为保证脂肪抽提仪测定效果,这三点很重要
不知道大家对粗脂肪了解多少,更多人的人应该对粗纤维有一定认识,而对 粗脂肪这一概念并不太了解。粗脂肪是指饲料、动物组织中脂溶性物质的总称,粗脂肪中的“粗”为粗略地意思,因为在检测过程中,样品中不只有脂肪溶于乙醚, 只能测出一个大概的值。而对于脂肪,相信大家再也熟悉不过了,它是食品的主要成分之一,大多数植物种子、果实或果仁,都含有脂肪或脂类化合物。最常见的脂 肪测定方法有脂肪抽提仪抽提法,它是根据索氏抽提原理、用重量测定的方法来进行脂肪含量测定。其测定效果很大程度取决于试验过程是否按照使用说明操作,应注意以下几点: 一、样品加入量的控制 固体或液体:准确称取5g-10g样品,放在蒸发皿中,加入海砂约20g,搅匀后于沸水浴上蒸干,然后在95-105℃时干燥。研磨后全部转入滤纸筒内,蒸发皿及附有试样的玻璃棒,均用沾有乙醚的脱脂棉擦净所用......阅读全文
哺乳动物组织样品RNA的抽提
哺乳动物组织样品RNA的抽提最基本的要素是防止RNA在抽提过程中降解,以及尽可能得到最高的RNA抽提效率。以下介绍我们实验室认为最符合以上两个要素的抽提方法。一、实验材料:Trizol试剂(Invitrogen公司)研钵,匀浆器,镊子,铝箔都高温灭菌即可;二、具体过程:1、样品在离体后应迅速冷冻在液
乙醇固定样品DNA-抽提和直接PCR
实验概要本实验从乙醇浸泡的鱼苗中提取DNA,并利用直接PCR进行了鉴定。实验原理在实际的研究工作中,野外取样的地点一旦较为偏远,受条件的限制,很难保证得到的样品活体或能够快速冷冻;另外,对一些稀有物种和濒危种,鲜活样品的采集十分困难,一般为了解决这些问题,常采用乙醇和甲醛固定的方法来处理样品,再对样
抽提萃取概念特点分类工艺流程
概念编辑利用化合物在两种互不相溶(或微溶)的溶剂中溶解度或分配系数的不同,使化合物从一种溶剂内转移到另外一种溶剂中。经过反复多次萃取,将绝大部分的化合物提取出来。萃取时如果各成分在两相溶剂中分配系数相差越大,则分离效率越高、如果在水提取液中的有效成分是亲脂性的物质,一般多用亲脂性有机溶剂,如苯、氯仿
基本方案2-RNA-抽提和标记
试剂、试剂盒TRIzol 试剂PBS氣仿乙醇乙酸钠引物Superscript Ⅱ RNase H反转录酶10 X low-T dNTP 混合物EDTATE 缓冲液仪器、耗材RNeasy Maxi 试剂盒组织匀浆机圆底离心管圆锥底离心管水平离心机薄壁 PCR 管热循环仪荧光扫描仪实验步骤展
植物总DNA的快速少量抽提实验
实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的处理下,结合65 °C水浴使细胞裂解、蛋白质变性、DNA被释放出来。CTAB与核酸形成复合物,此复合物在高盐(>0.7 mM)浓度下可溶,并稳
植物总DNA的快速少量抽提实验
CTAB法 实验方法原理 CTAB法:该方法简便、快速,DNA产量高(纯度稍次,适用于一般分子生物学操作)。 CTAB是一种非离子去污剂,植物材料在CTAB的
细胞内cccDNA的抽提与纯化
最常用的抽提细胞内cccDNA的方法是蛋白质-去污剂沉淀法,其原理是基于rcDNA和cccDNA与蛋白质结合能力的差异。rcDNA能与蛋白质共价结合,与绝大多数细胞染色体DNA一起形成沉淀,而cccDNA不能与蛋白质结合故游离于上清中,用酚氯仿抽提上清即可得到cccDNA。根据笔者的经验,该方法的主
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同,所以可以通过选择溶剂,使得目的蛋白质溶解度大,而其他杂蛋白质溶解度小,然后经过离心,可以去除大多数杂蛋白质。方法:溶剂的选择是抽提的关键,由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸,所以可
质粒抽提实验中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各有什么作用
溶液Ⅱ主要成分为氢氧化钠(NaOH)和SDS。DNA在pH5~9的溶液中是稳定的,但当pH>12或pH<3时,就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。溶液Ⅱ中NaOH浓度为0.2mob/L,加入溶液Ⅱ后,该系统的pH为12.0~12.6,因而促使染色体DNA与质粒的变性解离成单链。SDS是一种阴离子
