基因活性的同位素分析实验——原位裂解细胞的CAT分析法

实验材料转染细胞试剂、试剂盒Triton裂解液仪器、耗材培养皿培养箱实验步骤1. 60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞,用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液,在室温下温育2~5 min。2. 吸去低渗缓冲液,加入400 μl Triton裂解液。用橡胶刮子将细胞刮离培养血,用1 000 μl 移液器将裂解物移入1.5 ml 微量离心管中。3. 微量离心1 min 除去细胞核,不可溶性蛋白。将上清转入一个干净的微量离心管中, 进行CAT活性分析。 ......阅读全文

基因活性的同位素分析实验——原位裂解细胞的CAT分析法

实验材料转染细胞试剂、试剂盒Triton裂解液仪器、耗材培养皿培养箱实验步骤1.  60 mm 培养皿中转染了CAT表达质粒的细胞,用2 ml PBS洗1次。每培养皿加入2 ml 低渗缓冲液,在室温下温育2~5 min。2.  吸去低渗缓冲液,加入400 μl Triton裂解液。用橡胶刮子将细胞刮

报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的层析分析法

报告基因 是一种编码可被检测的蛋白质或酶的基因,也就是说,是一个其表达产物非常容易被鉴定的基因。把它的编码序列和基因表达调节序列相融合形成嵌合基因,或与其它目的基因相融合,在调控序列控制下进行表达,从而利用它的表达产物来标定目的基因的表达调控,筛选得到转化体。实验材料DNA试剂、试剂盒PBS乙酸乙酯

报道基因活性的同位素分析实验——CAT活性的相抽提分析法

实验材料转染细胞试剂、试剂盒氯霉素Tris·ClTMPD二甲苯仪器、耗材离心机离心管培养箱实验步骤一、来源于哺乳动物细胞1.  按“CAT活性的层析分析法”中的步骤1~5的冻融法,制备哺乳动物细胞提取物。如果用胰蛋白酶消化或制细胞方法来收集细胞,则将原位裂解法的步骤1至4用以下的步骤2至4代替。 2

红细胞内CAT的作用

  红细胞内CAT是溶解状态,具有重要的生理功能。红细胞内的CAT和谷胱甘肽过氧化物酶具有共同保护血红蛋白和其它巯基酶、膜蛋白和解毒作用。CAT是血红蛋白和其它含巯基蛋白质的保护剂。

组织细胞内CAT的作用

定位于细胞器的CAT与产生H2O2的需氧脱氢酶类(氨基酸氧化酶等)同时存在,能有效调节体内H2O2水平,及时地消除H2O2的有害影响。过氧化氢酶是在生物演化过程中正常细胞内清除氧自由基,生物防御系统的关键酶之一,其生物学功能是催化细胞内过氧化氢分解,防止过氧化,帮助减缓细胞衰老。保护细胞免受氧自由基

小鼠(CAT)ELISA试剂盒操作说明

ELISA试剂盒检测样本齐全:(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Monkey, Pig……)用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。大鼠肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)ELISA试剂盒科研专用

冷凝集素测定(CAT)临床意义

正常参考范围:阴性临床意义:凝集价>1:64具有诊断意义,如在病程中,冷凝集素效价逐渐上升,则对诊断价值更大。支原体肺炎、肝硬化、多发性骨髓瘤 、疟疾、恶性淋巴瘤等冷凝集素有不同程度的升高。冷凝集素效价升高可在传染过程中出现,特别是传染性单核细胞增多症和支原体所致 非典型性肺炎;慢性的冷凝集

维护膜结构的完整性与CAT的作用

过氧化氢酶作为一种内源活性氧清除剂,能够在逆境或衰老过程中清除植物体内过量的活性氧,维持氧代谢平衡,保护膜结构。  线粒体是ROS产生的主要源泉和被清除的重要位点,过氧化物酶体是中长链脂肪酸β-氧化中一个重要细胞器,也是产生ROS的一个重要器官。CAT主要分布在线粒体和过氧化物酶体中,保护线粒体膜和

