中国科大等揭示SETD3蛋白作为βactin组氨酸甲基化酶的结构
近日,中国科学技术大学教授许超课题组与波兰华沙大学Jakub Drozak实验室合作,解析了SETD3与β-actin多肽的高分辨复合物晶体结构,并结合酶活实验揭示了肌动蛋白(Actin)第73位组氨酸(His73)的N3位甲基化的作用机制,相关成果于2月20日以Structural insights into SETD3-mediated histidine methylation on β-actin 为题在线发表于eLife 杂志。 细胞骨架主要有微管、微丝和中间纤维三种成分,其中微丝在细胞形态维持、细胞的运动、细胞内物质运输等细胞内重要生命活动中发挥作用。微丝主要由Actin通过聚合形成,Actin高度保守,是一类可以结合并水解ATP的蛋白质,β-Actin蛋白质第73位组氨酸甲基化于五十多年前就被发现在绝大多数真核细胞中广泛存在,并通过Actin水解ATP后延迟释放ADP,来调控微丝聚合及功能。 SETD3是S......阅读全文
中国科大等揭示SETD3蛋白作为βactin组氨酸甲基化酶的结构
近日,中国科学技术大学教授许超课题组与波兰华沙大学Jakub Drozak实验室合作,解析了SETD3与β-actin多肽的高分辨复合物晶体结构,并结合酶活实验揭示了肌动蛋白(Actin)第73位组氨酸(His73)的N3位甲基化的作用机制,相关成果于2月20日以Structural insig
Protein-purification;-actin
Protein purification; actin Overview ACTINThe most abundant muscle and non-muscle cytoskeletal protein. MW 42 kDa, 374/375 amino acids; various
Actin-Capture-Assay
David AmbergDialyze purified GST fusion proteins and actin into PBS + 1mM MgCl2 .Mix 5ug actin into 50ul total volume binding buffer.Mix 5ug GST-fusio
大鼠Actinb(Actinb)ELISA检测法
大鼠Actin-b(Actin-b)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Actin-b 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Actin-b与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Actin-b,形成免疫复合物连接在
Isolation-of-Actin-and-Myosin-Filaments
LEVEL IIIMaterialsRelaxing Solution0.1 M KCl0.001 M MgCl5 mM ATP0.016 M NaHPONaHPOAdjust pH to 7.30.05 M Sodium phosphate buffer, pH 7.00.001 M EDTA (
Actin-StainingActin-Staining-Protocol
实验概要Invitrogen offers several fluorescent and biotinylated phalloidin and phallacidin derivatives for labeling F-actin. These phallotoxins, isolated
βActin抗体推荐—Abbkine高效价的BetaActin内参抗体
Actin即肌动蛋白,是细胞的一种重要骨架蛋白。Actin大致可分为六种,其中四种是不同肌肉组织特异性的,其余两种广泛分布于各种组织中,包括 β-actin和γ-non-muscle actin。β-actin作为内参是得到了公认的,这是针对大多数组织和细胞来说的,它广泛分布于细胞浆内,表达
Isolation-of-Nonmuscle-Actin
General Preparation1. Prepare buffers and have them cold. Make 50X stock of Buffer G and dilute as needed from frozen aliquots of 50X Buffer G.1X Extr
常用的βactin-引物序列
human actin f ctc cat cct ggc ctc gct gt human actin r gct gtc acc ttc acc gtt cc product size:268 rabbit actin r agt gcg acg tgg aca tcc g rabbit act
常用的βactin-引物序列
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Preparation-of-Conventional-Actin-from-Skeletal-Muscle
Modified from Spudich & Watt, 1971, JBC 246:4866.1. Mix 20 ml buffer G with each gm of muscle acetone powder. Extract with stirring on ice for 30 min.
小鼠βactin基因的克隆表达(2)
实验步骤: (1)目的基因与表达载体的连接反应: ①表达载体和目的片段的酶切 管号 ① ② pGEX 4T-1
小鼠βactin基因的克隆表达(3)
(2)质粒的提取及酶切鉴定分析 质粒的提取按照质粒提取试剂盒的操作步骤进行,然后进行双酶切鉴定。 管号 ① ② 质粒DNA
小鼠βactin基因的克隆表达(1)
动物组织RNA的提取实验目的:掌握由动物组织中提取总RNA的方法实验原理:Trizol试剂是一个包含酚、异硫氰酸胍和SDS的单相酸性溶液,其在裂解细胞的同时抑制RNase的活性,随后加入氯仿,酚会大量的溶解在氯仿中。由于DNA和RNA在酸性酚中的溶解性不同,造成DNA分布在下层的氯仿酚溶液中,RNA
如何挑选合适的βActin内参抗体?
