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细菌细胞密度

细菌细胞密度(OD 600) 实验室确定细菌生长密度和生长期,多根据经验和目测推断细菌的生长密度。在遇到要求较高的实验,需要采用分光光度计准确测定细菌细胞密度。OD600是追踪液体培养物中微生物生长的标准方法。以未加菌液的培养液作为空白液,之后定量培养后的含菌培养液。为了保证正确操作,必须针对每种微生物和每台仪器用显微镜进行细胞计数,做出校正曲线。实验中偶尔会出现菌液的OD值出现负值,原因是采用了显色的培养基,即细菌培养一段时间后,与培养基反应,发生变色反应。另外,需要注意的是,测试的样品不能离心,保持细菌悬浮状态。......阅读全文

利用SC-ICP-MS 法测定单个细菌细胞中的铁含量

优势ICP-MS 法可以分析成批培养的细菌细胞中的总金属含量,然后根据测得的细胞总数平均算出单个细菌细胞的铁含量。由于平板计数法无法计算死亡细胞或未被培养的完整细胞,导致计数出现误差。然而,由于仪器的限制,目前还未见有方法可直接分析单个细菌细胞中的铁含量。基于单细胞ICP-MS (SC-ICP-MS

黄嘌呤氧化酶(xanthione oxidase, XOD)试剂盒使用说明

正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:XOD(EC 1.17.3.2)催化黄嘌呤氧化生成尿酸和超氧阴离子,是活性氧主要来源之一;同时也是核苷酸代谢的关键酶之一。XOD 主要分布于哺乳动物的心,肺,肝脏等组织中,当肝功能受损时,XOD 大量释放到血清中,对

过氧化氢含量(H2O2)试剂盒使用说明

过氧化氢含量(H2O2)试剂盒说明书微量法 100 管/96 样正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:H2O2 是生物体内最常见的活性氧分子,主要由 SOD 和 XOD 等催化产生,由 CAT 和 POD 等催化降解。H2O2 不仅是重要的活性

纤维素酶(cellulase,CL)/羧甲基纤维素酶活性测定试剂...

纤维素酶(cellulase,CL)/羧甲基纤维素酶活性测定 试剂盒说明书分光光度法 50 管/24 样正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定测定意义:CL(EC 3.2.1.4)存在于细菌、真菌和动物体内,能够催化纤维素降解,是一类可广泛应用于医药、食品、棉纺、环保及可再

HOK细胞人口腔角质细胞使用说明

品 牌:美国 ATCC细胞生长:HOK 细胞人口腔角质细胞贴壁生长细胞形态:上皮细胞样细胞数量:5*10^5cells/ml 1ml细胞传代:1:2 传代细胞纯度:93%细胞活力:95%(6) 不含有 HIV-1、 HB

高亲和力单克隆抗体制备问题及对策

1,细胞长的慢或细胞死亡正常生长情况下,细胞一天传代一次,生长越好,贴壁越多对策:①培养基配方不对;② 接种密度太低,低于10的4次方;③污染了支原体或者其他不明细菌,支原体的现状是出现小黑点;细菌污染是浑浊;霉菌污染是出现白色肉眼可见菌落;不明细菌污染出现砂状平铺背景,视野发暗。④细胞瓶刷洗不干净

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

MTT实验的一些细节问题

一、细胞:1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样,

MTT实验的一些细节问题

一、细胞: 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。

MTT实验的一些细节问题

一、细胞: 1.选择适当的细胞接种浓度。一般情况下,96孔培养板的一内贴壁细胞长满时约有105个细胞。但由于不同细胞贴壁后面积差异很大,因此,在进行MTT试验前,要进行预实验检测其贴壁率、倍增时间以及不同接种细胞数条件下的生长曲线,确定试验中每孔的接种细胞数和培养时间,以保证培养终止致细胞过满。这样

分子生物学常用实验技术(page 1)

第一章质粒DNA 的分离、纯化和鉴定 第二章DNA 酶切及凝胶电泳 第三章大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 第四章RNA 的提取和cDNA 合成 第五章重组质粒的连接、转化及筛选 第六章基因组DNA 的提取 第七章RFLP 和RAPD 技术 第八章聚合酶链式反应(PCR)扩增和扩增产物克隆 第九章分

分光光度计的应用

分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。核酸的定量是分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。蛋白质的直接定量(UV法):比色法蛋白质定量,蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成

实验常见问题解答汇集

BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序,为什么需要构建TA克隆后测序?由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同,未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U,而C若发生甲基化则不变,这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图,无法确定甲基化的程度,必需通过回收PCR产物,进

表皮角质形成细胞模型构建实验

            实验方法原理 用酶消化法将表皮与真皮分开,然后分离角质形成细胞,用无血清培养液培养或在生长停止的饲养层细胞上培养。 

利用SC-ICP-MS 法测定单个细菌细胞中的铁含量

优势:ICP-MS 法可以分析成批培养的细菌细胞中的总金属含量,然后根据测得的细胞总数平均算出单个细菌细胞的铁含量。由于平板计数法无法计算死亡细胞或未被培养的完整细胞,导致计数出现误差。然而,由于仪器的限制,目前还未见有方法可直接分析单个细菌细胞中的铁含量。基于单细胞ICP-MS (SC-

表皮角质形成细胞模型构建实验

培养的表皮角质形成细胞可用作:(1)分化模型、器官型培养的理想组织构建物和细胞间相互作用的研究;(2)烧伤或外伤修复的移植物。实验方法原理用酶消化法将表皮与真皮分开,然后分离角质形成细胞,用无血清培养液培养或在生长停止的饲养层细胞上培养。 实验材料皮肤组织试剂、试剂盒热解素胰蛋白酶SKDM

