聚丙烯酰胺凝胶中DNA的染色检测

与琼脂糖凝胶不同,聚丙烯酰胺凝胶灌制时不能加入溴化乙锭,因为此染料会影响丙烯酰胺的聚合。然而,电泳后可用溴化乙锭进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。由于聚丙烯酰胺会猝灭溴化乙锭的荧光,所以检测 DNA 的灵敏度降低。电泳后也可用核酸染料SYBR Gold ( Molecular Probes) 进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理与琼脂糖凝胶不同,聚丙烯酰胺凝胶灌制时不能加入溴化乙锭,因为此染料会影响丙烯酰胺的聚合。然而,电泳后可用溴化乙锭进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。由于聚 丙烯酰胺会猝灭溴化乙锭的荧光,所以检测 DNA 的灵敏度降低。电泳后也可用核酸染料SYBR Gold ( Molecular Probes) 进行聚丙烯酰胺凝胶的染色。它也不能在聚合过程中掺入到凝胶中,这样会妨碍 DNA 的迁移并使 DNA 条带变形。亚甲蓝染色检测的灵敏度低,但较之前两种染料价格低廉,也可选用。试剂、试......阅读全文

性染色质检测

实验方法原理 在间期细胞核中,女性X染色质和男性Y染色质均可用特殊染色法显示出来。女性的两个X染色体中的一个,在间期时的染色质呈异固缩(Heteropyconosis),呈深染的小体称Barr氏体。Barr氏体位于间期细胞核内面,呈三角形或半月形小体,易为碳酸复红或硫堇等染料着色。正常女性Barr氏

美蓝染色检测法

美蓝染色检测法: 1、用细胞因子处理靶细胞,在含100μl细胞培养液的检测孔中,每孔加0.02ml 25%戊二醛固定活细胞15分钟,用自来水缓缓洗去死细胞和固定液。 2、每孔加0.1ml 0.05%美蓝染液,染色20分钟,用自来水缓缓冲净染液,晾干。 3、每孔加0.2ml 0.33mol

中性红染色检测法:

中性红染色检测法: 1、用细胞因子处理靶细胞,在含100μl细胞培养液的检测孔中,每孔加50μl 5%中性红染液。继续培养2小时。 2、小心倒去培养液。用200μl Hanks液洗涤细胞1次。小心倒去培养液,减少细胞丢失。 3、每孔加100μl脱色液,在摇床中轻轻摇晃溶解30分钟。

生化检测项目糖原染色介绍

糖原染色介绍:  细胞内含1,2-乙二醇基的多糖类经过碘酸氧化后产生醛基,与特殊染液作用,使无色品红变成红色化合物,沉淀于胞质之中。红色的深浅与细胞中起反应的1,2-乙二醇基的量呈正比。糖原染色正常值:  正常情况下,红细胞系统的原、幼红细胞和成熟红细胞;粒细胞系统的原粒细胞、原单核细胞和大多数淋巴

基因检测染色体分析

  染色体分析直接检测染色体数目及结构的异常,而不是检查某条染色体上某个基因的突变或异常。通常用来诊断胎儿的异常。  常见的染色体异常是多一条染色体,检测用的细胞来自血液样本,若是胎儿,则通过羊膜穿刺或绒毛膜绒毛取样获得细胞。将之染色,让染色体凸显出来,然后用高倍显微镜观察是否有异常。

无需染色的细胞活力检测

细胞活力是总细胞中活细胞所占的百分比,其中台盼蓝染色方法最常见。台盼蓝可穿透变性的细胞膜,与解体的DNA结合,使其着色,而活细胞能阻止染料进入细胞内,故可以鉴别死细胞与活细胞。激光全息细胞成像及分析系统可以实时监测细胞死亡过程,以及通过图像进行记录。 全息技术无需荧光和染料标记就可以得到细胞形态学数

染色体结构显示和检测

染色体结构显示和检测1)  染色体显带显Q带法1.      漂洗:取经过干热预处理或已老化的染色体标本,置于pH6.0缓冲液中浸5~10分钟。2.      染色:浸入pH6.0的GM或QD染液中5~10分钟。3.      漂洗:浸入新鲜pH6.0缓冲液中漂洗两次,每次5分钟。4.      观

细胞凋亡(TUNEL,TUNEL染色)检测技术

细胞凋亡是指为维持内环境稳定,  生物体内细胞在特定的内源或外源信号诱导下,其死亡途径被激活,并在有关基因的调控下发生的程序性死亡过程。细胞凋亡是程序性死亡过程的一种主要形式,它涉及染色质凝聚和外周化、细胞质减少、核片段化、细胞质致密化、与周围细胞联系中断、内质网与细胞膜融合,最终细胞片段化形成许多