如何选择合适的β-Actin抗体? 现在市场上对于内参抗体选择是比较多,但是也需要遵循一定的原则,那怎么去找到适合自己实验的β-Actin抗体呢?首先,我们需要考虑目的蛋白的大小,我们推荐内参要与检测的目的蛋白的分子量最好相差5KD以上,因此你需要根据你目的检测蛋白的分子量来选择合适的内参,由于β-
小鼠βactin基因的克隆表达(4)
实验步骤:(1)诱导靶蛋白表达分别挑取对照菌和重组菌1~2个菌落,接入5ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养过夜。取5ml过夜培养物接入500ml含Amp(30μg/ml)的LB培养液,37℃振荡培养2h以上,至对数中期(A550=0.5~1.0)。向诱导管中加入IPTG使其浓
生物物理所解析线虫精氨酸对称双甲基化酶的晶体结构
线虫PRMT5晶体结构示意图,其活性单位为同源二聚体 12月5日,美国《国家科学院院刊》(PNAS) 在线发表了中科院生物物理研究所许瑞明、龚为民、刘迎芳研究组以及遗传发育所鲍时来课题组合作的最新研究成果Structural Insights into Prote
Fluorescence-Procedures-forthe-Actin-andTubulin-Cytoskeleton-in-Fixed-Cells
Fluorescence Procedures for the Actin and Tubulin Cytoskeleton in Fixed CellsActin: Louise CramerTubulin: Arshad DesaiGeneral StrategyWe typically wor
肌动蛋白(Actin)动力学调节机制
细胞骨架的定义分为狭义和广义两种,前者是微丝,微管和中间纤维的总称,它们存在于细胞质内,又被称为“胞质骨架”。后者还包括细胞外基质(extracellular matrix)、核骨架(nucleoskeleton)和核纤层(nuclear lamina)。细胞骨架是细胞内运动,细胞器固定,细胞外型维
DNA甲基化酶的分类
基因组中DNA的甲基化模式是通过DNA甲基转移酶实现的。DNA甲基化酶分为2类,即维持DNA甲基化转移酶(Dnmtl或维持甲基化酶)和从头甲基化酶。根据序列的同源性和功能,真核生物DNA甲基化转移酶又分为4类:Dnmtl/METl、Dnmt2、CMTs和Dn-mt3。DnmtliiMETl类酶参与C
小鼠β肌动蛋白(βactin)酶联免疫分析(ELISA)
小鼠β-肌动蛋白(β-actin)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中β-肌动蛋白(β-actin)含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠β-肌动蛋白(β-actin)水平。用纯化的小鼠
Nature子刊支招:禁止单一蛋白表达就能跟感冒彻底说再见
说起感冒,大家都不会陌生。当出现打喷嚏、鼻塞、咽喉疼痛、咳嗽、发热等症状时,就要意识到病毒已经入侵你的身体。生活中细菌病毒无处不在,稍不留神便中招感冒,那有什么办法能够保护自身免受病毒的侵害吗?图片来源:Pixabay 近日,美国斯坦福大学和加州大学旧金山分校的研究人员共同领导的一项研究发现:
RTPCR内参基因选择:除了βactin还能用什么?
Q1: 要做real-time pcr,而该种的β-actin未确定,我知道一般用持家基因作内参,但似乎其他基因各有缺点,有的作者用他们做内参时被SCI杂志要求用两个内参以证实,我想知道的是除了β-actin,哪个基因是SCI公认的内参基因(不用作两个内参了)?A1: 28S和18S rRNA甘油醛
Role-of-PI3K-subunit-p85-in-regulation-of-Actin-Organization
Migration of cells is involved in essential functions such as development, invasiveness of cancer cells, leukocyte movement toward chemotactic signals
mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参吗
mirna的荧光定量pcr可以用actin做内参miRNA通过与转录本的相互作用,关闭或抑制基因的表达。最近的研究表明它们影响了约三成的基因。miRNA在多个组织中差异表达,这就让表达图谱分析成为研究的重点。同时,miRNA的过表达和抑制也是近年来常用的研究方法。我知道和使用过的U6内参基因只有两个
DNA甲基化酶的基本信息
大多数限制性内切酶常常伴随有1~2种修饰酶,即DNA甲基化酶,它能保护细胞自身的DNA不被限制性内切酶破坏。限制修饰系统(R-M系统)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型中的甲基化酶可使细菌DNA分子中的胞嘧啶和腺嘌呤发生甲基化,形成5‘-甲基胞嘧啶和6‘-甲基腺嘌呤.在DNA重组实验中,常用的甲基化酶属于Ⅱ型,它与相应的
保持甲基化酶的基本信息
中文名称保持甲基化酶英文名称maintenance methylase定 义编号:EC 2.1.1.37。催化半甲基化的DNA双链分子内与MeCpG配对的GpC序列中的胞嘧啶甲基化,从而使甲基化在DNA复制中得以连续保持的酶。Ⅰ型、Ⅱ型DNA甲基化酶均能以半甲基化DNA为底物,而Ⅲ型DNA甲基化酶
DNA甲基化酶的基本信息
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