72型分光光度计原理

一、构造原理及结构72型分光光度计是可见光分光光度计,波长范围为420nm~700nm,它由三大部分组 成:磁饱和稳压器、光源、单色光器和测光机构、微电计。72型分光光度计的基本依据是朗伯—比耳定律,它是根据相对测量原理工作的,即先选定某一溶剂作为标准溶液,设定其透光率为100%,被测试样的透光率是

超微量分光光度计的应用领域

  超微量分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器,主要设计用于生命科学实验室蛋白质组学和基因组学下述应用领域:  核酸的定量  核酸的定量是超微量分光光度计使用频率最高的功能。可以定量溶于缓冲液的寡核苷酸,单链、双链DNA,以及RNA。核酸的最高吸收峰的吸收波长260nm。每种核酸的分子构成不

分光光度计原理及应用(二)

比色法蛋白质定量蛋白质通常是多种蛋白质的化合物,比色法测定的基础是蛋白质构成成分:氨基酸(如酪氨酸,丝氨酸)与外加的显色基团或者染料反应,产生有色物质。有色物质的浓度与蛋白质反应的氨基酸数目直接相关,从而反应蛋白质浓度。比色方法一般有BCA,Bradford,Lowry 等几种方法。Lowry 法:

关于超微量分光光度计

分光光度计就是利用分光光度法对物质进行定量定性分析的仪器。由于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量样本量很小,于是超微量分光光度计应运而生。超微量分光光度计近年来已经替换普通的分光光度计成为分子生物学实验室的新宠,广泛应用于生命科学实验室蛋白质组学和基因组学等领域。 超微量分光光度计与传统分光光度计

分光光度计在核酸蛋白测量中的应用

 分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。分光光度计的简单原理分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与样

分光光度计在核酸蛋白测量中的应用

摘要:分光光度计已经成为现代分子生物实验室常规仪器。常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。  分光光度计的简单原理  分光光度计采用一个可以产生多个波长的光源,通过系列分光装置,从而产生特定波长的光源,光源透过测试的样品后,部分光源被吸收,计算样品的吸光值,从而转化成样品的浓度。样品的吸光值与

影响细胞生长的几点因素

影响细胞生长的几点因素,摘要:细胞在体外进行培养,失去了机体的调节和控制,因此,除满足营养的要求外,还必须使细胞生存环境昼接近活体的环境.外环境的培养条件如温度、渗透压、酸碱度等均能影响细胞的生长.一、温度:一般哺乳类及禽类细胞体外培养的适宜温度是37~38℃.温度过高或过低都会影响到细胞的生长.细

华南农大揭示调控病原菌致病毒力新机制

  记者近日从华南农业大学获悉,该校亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室教授邓音乐课题组,首次揭示了洋葱伯克霍尔德菌双信号受体蛋白RpfR通过感应群体感应信号BDSF和胞内c-di-GMP信号调控病原菌致病毒力的新机制。相关成果日前发表于《美国国家科学院院刊》。  BDSF是一种广泛存在于病原

贴壁细胞传代方法

多数细胞系和原代细胞都会以一种单层的形式生长(单层细胞)或者覆盖在玻璃或经处理的塑料物体表面。为了保持细胞的健康与活跃增殖,通常需要对细胞进行有规律的传代。最常见的传代方法是使用蛋白酶如胰酶或胶原酶破坏细胞间以及细胞与培养介质间的连接。当细胞被解离成单细胞悬液时,再将它们稀释并分发至新的培养容器中。

MTT(四唑盐)比色法

四唑盐(MTT)比色法可应用于:(1)检测细胞存活和生长;(2)大规模的抗肿瘤药物筛选;(3)细胞毒性试验以及肿瘤放射敏感性测定;(4)生物活性因子的活性检测。  实验方法原理活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而死细胞没有这种

MTT(四唑盐)比色法

MTT比色法             实验方法原理 活细胞中脱氢酶能将四唑盐还原成不溶于水的蓝紫色产物(formazan),并沉淀在细胞中,而

放大再放大!扫描电镜告诉你为什么牙膏要用含氟的!

  分析测试百科网讯 氟化物含量为0.05%,被认为是一种临床用于牙膏和漱口水中的抗菌药物,可减少牙菌斑和预防龋齿。近日国外研究人员通过SEM揭示了含氟牙膏去除口腔内有害生物膜来保护牙齿的功能。  普通的牙齿清洁口腔清洁方法通常在长时间内不足以提供充足的牙菌斑控制。因此,将具有抗牙菌斑或抗菌活性的化

真核转染

     一些真核蛋白在原核宿主细胞中的表达不但行之有效而且成本低廉,然而许多在细菌中合成的真核蛋白或因折叠方式不正确,或因折叠效率低下,结果使得蛋白活性低或无活性。不仅如此,真核生物蛋白的活性往往需要翻译后加工,例如二硫键的精确形成、糖基化、磷酸化、寡聚体的

形态学检查对细菌鉴定的导航作用

形态学检查对细菌鉴定的导航作用  陈东科1孙长贵2(1卫生部北京医院检验科,2解放军第117医院检验科)  细菌鉴定的原则之一就是用最少的试验完成鉴定。细菌形态学检查是最基本、简单、快速的常规鉴定方法。细菌形态学包括细菌细胞形态学和细菌菌落形态学。细菌形态学正