细菌中制备基因组DNA实验——氯化铯法

实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。实验材料细菌试剂、试剂盒溴化乙锭氯化铯丁醇仪器、耗材离心机巴斯吸管摇床实验步骤1. 培养100 ml 细菌培养物至饱和状态,用JA-20转子4 000 g 离心10 min。2. 用9.5 ml 的TE缓冲液重悬沉淀。3. 加0.5 ml 10%的SDS和50 ul 20 mg/ml 的蛋白酶K,混合,于37℃温育1 h。4. 加1.8 ml 5 mol/l NaCl,充分混合,加入1. 5 ml CTAB/NaCl溶液,混合,于65℃温育20 min。 5. 加等体积的氯仿/异戊醇抽提,室温下6 000 g 离心10 min,用宽口吸管将上清液......阅读全文

细菌中制备基因组DNA实验——氯化铯法

实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿/异戊醇抽提分离蛋白质,得到的DNA溶液经乙醇沉淀使DNA从溶液中析出。实验材料细菌试剂、试剂盒溴化乙锭氯化铯丁醇仪器、耗材离心机巴斯吸管摇床实验步骤1.  培养100 ml

植物组织制备基因组DNA实验——氯化铯法

利用基因组DNA较长的特性,可以将其与细胞器或质粒等小分子DNA分离。在提取过程中,染色体会发生机械断裂,产生大小不同的片段,因此分离基因组DNA时应尽量在温和的条件下操作,如尽量减少酚/氯仿抽提、混匀过程要轻缓, 以保证得到较长的DNA。实验方法原理加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即

氯化铯溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA

连续梯度法 不连续梯度法             实验方法原理 用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法,取决于与线状 DNA 和闭环 DN

原子吸收测钠时,为什么要加氯化铯

加入氯化铯是为了抑制电离效应!在溶液中检测?那要原子化器干什么??加氯化铯是为了抑制钠原子电离。

原子吸收测钠时,为什么要加氯化铯

加入氯化铯是为了抑制电离效应!在溶液中检测?那要原子化器干什么??加氯化铯是为了抑制钠原子电离。

氯化铯溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA实验

实验方法原理 用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法,取决于与线状 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。实验材料 粗制质粒试剂、试剂盒 CsCl CsCl 再分带溶液乙醇溴化乙锭 石蜡油仪器、耗材 皮下注射针头折光仪一次性注射器实验步骤 一、材料1.

原子吸收测钠时,为什么要加氯化铯

加入氯化铯是为了抑制电离效应! 在溶液中检测?那要原子化器干什么?? 加氯化铯是为了抑制钠原子电离。

氯化铯溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA实验(一)

用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法,取决于与线状 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。连续梯度法实验方法原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法,取决于与线状 DN

氯化铯溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA实验(二)

实验方法原理通过不连续或预先形成的氯化铯(CsCl)梯度离心,可在离心管中获得含有不同浓度 CsCl 的溶液分层,样品位于中层(三级梯度法)或底层(两级梯度法)。实验材料粗制质粒试剂、试剂盒CsCl溴化乙锭TE仪器、耗材皮下注射针头折光仪一次性注射器实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液CsCl ( 固

异硫氰酸胍/氯化铯超速离心法制备-RNA-实验

            实验材料 细胞和组织 试剂、试剂盒 氯仿 氯化铯溶液 二硫苏糖醇 EDTA

异硫氰酸胍/氯化铯超速离心法制备-RNA-实验

这种方法源自于对 Chirgwin 等(1979) 所拟方案的修改。对 Chirgwin 等所规定的试剂,许多试剂盒中常用,且用于分离和纯化 RNA 的试剂也是常见的。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。实验材料细胞和组织试剂、试剂盒氯仿氯化铯溶液二硫苏糖醇EDTA乙醇异硫

异硫氰酸胍/氯化铯超速离心法制备-RNA-实验

实验材料 细胞和组织试剂、试剂盒 氯仿氯化铯溶液二硫苏糖醇EDTA乙醇异硫氰酸胍裂解缓冲液异丙醇N-月桂酰肌氨酸氯化锂液氮β-巯基乙醇苯酚仪器、耗材 离心机和转子研钵和杵超速离心管实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂氯仿氯化铯溶液,5.7mol/L(5.7mol/L 氯化铯,25 mmol/L

甘油磷酸钠的含量测定方法

钠精密量取本品2ml,置200ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取10ml,置50ml量瓶中,用水稀释至刻度,摇匀,精密量取2ml,置100ml量瓶中,加氯化铯溶液(取氯化铯63.34g,加水溶解,并稀释至1000ml)4.0ml,用水稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液;另精密称取在130℃干燥

用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验

经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。实验材料DNA 样品试剂、试剂盒

植物组织制备基因组DNA实验

氯化铯法 CTAB法             实验方法原理 加入一定量的异丙醇或乙醇,基因组的大分子DNA即沉淀形成纤维状絮团飘浮其中, 可用玻棒将其取出,而小分子DNA则

