蛋白质组学的样品制备
想要研究蛋白质,首先要得到高度纯化且具有生物活性的目的物质,因此,蛋白样品的制备是重要前提。蛋白提取的质量和效果对后续的研究分析有重要影响。不同种类的样本在制备过程中,存在一些差异,要根据样本特征调整实验方案和操作细节。基本原则样品处理尽量简单,减少蛋白损失;尽量避免蛋白的降解;尽可能提高样品蛋白的溶解度;防止溶液介质中对蛋白质的人为修饰;去除非蛋白杂质。制备过程蛋白质的制备一般要经过以下四个阶段:选择材料和预处理,材料的破碎,提取和纯化,浓缩、干燥和保存。由于蛋白种类繁多,性质差异较大,因此不可能有一个固定的程序适用各类蛋白质的分离。根据性质进行分类,大部分蛋白质均可溶于水、稀盐、稀酸或稀碱溶液中,少数与脂类结合的蛋白质溶于乙醇、丙酮及丁醇等有机溶剂中。因此可采用不同溶剂提取、分离及纯化蛋白质。制备原理蛋白质在不同溶剂中溶解度的差异,主要取决于蛋白分子中非极性疏水基团与极性亲水基团的比例,其次取决于这些基团的排列和偶极矩。故分......阅读全文
代谢组学样本收集答疑解惑
样本收集是代谢组学研究的第一步,是保障代谢组学研究结果可靠性的最重要的环节之一。根据不同的研究目的该选取何种生物样本?不同种类的生物样本的规范收集流程是什么?有哪些注意事项(抗凝剂、冻融、抑菌剂等使用细节)?如何保存生物样本?可保存多久等等?这些都是代谢组学实验中小伙伴经常咨询的问题,本文将针对
空间转录组测序样本准备指南
现有空间转录组研究平台是基于冰冻样本进行研究,所以在样本冻存前至少10分钟,将异戊烷和液氮浴准备好(之所以用异戊烷而不直接用液氮进行速冻,是因为液氮沸点比较低,直接液氮处理可能在沸腾过程中使组织周围形成空穴,导致不同区域降温不同步而改变内部形态,甚至组织碎裂)。然后用镊子或者刮刀将新鲜组织转移到
空间转录组测序样本准备指南
现有空间转录组研究平台是基于冰冻样本进行研究,所以在样本冻存前至少10分钟,将异戊烷和液氮浴准备好(之所以用异戊烷而不直接用液氮进行速冻,是因为液氮沸点比较低,直接液氮处理可能在沸腾过程中使组织周围形成空穴,导致不同区域降温不同步而改变内部形态,甚至组织碎裂)。然后用镊子或者刮刀将新鲜组织转移到异戊
空间转录组测序样本准备指南
一、外泌体研究热度持续攀升 外泌体(exosome)是活细胞分泌的30-200nm的囊泡,在电镜下具有非常明显单层膜结构,通常为茶托型或一侧凹陷的半球形。其主要来源于细胞内溶酶体微粒内陷形成的多囊泡体,经多囊泡体外膜与细胞膜融合后释放到胞外基质中。多种细胞在正常及病理状态下均可分泌外泌体,
不同标记与非标记蛋白质组学定量准确性分析研究
通过质谱法进行定量蛋白质组分析为生物医学探索研究提供非常重要的途径。 然而,了解生物样品中的定量限制对于准确判断结果非常重要。通过使用加入已知浓度的蛋白质标准品的复杂样本,科学家们研究了无标记(label free)和基于标记(TMT和iTRAQ)的肽定量的定量限制,包括前体混合的评估及其对同重
蛋白质组与蛋白质组学简介2
3 甲基化干扰实验用来检测蛋白质的结合位点。甲基化修饰的DNA探针可以干扰蛋白质的结合。结合位点上未被修饰的DNA片段才能与蛋白结合,然后将DNA从被修饰的碱基处切割,电泳分离,结合蛋白的DNA在结合位点上不能被修饰,不能切断,可确定结合位点的位置。 4 Dnase I 足纹分析 蛋白
蛋白质组与蛋白质组学简介1
一、蛋白质组概念:一个细胞、一个组织或一个机体全部基因所表达的全部蛋白质。 二、蛋白质组学研究范畴 1.蛋白质和蛋白质间 2.蛋白质和核酸之间 3.蛋白质及其组成质点的分离、分析、鉴定 4.蛋白质结构分析 5.生理、病理或不同发育状态下蛋白质组表
新鲜实体组织样本的制备(机械法)
剪碎法网搓法研磨法实验方法原理机械法分散实体组织。用手术剪刀剪碎组织、用锋利的解剖刀剁碎组织或用匀浆器制成组织匀浆,再用细注射针头抽吸细胞或用 300 日尼龙网滤出单细胞悬液;采用网搓法也能获得大量细胞。机械法易造成细胞碎片和细胞团块,所以常与其他方法配合使用。实验材料组织
