Nat Biotechnol：利用DNA重组酶编程人细胞，执行逻辑运算
在一项新的研究中，来自美国波士顿大学的研究人员开发出一种新的方法来改造哺乳动物细胞，从而允许对它们进行编程，让它们以期望的方式发挥功能。相关研究结果于2017年3月27日在线发表在Nature Biotechnology期刊上，论文标题为“Large-scale design of robust genetic circuits with multiple inputs and outputs for mammalian cells”。 当全世界的科学家们寻找新的方法来预防和治疗疾病时，新的技术正在出现，其中的一些技术涉及对人细胞进行编程，让它们以期望的方式发挥功能，比如杀死癌细胞。在这项新的研究中，这些研究人员开发出一种新方法：利用DNA重组酶对哺乳动物细胞进行编程。 为了了解如何对细胞进行编程，科学家们已利用细菌等简单的有机体开展研究，这导致使用转录因子来调节基因。不幸的是，这种技术经证实不适合用来对哺乳细胞进行编程......阅读全文
什么是重组酶？
中文名称重组酶英文名称recombinase定 义参与基因定位重组过程的酶。负责识别、切割特异的重组位点，并连接两个参与重组的分子。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），酶（二级学科）
重组酶聚合酶扩增叙述
重组酶聚合酶扩增（RPA），被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性，最佳反应温度在37℃左右。重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物，能在双链D
DNA重组技术－酶切
实验概要 通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理 DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上，并切割双链DN
RPA重组酶是什么？
2006 年，Piepenburg 等首次提出了重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重组酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和单链结合蛋白(gp32)以及两条特异性的上下游引物参与的等温扩增。 首先， T4 uvsX
什么是Cre重组酶？
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 [1] 。 Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种
什么酶重组等温扩增技术？
通过模拟生物体遗传物质自身扩增复制的原理,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定重组酶、外切酶、聚合酶等多酶体系进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进行优化组合,从而获得核心的重组等温扩增体系,建立特殊扩增反应体系,在37-42℃恒温条件下,可将微量DNA/RNA的特异性区段在数分钟内扩增
重组质粒双酶切鉴定
既然你的质粒已经提出来了，那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。 你看看双酶切后载体的位置有几条带，如果是两条，那说明酶切不完全，如果是一条，那说明酶切效率没问题。 pET28a分子量为5.6k，你的插入片段为500bp，如果你的质粒完全切开，载体和插入片段的摩尔比为1：1，质量比就是5.6
DNA重组技术：酶切、连接
实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。 5’…G↓A
重组克隆筛选（酶切鉴定）
【实验目的】1.掌握质粒提取的基本方法的原理；2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。【实验原理】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统，其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说，重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体以及非目的DNA片断插入
重组酶聚合酶扩增（RPA）技术简介
核酸检测革命：可替代PCR的犀利技术——RPA重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸（寡核苷酸引物）的重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA
Cre重组酶的基本信息
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 [1] 。Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白，分
Cre重组酶的结构和来源
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 。Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白，分子量约
DNA重组（DNA－recombination）技术：工具酶
一、限制性内切酶限制性内切酶（restriction endonucleases，RE）是其中最重要的工具酶之一。它是一类核酸水解酶，能识别和切割双链DNA分子中的特定核苷酸序列。（一）命名原则限制性内切酶大多从细菌中发现，根据来源进行命名，限制酶的第一个字母（大写，斜体）为宿主菌的属名，第二、第三
twistDx－的重组酶聚合酶扩增（RPA）技术原理
twistDx 的重组酶聚合酶扩增（RPA）将彻底改变在资源有限的现场环境中扩增和检测核酸的能力。RPA 技术原理RPA 体系的重点是重组酶，这些酶与寡核苷酸引物形成复合体，并使引物与双链 DNA 中的同源序列配对。单链 DNA 结合（SSB）蛋白与被取代的 DNA 链结合，并使形成的 D 环保