用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验

            实验方法原理 经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。 实验材料 DNA 样品

用离子交换层析法从DNA中去除溴化乙锭实验

实验方法原理 经过氯化铯梯度离心所纯化的 DNA 中的溴化乙锭可以通过离子交换层析法去除,随后则用乙醇沉淀去除氯化铯。实验材料 DNA 样品试剂、试剂盒 乙醇HClNaCl酚氯仿TETEN 缓冲液仪器、耗材 Dowex AG50W-X8实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液乙醇,HCl (1 mol/

密度梯度离心法概述

  〔1〕亦称平衡密度梯度离心法。用超离心机对小分子物质溶液,长时间加一个离心力场达到沉降平衡,在沉降池内从液面到底部出现一定的密度梯度。若在该溶液里加入少量大分子溶液,则溶液内比溶剂密度大的部分就产生大分子沉降,比溶剂密度小的部分就会上浮,最后在离心力和浮力平衡的位置,集聚形成大分子带状物。利用这

质粒DNA的大量制备实验

碱裂解法 氯化铯/溴化乙锭平衡离心法 层析法             实验方法原理 大量碱裂解方法不仅相当快捷可靠,而且可获得相当纯净的粗制DNA。煮沸法的大量制

工业循环冷却水中钾含量的测定

工业循环冷却水中钾含量的测定GB/T 14640-93Industrial circulating cooling water-Determination ofpotassium-Atomic absorption spectrometric method 原子吸收光谱法 1 主题内容与适用范围本标

工业循环冷却水中钾含量的测定

   工业循环冷却水中钾含量的测定   GB/T 14640-93   Industrial circulating cooling water-Determination of   potassium-Atomic absorption spectrometric method   原

细菌中制备基因组DNA实验

小量制备 氯化铯法             实验方法原理 提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液中消化分解蛋白质,再用酚和氯仿

复方氨基酸注射液(18AAⅠ)的含量测定方法

氨基酸取本品,用适宜的氨基酸分析仪或高效液相色谱仪进行分离测定;另取相应的氨基酸对照品,制成相应浓度的对照品溶液,同法测定。按外标法以峰面积计算各氨基酸的含量如不能同时测定色氨酸含量时,按以下方法测定。色氨酸照紫外-可见分光光度法(通则0401)测定供试品溶液精密量取本品2ml,置100ml量瓶中,

关于随体DNA的基本信息介绍

  随体DNA更广泛地是指染色体DNA和独立存在的小型DNA。  若将DNA放在氯化铯中,用平衡密度梯度离心,则按GC含量,在特定的密度部位形成带。采用该法将从细胞抽提的DNA分离,除主要的DNA带外,有时可出现小的带,后者就叫做随体DNA。有的随体DNA像细胞内的质环DNA那样是独立的分子,但也有

原子吸收分光光度法测定钾、钠离子的方法原理

火焰原子吸收分光光度法是根据某元素的基态原子对该元素的特征波长辐射产生选择性吸收来进行测定的分析方法。将降水试样喷入空气-乙炔火焰中,分别在波长766.4nm和589.0nm处测定钾、钠离子的吸光度,绘制标准曲线。由于钾、纳离子易电离,有干扰。因此在试样中加入消电离剂(氯化铯或硝酸铯)即可消除。木方

离心机的离心方法实际操作有几种形式

实际操作有几种形式:差速离心这种方法是选择不同转速的离心,分别分离各个不同组分。例如先用低速沉降大颗粒和上清液,在高速离心上清沉降中等颗粒,最后超速离心上清沉降小颗粒。采用逐级提高离心力分离上情液的方法,把不同大小的颗粒分开。这种方法比较简单,方便。分离的组份沉到管底,因此可以迅速浓缩所要的组份,减

细胞化学基础卫星DNA

卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度可以高达每分钟几万转)时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看到在

细胞化学词汇卫星DNA

卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在介质氯化铯中作密度梯度离心(离心速度可以高达每分钟几万转)时,DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化铯介质中,小的分子处于上层,大的分子处于下层。从离心管外看,不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析,可以看到在

落地式高速冷冻离心机分离生物大分子时梯度介质的选择

        落地式高速冷冻离心机分离生物大分子时,等密度梯度介质的选择范围很广,其中以碱金属盐和碘化梯度介质为主。        碱金属盐中用的zui多的是氯化铯和硫酸铯。氯化铯用于DNA等密度分离,有时用于密度屏障快速沉淀DNA。RNA几乎都用硫酸铯等密度分离。        碘化梯度介质有M

落地式高速冷冻离心机分离生物大分子时梯度介质的选择

落地式高速冷冻离心机分离生物大分子时,等密度梯度介质的选择范围很广,其中以碱金属盐和碘化梯度介质为主。碱金属盐中用的zui多的是氯化铯和硫酸铯。氯化铯用于DNA等密度分离,有时用于密度屏障快速沉淀DNA。RNA几乎都用硫酸铯等密度分离。碘化梯度介质有Metrizamide、Ny-codenz和Iod