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定

试剂、试剂盒 Tris-缓冲液 Tris 三硝基甲苯(Triton) CAT 稀释缓冲液CAT 酶标准物闪烁液 聚丙烯闪烁杯仪器、耗材 微量离心管微量离心机实验步骤 一、材料灭菌物品1. D-PBSA2. 多孔培养板:6 孔,35 mm非消毒物品1. Tris-缓冲液:Tris-HCl,0.1mol

猪SOD,-GSHPx,-GST,-CAT,-GSH,MDA引用文献

文献题目  Toxicity of glyphosate in feed for weanling piglets and the mechanism of glyphosate detoxification by the liver nuclear receptor CAR/PXR pat

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验

通过测定转染细胞的报告基因表达,如β-gal或CAT,可以确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞主要用于(1)测定基因表达(2)基因整合评价(3)细胞的调控。来源于《动物细胞培养:基础技术指南(第五版)》实验方法原理氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransfe

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验

            实验方法原理 氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能将乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素上。本试剂盒采用荧光测定的方法,检测CAT活性,它的灵敏度接近同位素测定方法,而操作极

氯霉素乙酰基转移酶(CAT)测定实验

            实验方法原理 氯霉素乙酰转移酶报告基因(chloramphenicol acetyltransferase, CAT)能将乙酰基从乙酰辅酶A转移到氯霉素上。本试剂盒采用荧光测定的方法,检测CAT活性,它的灵敏度接近同位素测定方法,而操作极

报道基因活性的同位素分析实验

CAT活性的层析分析法 原位裂解细胞的CAT分析法 CAT活性的相-抽提分析法 人生长激素的放射免疫分析法             实验材料

大鼠过氧化氢酶(CAT)酶联免疫分析

大鼠过氧化氢酶(CAT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中过氧化氢酶(CAT)的活性。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠过氧化氢酶(CAT)水平。用纯化的过氧化氢酶(CAT)抗体包被微孔板,制成固相抗体

大鼠过氧化氢酶(CAT)酶联免疫分析

大鼠过氧化氢酶(CAT)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中过氧化氢酶(CAT)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠过氧化氢酶(CAT)水平。用纯化的大鼠过氧化氢酶(CAT)抗体包被微孔板,制成固相

滴定分析法(容量分析法)概述(四)

2.滴定管的种类    (1)酸式滴定管(玻塞滴定管)    酸式滴定管的玻璃活塞是固定配合该滴定管的,所以不能任意更换。要注意玻塞是否旋转自如,通常是取出活塞,拭干,在活塞两端沿圆周抹一薄层凡士林作润滑剂(或真空活塞油脂),然后将活塞插入,顶紧,旋转几下使凡士林分布均匀(几乎透明)即可,再在活塞尾

滴定分析法(容量分析法)概述(二)

(九)配制滴定液时的计算    举例:    例1  配制高锰酸钾滴定液(0.02mol/L)2000ml,应取KMnO4多少克?    解:m = C KMnO4V KMnO4M KMnO4 = 0.02×2000/1000×158.03 = 6.321g    例2:称取纯K2Cr2O7 0.1

滴定分析法(容量分析法)概述(一)

一、滴定分析法的原理与种类    1.原理    滴定分析法是将一种已知准确浓度的试剂溶液,滴加到被测物质的溶液中,直到所加的试剂与被测物质按化学计量定量反应为止,根据试剂溶液的浓度和消耗的体积,计算被测物质的含量。    这种已知准确浓度的试剂溶液称为滴定液。    将滴定液从滴定管中加到被测物质

滴定分析法(容量分析法)概述(三)

四、校正因子(F)1. 含义    校正因子  是表示滴定液的实测浓度是规定浓度的多少倍。    由于药典中滴定度是以滴定液的规定浓度来计算的,而在实际工作中所用滴定液的实测浓度不一定与规定浓度恰恰符合。所以在计算含量时,必须用校正因子(F)将滴定液的规定浓度时的滴定度校正为实测浓度时的滴定度。  

滴定分析法(容量分析法)概述(五)