关于染色体易位检测的检测方法介绍

  1.系谱分析法  系谱分析法不仅可以确定患者是否有基因病,而且对确定遗传方式也有一定作用。该分析法以已被确认的患者为线索,对系谱作回顾性调查,追踪各个家族成员的情况,包括亲属间相互关系、性别、年龄、健康状况、婚育史、生育史等,综合所有信息运用国际通用的系谱符号绘制成系谱图。根据绘制出的图解和各种

关于检测染色体和染色体组畸变—染色体畸变试验的基本介绍

  染色体畸变试验是检测化学物质影响染色体数量和结构的基本方法。在化学物质安全性评价中常选体外CHL细胞染色体畸变、精原细胞染色体畸变试验等检测化学物质对染色体的影响。为了准确观察诱发的畸变频数,本试验收获细胞的时间应尽量提前至大多数细胞处于染毒后第1次有丝分裂时(Tucker,1996)。对于染色

微生物检测常见细菌染色方法

细菌涂片及细菌染色是微生物学的基本技术,也是观察细菌最简单且行之有效的方法,是微生物检测人员常用技能之一。通常情况下,由于细菌个体较小,较透明或半透明,如未经染色往往不以观察识别。因此借助于染色法可以使细菌着色,与视野背景形成鲜明对比,从而易于在显微镜下进行观察。微生物检测常见的细菌染色方法包括简单

碱性磷酸酶的染色检测

实验概要了解碱性磷酸酶的染色检测方法。实验原理本试验是一个酶组织化学试验,酶组织化学是在不破坏组织细胞的条件下,检测酶的存在,定位与活性的学科,即在酶的存在,分布及其用在显微镜下变成可见的。生命是有序的,包括时间的有序及其空间的有序。其中美的空间有序性在于其细胞组织结构的精确位置,各种酶的自己的位置

斑点免疫金银染色检测牛结核血清抗体

实验概要本实验应用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)检测了牛结核血清抗体。主要试剂1.抗原牛结核PPD。2.血清待检血清、标准结核阳性血清和结核阴性血清。3.硝酸纤维膜孔径0.45µm。4.氯化金(优质)5.0.2Mol/L PB液6.0.05Mol/L Tris—HCl缓冲液7.硝酸银显影液(现

关于染色体易位检测的基本介绍

  染色体易位检测是指通过系谱分析、细胞遗传学检查和基因诊断等方法对因染色体易位导致的染色体结构异常进行分析和判定。该检测方法对易位型染色体疾病的早期筛查、诊断及预后具有重要意义。

支原体的检测实验_荧光染色法

实验方法原理荧光显微镜检查法,荧光染料用 Hoechst 33258,它是一种能与DNA 特异结合的荧光染料。支原体内含有DNA,能着色,是现有检测法中最方便和最有效的一种。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks醋酸甲醇蒸馏水仪器、耗材盖片显微镜实验步骤1.  标本盖片培养细胞汇合前从瓶中取出(如细胞已

DNA的化学检测项目介绍染色体

染色体介绍:  常用的正常和异常染色体的命名、缩写和符号(ISCN,1978)如下:  A-G成     染色体组;  1-22      常染色体序号;  X,Y      性染色体;  /         用于分开嵌合体不同的细胞系;  +,二     放在常染色体号或组的符号之前时,表示整个染

酸性靛兰染色检测种子活力实验

实验方法原理活种子胚细胞的原生质膜具有半透性,具有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入活细胞内,胚部不能被染色。而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可以自由进入细胞内而将死胚染色(如酸性靛兰 、红墨水等),故可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。实验材料大麦大豆试

斑点免疫金银染色检测牛结核血清抗体

实验概要本实验应用斑点免疫金银染色(Dot-IGSS)检测了牛结核血清抗体。主要试剂1.抗原牛结核PPD。2.血清待检血清、标准结核阳性血清和结核阴性血清。3.硝酸纤维膜孔径0.45µm。4.氯化金(优质)5.0.2Mol/L PB液6.0.05Mol/L Tris—HCl缓冲液7.硝酸银显影液(现

酸性靛兰染色检测种子活力实验

实验方法原理 活种子胚细胞的原生质膜具有半透性,具有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入活细胞内,胚部不能被染色。而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可以自由进入细胞内而将死胚染色(如酸性靛兰 、红墨水等),故可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。实验材料 大

实验室检验检测工具染色缸

染色缸,它的造型分为方形、圆形、小型圆形三种。方形:是一只偏长方形的玻璃缸,缸内壁两侧有十对凹凸槽,用来插放10 片25.4mm*76mm 的载玻片用。缸的上面有一只四边凸出的平面玻璃盖,用以与缸的上边沿相配,防止灰尘污染。圆形:是一只口为圆形,体为长方形垂直宽底的玻璃缸,缸内体积亦是长方形,壁的两