蛋白质的抽提原理和方法
抽提是指利用某种溶剂使目的蛋白质和其他杂质尽可能分开的一种分离方法。其原理是不同蛋白质在某种溶剂中的溶解度不同,所以可以通过选择溶剂,使得目的蛋白质溶解度大,而其他杂蛋白质溶解度小,然后经过离心,可以去除大多数杂蛋白质。方法:溶剂的选择是抽提的关键,由于大多数蛋白质可溶于水、稀盐、稀碱或稀酸,所以可
极限土壤气相抽提XSVE技术介绍
土壤气相抽提(Soil Vapor Extraction, SVE)是1990年代初期所发展的一项成熟的土壤原位修复技术。SVE的基本原理是通过专门的地下抽提(井)系统,利用抽真空迫使非饱和区土壤中的气体发生流动,从而将其中的挥发性有机污染物脱除,达到污染土壤修复的目的。有时在抽提的同时,可
质粒抽提实验中溶液Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ各有什么作用
溶液Ⅱ主要成分为氢氧化钠(NaOH)和SDS。DNA在pH5~9的溶液中是稳定的,但当pH>12或pH<3时,就会引起DNA双链之间氢键的解离而变性。溶液Ⅱ中NaOH浓度为0.2mob/L,加入溶液Ⅱ后,该系统的pH为12.0~12.6,因而促使染色体DNA与质粒的变性解离成单链。SDS是一种阴离子
植物总DNA抽提方法和优缺点
1、植物DNA的CTAB提取法:经典方法。效果较好,污染少。多用于核基因组提取。2、SDS提取法:较为简易,提取的为全基因组,但有蛋白污染可能。3、简易“一管法”提取方法:4、PCR研究的快速提取法:以上两者方法简单,快速,但污染多,不适合做酶切等操作。5、酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:多
粗脂肪的定量测定:抽提法
一、目的与要求:1、熟悉掌握粗脂肪的测定方法。2、熟悉与掌握重量分析的基本操作,包括样品处理,烘干,恒重等。二、原理:本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物
粗脂肪的定量测定——抽提法
一、目的与要求:1、熟悉掌握粗脂肪的测定方法。2、熟悉与掌握重量分析的基本操作,包括样品处理,烘干,恒重等。二、原理:本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量,该法适用于固体和液体样品。通常将样品浸于脂肪溶剂,为乙醚或沸点30℃至60℃的石油醚,借助于索氏提取器进行循环抽提。用本法提取的脂肪性物
全自动沥青含量快速抽提仪的仪器的使用与操作
仪器在长途运输和长时间不用,再度使用前首先进行必要的检查和运转,确保安全第一,以防发生意外。⒈从溶剂孔注入三氯乙烯溶剂(约二十公斤)⒉检查仪器工作是否正常:接通电源,启动工作开关,再按冲振及抽提键,使控制部分将进入工作状态。⒊检查离心杯运转是否正常,按抽提键,此时离心机处于第一级转速运转,观察其转向
小鼠基因组DNA抽提操作规程
一、原理与意义先用细胞裂解液对已制备好的组织匀浆充分裂解,然后用蛋白酶去除其中的蛋白,再用氯仿一次抽提(无需用酚抽提)、预备液沉淀、RNase去除RNA、乙醇再沉淀即可得到完整DNA。该方法适用于从人或动物的各种组织、血液、培养细胞、G+/G-细菌中快速抽提基因组DNA。抽提出来的DNA能用于几乎所
水稻总DNA的快速少量抽提CTAB法
DNA分子是分子生物学研究的基本材料,依不同的实验目的可采取不同的抽提方法获取数量和质量不等的 DNA 。 实验目的:了解植物 DNA 抽提的主要方法,掌握 CTAB 法快速抽提水稻 DNA 。 实验材料及试剂: 水稻 叶片,1.5 × CTAB ,氯仿 / 异戊醇 (24:1) ,
RNA抽提注意事项和经验指南2
3:裂解液的选择 – 影响操作方便程度,内源杂质残留的因素常用的裂解液几乎都能抑制 Rnase 活性,因此,选择裂解液的重点是要结合纯化方法一起考虑。只有一个例外:高内源酶含量的样品建议使用含苯酚的裂解液,以增加灭活内源酶的能力。 4:纯化方法的选择 – 影响内源杂质残留。抽提速度的因素对于干净的样
RNA抽提注意事项和经验指南1