生物芯片生物样本的制备方法
分离纯化、圹增、获取其中的蛋白质或DNA、RNA并用荧光标记, 才能与芯片进行反应。用DNA芯片做表达谱研究时,通常是将样品先抽提MRNA,然后反转录成CDNA。同时掺入带荧光标记的dCTP或dUTP。
外周血单个核细胞样本的制备
实验方法原理血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料外周血试剂、试剂盒肝素生理盐水实验步骤一
ELISA样本制备及注意事项(一)
一、血清的采集、处理和保存1、真空采血针采集新鲜血液,加入无菌试管中;2、采血后室温静置1小时;3、将采集血液用离心机4℃,2500rpm离心10min;4、取上清。分装冻存备用:2-8℃下,可放置保存24-48小时;-20℃下,可放置保存1个月;-80℃下,可放置保存6个月;5、根据你的实验需要,
几种典型扫描电镜生物样本制备
隨着科学技术的发展,扫描电子显微镜技术已成为检测物质性能和表征微观结构的重要手段,被广泛应用于食品学、生物学、医学、高分子材料等领域[1]。扫描电子显微镜在科学研究中有广泛应用,如观察不同淀粉颗粒的超微形貌[2]、蛋白复合膜的微观结构[3]、淀粉纳米颗粒的研究[4]及不同储藏过程中肉食类微结构的变化
ELISA样本制备及注意事项(二)
七、ELISA 实验中关节滑液的采集、处理和保存1、口腔关节:患者取坐位,常规消毒后,作皮下及关节后区局部浸润麻醉。然后嘱患者大张口,采用装有2ml生理盐水的注射器(5号针头)作关节上腔穿刺,髁后进针,针尖方向斜向前、内、上,抵达关节结节后斜面后稍后退,回抽如发现有淡黄色液体,即表明已进入关节上腔,
外周血单个核细胞样本的制备
实验方法原理 血液是天然的单个细胞分散的细胞悬液,血细胞在生理状态下呈分散的游离状态。它是流式细胞分析的理想样品。血液中的主要细胞成分为白细胞、红细胞和血小板;而其中白细胞主要成分又分为淋巴细胞、单核细胞和粒细胞。但在血细胞中一般检测单个核细胞较为多见。实验材料 外周血试剂、试剂盒 肝素生理盐水实验
PLATO:革命性的高分辨率空间质谱蛋白质组学平台
空间蛋白质组学能够在传统蛋白质组学提供丰富分子信息的基础上,进一步揭示分子在细胞或组织中的空间分布,对于系统性地理解生物功能、疾病机制和治疗效果至关重要。《Nature Methods》选择空间蛋白质组学作为2024年度方法[1],也反映了行业对这项技术应用前景的关注和认可。现有质谱空间蛋白质组
蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线
基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类
2025蛋白质组学大会之农业蛋白质组
2025年10月14日10:10-12:10,由AOHUPO, AOAPO, π-HuB和CNHUPO四会联办的农业蛋白质组分论坛在广州成功举办。论坛由CNHUPO植物蛋白质组工作组和中国遗传学会农业蛋白质组分会负责召集。来自日本福井工业大学、美国密西西比大学、奥地利维也纳大学、武汉大学、中国科
蛋白质组,蛋白质组学及研究技术路线
基因组(genome)包含的遗传信息经转录产生mRNA,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组(transcriptome)。很显然,不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质,一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类
2025蛋白质组学大会之蛋白质组动态
2025年10月14日14点在广州白云国际会议中心国际会堂珠水厅,第12届AOHUPO大会暨第8届AOAPO大会暨π-HuB国际大科学计划第三届全球峰会暨第13届CNHUPO大会“Proteome Dynamics”分论坛顺利拉开帷幕。本论坛由中国科学院大连化学物理研究所张丽华研究员、南京大学刘