酸性靛兰染色检测种子活力实验

实验方法原理活种子胚细胞的原生质膜具有半透性,具有选择吸收外界物质的能力,一般染料不能进入活细胞内,胚部不能被染色。而丧失生命力的种子,其胚部细胞原生质膜丧失了选择吸收能力,染料可以自由进入细胞内而将死胚染色(如酸性靛兰 、红墨水等),故可根据种子胚部是否被染色来判断种子的生命力。实验材料大麦

亚甲基蓝染色剂的检验检测

干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过18.0%(通则0831)。炽灼残渣不得过1.2%(通则0841)。锌盐取本品0.10g,加硫酸数滴湿润后,炽灼残渣中加稀盐酸5mL与水5mL,煮沸,加氨试液5mL,滤过,滤液中加硫化铵试液2滴,不得发生沉淀或浑浊。砷盐取本品0.20g,加氢氧化钙

糖类染色实验——糖原染色

实验方法原理糖原由多糖衍化而来,是单纯的多糖。糖原易溶于水,所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原,常用高碘酸(periodic acid)-Shiff 反应(PAS)染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠(偏重亚硫酸钠)双重蒸馏水

生化检测项目过氧化酶染色介绍

过氧化酶染色介绍:  骨髓或血细胞中,有的含过氧化物酶。该酶可分解H2O2,产生新生态氧。新生态氧可将无色的联苯胺氧化为联苯胺蓝,进而变成棕黑色化合物,沉淀于胞质内。过氧化酶染色正常值:  正常人群粒细胞呈阳性(胞质内含蓝绿色或棕褐色颗粒);单核细胞呈阴性或弱阳性;幼红细胞、浆细胞、巨核细胞、淋巴细

轮状病毒使用染色法检测的么?

  轮状病毒是引起婴幼儿腹泻的主要病原体之一,其主要感染小肠上皮细胞,从而造成细胞损伤,引起腹泻。  轮状病毒(Rotavirus,简称RV)是一种双链核糖核酸病毒,属于呼肠孤病毒科。它是婴儿与幼儿腹泻的单一主因,几乎世界上每个大约五岁的小孩都曾感染过轮状病毒至少一次。然而,每一次感染后人体免疫力会

DNA的化学检测项目介绍Y染色质

Y染色质介绍:  男性Y染色体长臂远侧由异染色质构成,如用荧光染料染色时,可出现强荧光。Y染色质正常值:  可数100个细胞,计算阳性率,男胎的Y小体>50%,大于10%判为男胎;女胎的Y小体占0%-1%,小于5%则判为女胎。Y染色质临床意义:  临床上检查Y小体,也关联到X连锁遗传病,如血友病等只

生化检测项目α茶酚醋酸酯酶染色介绍

α-茶酚醋酸酯酶染色介绍:  α醋酸萘酚酯酶为白细胞中的非特异性酯酶,能将基质液中的α醋酸萘酚水解,产生α萘酚,再与重氮盐偶联,生成灰黑色不溶性沉淀,定位于酶活性所在的胞质内。α-茶酚醋酸酯酶染色正常值:  原单核细胞、幼单核细胞、单核细胞、巨核细胞、血小板为阳性反应;各期粒细胞、幼红细胞、淋巴细胞

简述染色体易位检测的临床意义

  染色体易位是指2条非同源染色体同时发生断裂,所形成的断裂片段移至另一条染色体断端,并连接形成新染色体,是染色体异常的一种体现,多见于淋巴造血系统恶性肿瘤和骨与软组织肉瘤中。软组织肉瘤种类很多,形态各异,细胞遗传学研究显示多种软组织肉瘤存在特征性的染色体易位。这些染色体易位引发相应染色体上的基因发

Cell发布突破性染色质检测技术

  来自美国麻省大学医学院的研究人员开发出了一项新技术,可以提供真核生物基因组的详细三维(3-D)图像,这有可能帮助科学家们解答一些有关染色质结构的关键问题。在发表于《细胞》(Cell)杂志上的研究论文中,这一称作为Micro-C的新技术使得研究人员能够以核小体分辨率来分析染色体折叠,填补了以往一些

如何检测是否有基因或染色体突变

1 如果是染色体畸变,你可以用正常细胞的染色体与药物处理过的细胞的染色体对照进行检查,大致确定好事那个染色体后用FISH技术来检测染色体2 如果是基因发生了点突变,首先要明确是那个基因会有发生突变的趋势,采用SSCP(单链构象多态性)确定是否发生有突变,然后用测序法验证3 如果已知该药物所导致的突变