背景介绍实验前方法/试剂的选择问题解答 (外源性污染导致的问题不在本解答考虑中)RNA 抽提的“三大纪律八项注意”Rnase 污染的10大来源RNase 和 DEPC 处理RNA 抽提的10大窍门提高 RNA 得率经典抽提小技巧特殊组织的抽提样品冻融的影响RNA 质量的判断RNAguard:使降解成
RNA抽提注意事项和经验指南1
背景介绍实验前方法/试剂的选择问题解答 (外源性污染导致的问题不在本解答考虑中)RNA 抽提的“三大纪律八项注意”Rnase 污染的10大来源RNase 和 DEPC 处理RNA 抽提的10大窍门提高 RNA 得率经典抽提小技巧特殊组织的抽提样品冻融的影响RNA 质量的判断RNAguard:使降解成
样本抽提中RNA降解的解决方法
从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路,但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素,耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本,做个RNA抽提还常常……降解样本的RNA完整度低,长链RNA变成了短链,在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失,导致芯片结果的不准确。遇到R
样本抽提中RNA降解的解决方法
从临床样本出发进行芯片、测序等高通量生物学研究是最常用的思路,但样本采集过程受制于病理特征、病例数量等因素,耗时费力。无数期盼等来了期待中的临床样本,做个RNA抽提还常常…… 降解样本的RNA完整度低,长链RNA变成了短链,在常规的扩增过程中会发生探针检测的目的片段的丢失,导致芯片结果的不
RNA抽提-成功经验法则大公开!
本期专文要来跟大家讨论的话题是核糖核酸(RNA)的萃取,看到这里各位心中可能已经起了疑问: RNA 萃取不是很简单吗?只要照着标准步骤操作,加一加试剂就完成了,有必要大费周章特地开篇幅来谈这件事吗?其实越简单的东西遇到困难时就越难解,各位看倌就请耐着性子,听我们娓娓道来。 Lab 的经验和
电子舌分析酵母抽提物的味觉指标
实验目的:通过电子舌分析酵母抽提物的味觉风味分析 样品信息:酵母由某大学提供 检测仪器:日本INSENT公司的味觉分析系统 型号:TS-5000Z 结果分析: 味觉分析系统可以将复杂的味觉指标简单化以数值的形式展示酵母抽提物的味觉指标,并通过味觉指标的数据来比较和分析不同产地酵
Western-Blot-蛋白抽提试剂盒的选择
蛋白抽提试剂盒的出现弥补了细胞裂解液的应用局限性,特别是针对难提取的样本或者亚细胞器蛋白的提取,例如:针对植物、动物组织/细胞、细菌、酵母等不同样品及细胞核、细胞膜、线粒体、叶绿体、溶酶体等不同亚细胞器的专业提取试剂盒。这类特化试剂盒能够针对目的蛋白的不同来源和不同组织定位进行裂解和提取, 简化实验
电子舌分析酵母抽提物的味觉指标
实验目的:通过电子舌分析酵母抽提物的味觉风味分析样品信息:酵母由某大学提供检测仪器:日本INSENT公司的味觉分析系统 型号:TS-5000Z结果分析: 味觉分析系统可以将复杂的味觉指标简单化以数值的形式展示酵母抽提物的味觉指标,并通过味觉指标的数据来比较和分析不同产地酵母抽提物的味觉差异:
RNA抽提注意事项和经验指南3
RNA 抽提的“三大纪律八项注意” 纪律一:杜绝外源酶的污染。注意一:严格戴好口罩,手套。注意二:实验所涉及的离心管,Tip 头,移液器杆,电泳槽,实验台面等要彻底处理。注意三:实验所涉及的试剂/溶液,尤其是水,必须确保 RNase-Free。纪律二:阻止内源酶的活性注意四:选择合适的匀浆方法。注意
RNA抽提注意事项和经验指南4
经典抽提小技巧 1: Phenol 纯化:将等体积的 1:1 Phenol/Chloroform 加入,剧烈混允 1-2 分钟。高速离心 2 分钟。小心取上清 (80-90%)。决不能取到中间层。可以使用等体积的反应液加入 Phenol/Chloroform 中,同样再取出上清。将两次的上清
脂肪测定仪抽提过程中的注意问题
脂肪测定仪是一款根据索氏抽提原理、用重量测定方法来测定脂肪含量的实验室专用设备,适用于粮食、饲料、油料及各种脂肪制品中。以牛奶为例,脂肪、蛋白质等营养含量的数据对奶品定价具有重要的依据作用。而脂肪含量的测定就需要使用脂肪测定仪进行检测。操作步骤也较为简单:先将稀释液加温到恒温,并进行排汽。再将鲜奶