鉴定
实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤柏科Cupressaeeae侧柏,如图取侧柏新鲜
裸子植物鉴定实验_银杏科鉴定
实验材料苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片)银杏种子纵切片油松新鲜材料(或腊叶标本)油松叶横切片、侧柏新鲜材料(或腊叶标本)试剂、试剂盒乙酸洋红仪器、耗材显微镜镊子解剖针载玻片盖玻片滴管培养皿吸水纸实验步骤(二)银杏科 Ginkgoaceae银杏 ( 图
种子植物鉴定实验
实验方法原理植物分类主要是根据桢物各部分形态特征来进行的,在鉴定一种植物时,首先要对该种植物进行全面细致的分析观察,并作好描述记录,以利鉴定工作进行。实验材料植物材料 仪器、耗材放大镜
植物细胞死活鉴定
1、 用质壁分离法鉴定细胞死活 (1) 原理 活细胞与死细胞在性质上有许多差别,特别是透性的变化最为明显,活细胞的原生质具有分别透性;而死细胞则为通透性。分别透性是质壁分离的先决条件,因此能发生质壁分离的细胞就表示是活的,不能发生质壁分离的则说明是死的。 (2) 仪器药品及材料 洋葱及其它植物 材
种子植物鉴定实验
实验方法原理 植物分类主要是根据桢物各部分形态特征来进行的,在鉴定一种植物时,首先要对该种植物进行全面细致的分析观察,并作好描述记录,以利鉴定工作进行。实验材料 植物材料仪器、耗材 放大镜实验步骤 (一)一般被子植物分析观察的内容1 生活型:是乔木、灌木、草本(一年生、二钉生或多年生),还是藤本(木
裸子植物鉴定实验
实验材料:苏铁带球果新鲜材料、苏铁大抱了叶新鲜叶片(或腊叶标本)、银杏腊叶标木(或新鲜叶片) 银杏种子纵切片
种子植物鉴定实验
实验方法原理植物分类主要是根据桢物各部分形态特征来进行的,在鉴定一种植物时,首先要对该种植物进行全面细致的分析观察,并作好描述记录,以利鉴定工作进行。实验材料植物材料仪器、耗材放大镜实验步骤(一)一般被子植物分析观察的内容1 生活型:是乔木、灌木、草本(一年生、二钉生或多年生),还是藤本(木质或草质
腺病毒的病毒分离与鉴定
1、分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物,粪便和尿液等,加抗生素处理过夜,离心取上清接种敏感细胞(293、Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝现象,最突出的表现是许多病变细胞聚在一起呈葡萄串状。 2、病毒鉴定 用荧光标记的
蕨类植物鉴定实验
实验方法原理 实验材料 石松标本卷柏(或中华卷柏)腊叶标本石松茎横切片石松卷柏抱子叶穗纵切片问荆(或节节草)新鲜叶片(或腊叶标本)蕨腊叶标本蕨地下茎横切片蕨孢子囊群水封 片(或永久封片)蕨原叶体装片常见蕨类植物的标本仪器、耗材 显微镜解剖镜放大镜镊子解剖针载玻片盖玻片培养皿滴瓶实验步骤 (一)石松亚
植物抗逆性的鉴定实验
实验方法原理 当植物组织受干旱或其它不良条件如高温、低温等影响时,常能伤害原生质体的结构而引起透性增大,结果细胞内含物将有不同程度的外渗,使外渗液的电导度增大,用电导仪即可明显地测定出来,透性变化愈大,表示受伤愈重、抗性愈弱。实验步骤 一、材料与设备1. 植物材料:小麦、玉米或其它作物叶片。2.