(四)刻度吸管的使用方法    1.刻度吸管是由上而下(或由下而上)刻有容量数字,下端拉尖的圆形玻璃管。用于量取体积不需要十分准确的溶液。    2.刻度吸管有“吹”、“快”两种形式。使用标有“吹”字的刻度吸管时,溶液停止流出后,应将管内剩余的溶液吹出;使用标有“快”字的刻度吸管时,待溶液停止流出后

极谱分析法极谱分析法原理及于伏安分析法的比较

极谱分析法(polarography)与伏安分析法( voltammetry)是通过测量电解过程中所得到的电流-电压(或电位-时间)曲线来确定电解液中含被测组分的浓度,从而实现分析测定的电化学分析法,它他们与电解、库仑分析法的区别在于电解池中的两个电极的性质,其中一个电极的电位完全随外加电压的变化而

仪器分析法

物质相互作用时产生各种实验现象。仪器分析就是利用能直接或间接地表征物质的各种特性(如物理的、化学的、生理性质等)的实验现象,通过探头或传感器、放大器、分析转化器等转变成人可直接感受的已认识的关于物质成分、含量、分布或结构等信息的分析方法。也就是说,仪器分析是利用各种学科的基本原理,采用电学、光学、精

库伦分析法

  库仑分析法  Coulometric analysis  以测量电解过程中被测物质在电极上发生电化学反应所消耗的电量来进行定量分析的一种电化学分析 法。根据电解方式分为控制电位库仑分析法和恒电流库仑滴定法。①控制电位库仑分析法。在电解过程中,将工作电极电位调节到一个所需要的数值并保持恒定,直 到

恒电位库仑分析法恒电位库仑分析法

一、方法与装置      恒电位库仑分析法是在电解过程中控制工作电极电位相对于参比电极保持不变,并只有被测物质在电极上发生反应,当电解电流趋于零时,表示该物质已被完全电解,测量电解过程中消耗的电量,再按法拉第电解定律计算被测物质的含量。      恒电位库仑分析的仪器装置基本上和控制阴极电位电解法相

过氧化氢酶病毒感染、氧化损伤与CAT的作用

  病毒感染与氧化损伤密切相关:一方面,病毒感染引起ROS释放,ROS引起细胞膜磷脂层的脂质过氧化,这一过程生成的产物可以跨越细胞膜并引起膜转运和线粒体呼吸链的功能紊乱。另一方面,感染使吞噬细胞活化并释放前氧化性细胞因子,如TNF和IL-1。因此,ROS通常被视为病毒性疾病病理进程中引起细胞损伤的元

彗星分析法(单细胞凝胶电泳分析法)

如果我们能阻止其中的任何一个步骤,癌细胞便无法形成。因此,探测致癌物质的技术与癌细胞的及时发现就显得尤其重要!然而截至目前为止,科学家们仍无法研究出一种简易基因测试法或综合的方法来检测出可能的致癌物。因此,致癌物对DNA的作用仍是癌症研究的一个重要课题。遗传毒物学为一专门研究化学及各类物质对人体遗传

彗星分析法[单细胞凝胶电泳分析法]

治愈癌症(cancer)是一个难题,长期以来研究人员们一直在苦苦探索。我们目前知道,致癌的过程与许多因素有关,但如果我们能阻止其中的任何一个步骤,癌细胞便无法形成。因此,探测致癌物质的技术与癌细胞的及时发现就显得尤其重要!然而截至目前为止,研究人员们仍无法研究出一种简易基因测试法或综合的方法来检测出

利用CAT技术测定聚四氟乙烯涂层与基材的粘结强度

  自从1938年被偶然发现以来,聚四氟乙烯(以下简称PTFE)因其独特的材料特性而得到广泛应用。它具有很高的化学抗性,可以在很大的温度范围内使用,不易燃,具有良好的滑动性能即低摩擦系数,等等。除了航空航天、计算机等行业外,PTFE还广泛的用于密封,绝缘体,服装,工业过滤(阻止特殊物质),以及可见的

质谱分析法

先将中性分子离子化,再顺次分离和记录各种离子的质荷比和丰度先将中性分子离子化,再顺次分离和记录各种离子的质荷比和丰度( 强度),从而实现分析目的的一种分析方法。