聚合酶链反应构建重组DNA
实验材料 DNA试剂、试剂盒 TE无水乙醇DNA聚合酶CTP仪器、耗材 电泳仪离心机PCR仪实验步骤 1. 制备模板DNA，如DNA不是经氯化铯梯度纯化的，100℃煮沸10 min 以灭活核酸酶。 2. 制备寡核苷酸引物，若PCR产物要进行平端克隆，就应该对引物的5’端羟基进行磷酸化处理。 图一
Cre重组酶的基本信息介绍
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡。 Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白，分子量
聚合酶链反应构建重组DNA
2016年09月12日 15:27 来源:上海江林生物科技有限公司>>进入该公司展台 实验材料DNA试剂、试剂盒TE无水乙醇DNA聚合酶CTP仪器、耗材电泳仪离心机PCR仪实验步骤1. 制备模板DNA，如DNA不是经氯化铯梯度纯化的，100℃煮沸10 min 以灭活核酸酶。 2. 制备寡核苷
聚合酶链反应构建重组DNA
基本方案 实验方法原理 利用聚合酶链式反应（PCR），任何两个DNA片段可连接成一个新的重组DNA分子。通过在PCR引物中引入的额外非同源的核苷酸，可在连接处
TEV重组型蛋白酶相关小知识
蛋白酶是催化蛋白质水解的一类酶，是酶学研究中较早也是最深入的一种酶。重组TEV蛋白酶（GST标签）是烟草花叶病毒小核体蛋白a催化结构域基因编码的经高度纯化的制剂，该酶的生物学功能是在病毒产生过程中将多蛋白体酶解为单一蛋白。 和因子Xa、凝血酶相比，TEV酶是识别序列更加严格。做为生物工程下游技术
基因重组胰蛋白酶与传统胰酶的消化对比
胰蛋白酶（Trypsin）是一种丝氨酸蛋白水解酶。其前体为无生物活性的胰蛋白酶原（trypsinogen），产生于胰脏。随胰液分泌到小肠中，被小肠中的肠肽酶激活后，能将蛋白质分解为多肽，进而分解成为氨基酸。其切割肽链的位点主要位于赖氨酸或精氨酸的羧基端。故在体外细胞培养中，胰蛋白酶被用于消化贴壁细胞
如何选择合适细胞的消化酶重组胰酶和动物源胰酶
培养细胞的老师们都知道细胞的生命是极其脆弱的在培养过程中有哪些行为是比较伤害细胞的呢？在培养贴壁细胞过程中消化过程在一定程度上是对细胞的一种折磨但是又不得不进行这个过程所以如何做好细胞消化善待细胞们是我们一定要了解的步骤~ 胰酶的作用原理胰酶是一种蛋白酶，酶切位点是肽链的Lys或Arg两个残基的羧基
RPA（重组酶聚合酶扩增）技术原理及RPA与LAMP对比
英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年，基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增，开发的重组酶聚合酶扩增ZL技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。(http://www.twistdx.co.uk)
酶促重组等温扩增技术（ERA）的反应原理
1、重组酶首先与上下游引物结合,寻找同源双链DNA,一旦定位发生链交换2、同时SSB蛋白与亲本链绑定,阻止其与其脱离的模板链发生相互作用3、DNA聚合酶从上下游引物的3”端启动合成,形成两条双链DNA,如此循环重复扩增
化学所发表ATP合酶体外重组综述文章
以天然生物活性分子为基元，利用分子组装策略构建新型的仿生体系，模拟生命基本单元的结构与功能，能有助于在分子层面上理解与认知生物活动的本质与物理化学机制，已发展成为组装生物学的研究新方向。 ATP合酶是自然界中最小的生物分子马达，在生物能的产生和转化方面起着关键作用。生命活动所必需的能量三磷酸腺
酶促重组等温扩增技术（ERA）的应用介绍
1、研究诊断领域:针对细胞培养中的支原体污染,提供一种快速、简单、灵敏的检测方法,只需要20分钟便能得出结果2、公共卫生领域:针对危害公众健康的呼吸道传染性病原,肠道致病病原及生殖系统病原进行快速检测3、食品安全领域:针对致病微生物、动物源性成分和转基因农产品进行快速现场检测4、农业生产领域:针对水
泽璟制药：重组人凝血酶获批上市
泽璟制药(688266)1月2日晚间公告，公司收到国家药监局核准签发的《药品注册证书》，公司自主研发的重组人凝血酶的新药上市申请获得批准，用于“成人经标准外科止血技术（如缝合、结扎或电凝）控制出血无效或不可行，促进手术创面渗血或毛细血管和小静脉出血的止血”
TG酶在雪花牛肉及牛排重组的新应用
雪花牛肉是具有大理石花纹的牛肉，这种牛肉香、鲜、嫩、滑，胆固醇含量低，营养价值比普通牛肉高很多，是较好的高档牛肉，以日本神户牛肉最为出名。2003～2013年之间，我国牛肉产量达653万吨，同比增长3．14％，其中高端牛肉市场发展迅速，为6．15万吨。由于牛肉有严格的等级划分，一头重达一吨的牛中仅有
小鼠重组胰岛素抗体酶联免疫分析（ELISA）
小鼠重组胰岛素抗体酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中重组胰岛素抗体含量。实验原理： 本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中小鼠重组胰岛素抗体水平。用纯化的小鼠重组胰岛素抗原包被微孔板，制成固相抗原，往包被抗原
酶促重组等温扩增（ERA）的原理和核心技术
酶促重组等温扩增技术(ERA技术)是一种等温核酸扩增技术,它是利用抗体制药领域先进的Molecular Design、Directed Evolution、Affinity Maturation 等技术手段,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定工具酶进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进
基因重组和DNA重组区别
基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合，形成新DNA分子的过程。 在人类的生殖细胞中发现的46条染色体发生在生物体内基因的交换或重新组合。基因重组是生物遗传变异的一种机制，包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。DNA重组指DNA分子内或分子间发生的遗传