植物抗寒性鉴定
我国植物种类繁多,分布区域广,在晚秋和早春时期发生的冻害和冷害两种低温危害,常常给越冬作物和果木造成严重伤害。冻害由0℃以下低温造成,冷害由0℃以上低温引起,冷害对植物的伤害程度,除取决于低温外,还取决于低温维持时间的长短。植物抗寒性的强弱决定其生长季节,因此蔬菜作物利用抗寒品种,可以将露地栽培提前
植物抗旱性鉴定
水分亏缺是一种最普遍的影响植物生产力的环境胁迫,尽管蔬菜作物一般都在水源充足的地区栽培,但是通常蔬菜需水量大,而且几乎整个生育期对水分的要求都比较多;而果树大多栽培于丘陵、土地,更易受到水分亏缺的影响。因此深入研究植物的抗旱性,进行抗旱育种显得特别重要。抗旱育种的成败在很大程度上取决于拥有抗性资源的
植物抗逆性的鉴定实验
实验方法原理:当植物组织受干旱或其它不良条件如高温、低温等影响时,常能伤害原生质体的结构而引起透性增大,结果细胞内含物将有不同程度的外渗,使外渗液的电导度增大,用电导仪即可明显地测定出来,透性变化愈大,表示受伤愈重、抗性愈弱。实验步骤:一、材料与设备1. 植物材料:小麦、玉米或其它作物叶片。2.
蕨类植物鉴定实验
实验材料:石松标本 卷柏(或中华卷柏)腊叶标本
植物病毒的血清学方法检测
血清学方法是检测植物病毒最为常用和有效的手段之一。植物病毒是由蛋白质和核酸组成的核蛋白,是一种很好的抗原, 特异性的抗体与相应的抗原结合, 使抗原失去活力, 这种结合的过程叫做免疫反应, 也叫血清反应。由于不同病毒产生的抗血清都有各自的特性, 因此可以用已知病毒的抗血清来鉴定病毒种类。目前应用最广泛
转基因植物的分子检测与鉴定方法(三)
3 转基因植株外源基因表达情况的检测与鉴定尽管在mRNA水平也能一定程度地研究外源基因的表达,但存在mRNA在细胞质中被特异性地降解等情况,mRNA与表达蛋白质的相关性不高(相关系数低于0.5),基因表达的中间产物mRNA水平的研究并不能取代基因最终表达产物的研究。转基因植株外源基因表达的产物一般
转基因植物的分子检测与鉴定方法(一)
随着分子生物学和植物基因工程的不断发展,越来越多的育种工作者开始利用转基因技术获得常规育种技术难以得到的新种质和新品种。植物转基因技术最大的好处在于可以打破自然界物种间原有的生殖隔离,促进基因在不同物种间的交流,极大地丰富变异类型,增大遗传多样性,为植物新品种的培育提供丰富的育种资源。通过对基因功能
转基因植物的分子检测与鉴定方法(二)
1.1.2.2 降落PCRTD-PCR是一种在一个反应管或少数几个反应管中通过一系列退火温度逐渐降低的反应循环来达到最佳扩增目的基因的PCR方案。它通过体系自身的代偿功能弥补以反应体系和并非完美的循环参数所造成的不足。此策略保证了最初形成的引物模板杂交体具最强的特异性。尽管最后一些循环采用的退火温
转基因植物的分子检测与鉴定方法(四)
4.2 试纸条技术与ELISA原理相似,不同之处是以硝化纤维膜代替聚苯乙烯反应板为固相载体。先将特异性抗体吸附在膜上,将膜放入混有样品的溶液中,蛋白质随着液相扩散,遇到抗体,发生抗原-抗体反应,通过阴性对照筛选阳性结果,并给出转基因成份含量的大致范围。试纸条方法是一种快速简便的定性检测方法,将试纸条
疱疹病毒的病毒分离和鉴定
病毒分离培养是当今临床上明确诊断疱疹病毒感染的可靠依据。可采集皮肤、生殖器等病变部位的水疱液、脑脊液、角膜刮取物、唾液等标本,接种人二倍体成纤维细胞株WI38及其它传代细胞株如Vero、BHK等,经24~48小时后,细胞则出现肿胀、变圆、细胞融合等病变。然后用HSV-1和HSV-2的单克隆抗体作
蕨类植物鉴定实验——鉴定桉叶亚门
实验材料石松标本卷柏(或中华卷柏)腊叶标本石松茎横切片石松卷柏孢子叶穗纵切片问荆(或节节草)新鲜叶片(或腊叶标本)蕨腊叶标本蕨地下茎横切片蕨孢子囊群水封 片(或永久封片)蕨原叶体装片常见蕨类植物的标本。仪器、耗材显微镜解剖镜放大镜镊子解剖针载玻片盖玻片培养皿滴瓶实验步骤(二)桉叶亚门 Sphenop