2025蛋白质组学大会之体液蛋白质组
2025年10月14日,由AOHUPO, AOAPO, π-HuB和CNHUPO四会联办的体液蛋白质组分论坛在广州成功举办。来自北京师范大学、复旦大学、南方医科大学中国医学科学院基础医学研究所、深圳湾实验室、首都医科大学附属北京地坛医院、北京青莲百奥生物科技有限公司、香港科技大学、Nationa
定量蛋白质组表达谱分析技术iTRAQ/TMT
iTRAQ(Isobaric Tag for Relative Absolute Quantitation)和TMT(Tandem Mass Tags)技术是分别由美国AB Sciex公司和Thermo公司研发的多肽体外标记定量技术。这两种技术采用2-10种稳定同位素标签,通过特异性 标记多肽的
2025蛋白质组学大会之模式生物蛋白质组
2025年10月13日14:00-16:00,模式生物蛋白质组分论坛成功举办。论坛云集圣保罗大学、中国科学院昆明动物研究所、国家蛋白质科学中心(北京)、中国科学院大连化学物理研究所、湖南师范大学、东北林业大学、南方海洋科学与工程广东省实验室(广州)、湖北工业大学等10余家国内外高校及科研机构的顶尖专
PBI宣布蛋白组学和前列腺癌症活体组织样本制备方法改进
分析测试百科网讯 PBI公司近日宣布,苏黎世联邦理工大学的分子系统生物学研究所的医药博士tiannan Guo在蛋白质组学和前列腺癌症活体组织样本制备方法改进方面提出了自己的研究数据。 郭博士与其同事,结合了公司的Barocycler NEP2320和MicroPestle的耗材(P
单细胞鉴定6000+蛋白,多场景实测数据震撼来袭!
过去几年里,单细胞蛋白质组学技术取得了长足发展,单细胞蛋白质组学逐渐走向成熟,后续有望广泛应用于肿瘤异质性分析、免疫学研究、发育生物学、神经科学以及精准医学等领域。然而,从技术发展成熟到实际场景应用分析的过程中,我们仍面临诸多挑战:1.当前单个细胞的蛋白鉴定深度还有待进一步提升以更好回答科学问题;2
Agilent在HUPO上推出复杂蛋白质组标准
安捷伦科技在第八届HUPO会议上推出新的复杂蛋白质组标准 9月28日,安捷伦科技公司在第八届HUPO会议上推出新的复杂蛋白质组标准,对于蛋白质生物标志物发现的研究者来说,这个标准可创造性地帮助他们通过基于质谱工作流的认证来进行蛋白质鉴定。这是对基于质谱的蛋白质组工作流进行资质测试的最先进的标准
如何修炼成流式高手之科研样本制备
为什么同一个配色,同一份实验步骤,但是最后实验结果却也变成“买家秀与卖家秀”。 我们来看看他的实验记录, 但是,如果是在做胞内染色的时候,死细胞对于实验结果的影响更大,但是普通的PI或者7AAD ,有会因为细胞需要固定,破膜而使所有细胞都是阳性。这个时候我们就需要使用到通用型死活细胞染料,这
有机元素分析仪的样本制备原则
样品的制备注意事项1、在样品称量过程中进行包养时,值得注意的是不要弄破样品皿,不然,样品的重量就会不准确,会导致结果没有效果。2、待测化合物含有磷、氟、硅及金属阳离子不为氧模态所允许,在进行分析前,含矿物质样品必须将种类矿物除去。3、由于元素分析仪测定的元素含量中有氢元素的含量,因此待测样品不能含有
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料组织酶仪器、耗材试管离心管尼龙网实验步骤1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~2 ml
新鲜实体组织样本的制备(酶消化法)
实验方法原理 对实体组织分散的作用原理主要有3个方面:① 可以破坏组织间的胶原纤维、弹性纤维等;② 可以水解组织间的黏多糖等物质;③ 可以水解组织细胞间的紧密联结装置的蛋白质物质。实验材料 组织酶仪器、耗材 试管离心管尼龙网实验步骤 1. 将适合于酶消化的组织置于离心管中。2. 将选好的酶溶掖 1~