用于LCM的片子的HE染色实验

在进行 LCM 之前,切好的组织样品要固定、染色,必需的话还要脱水。对内脏和淋巴结组织作者采用经典的 HE 染色。一旦片子准备好,LCM 应当在 45 min 内进行。所有的试剂、试管以及其他的用于 RNA 提取的材料应当在染色前准备就绪。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇曙红Y梅耶苏木精超纯水二甲苯仪器、耗材圆锥管镊子破璃染缸实验步骤一、材料1.缓冲液、溶液和试剂100%乙醇70%乙醇曙红Y(Sigma)梅耶苏木精(Sigma)DEPC处理的超纯水(BiotecxLaboratories,储存于4°C)二甲苯(Sigma)2.特殊设备圆锥管,50ml镊子破璃染缸(用于二甲苯的盛放)3.细胞和组织来自方案1的片子二、方法染色应尽可能和LCM操作之间安排紧凑,尤其是H20和最后一步的乙酵一定要新鲜。要时刻记住降解的RNA数量与固定后样品在水相中的时间成正比(为了得到高质量的RNA,最好不......阅读全文

用于-LCM-的片子的-HE-染色实验

试剂、试剂盒 乙醇曙红Y 梅耶苏木精超纯水二甲苯仪器、耗材 圆锥管镊子破璃染缸实验步骤 一、材料1.缓冲液、溶液和试剂100%乙醇70%乙醇曙红Y(Sigma)梅耶苏木精(Sigma)DEPC处理的超纯水(BiotecxLaboratories,储存于4°C)二甲苯(Sigma)2.特殊设备圆锥管,

用于-LCM-的片子的-HE-染色实验

            试剂、试剂盒 乙醇 曙红Y 梅耶苏木精 超纯水 二甲苯 仪器、耗材

用于-LCM-的片子的-HE-染色实验

在进行 LCM 之前,切好的组织样品要固定、染色,必需的话还要脱水。对内脏和淋巴结组织作者采用经典的 HE 染色。一旦片子准备好,LCM 应当在 45 min 内进行。所有的试剂、试管以及其他的用于 RNA 提取的材料应当在染色前准备就绪。本实验来源于 PCR 实验指南(第二版),作者:种康,瞿礼嘉

LCM-实验

            实验方法原理 采用激光切割等技术将生物样品片子等不易观察和检测的样品进行处理的技术,具有简单快捷,效率高等特点。 实验材料 RNaseAway

LCM-实验

LCM实验对(1)切片的病理分析(2)病变程度的分析(3)临床样本收集与参考等都有应用。实验方法原理采用激光切割等技术将生物样品片子等不易观察和检测的样品进行处理的技术,具有简单快捷,效率高等特点。实验材料RNaseAway试剂、试剂盒RNaseAway仪器、耗材胶带LCM 棺子去湿器分液器镊子LC

LCM-实验

试剂、试剂盒 RNaseAway仪器、耗材 胶带LCM 棺子去湿器分液器镊子LCM 系统 Pix Cell Ⅱ无 RNA 酶的管子实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂RNaseAway(7000,MolecularBioProducts,SanDiego,CA)2. 特殊设备.胶带LCM 棺子

石蜡制片法(用于免疫组织化学,HE染色)

 石蜡制片法是将材料经固定、脱水、透明、浸蜡后包埋在石蜡里面进行切片的方法。此法适用范围,制片手段完备,能将材料切成极薄的片子(可切至2-8微米左右),并能制成连续的片子,这是其它制片法难以达到的,因此在光学显微镜的制片技术上它是最常用的一种方法。除了一些经不住石蜡切片法中所应用的各种药剂处理的材料

苏木精伊红(HE)染色

染液制备:1. 苏木精染液(1) 称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中;(2) 加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液;(3) 母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存,但每次染色前宜过滤,去除氧化膜;2. 伊

苏木精伊红(HE)染色

染液制备:1.      苏木精染液(1)    称取0.5g苏木精、5.0g铵矾或钾矾和0.1g碘酸钠加温溶于70ml蒸馏水中;(2)    加入30ml甘油和2ml冰乙酸充分混匀后过滤即成母液;(3)    母液可长期保存。用蒸馏水以1:20稀释母液即成工作液。工作液也较长时间储存,但每次染色前

HE染色试剂——伊红配方

1、曙红(水溶性)配方:曙红 (水溶性)2.5 g;蒸馏水500 ml水溶性依红酸化配制:将曙红溶于蒸馏水中,然后加浓盐酸10毫升,充分搅拌,静置过夜后过滤。过滤后的沉淀用蒸馏水冲洗二次,再过滤;将沉淀物连同滤纸一起放入温箱内干燥,加95%乙醇1000毫升,配成饱和液。使用前再用95%的乙醇 1:1

关于HE染色结果的判断介绍

  1、实验结果  细胞核被苏木精染成鲜明的蓝色,软骨基质、钙盐颗粒呈深蓝色,粘液呈灰蓝色。细胞浆被伊红染成深浅不同的粉红色至桃红色,胞浆内嗜酸性颗粒呈反光强的鲜红色。胶原纤维呈淡粉红色,弹力纤维呈亮粉红色,红血球呈橘红色,蛋白性液体呈粉红色。  着色情况与组织或细胞的种类有关,也随其生活周期及病理

关于HE染色的基本信息介绍

  苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核酸着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚胎学、

HE染色石蜡切片制作的基本过程

HE染色石蜡切片制作的基本过程:1、取材与固定从人或动物新鲜尸体上取下组织块(一般厚度不超过0.5厘米)投入预先配好的固定液中(10%福尔马林,Bouin氏固定液等)使组织、细胞的蛋白质变性凝固,以防止细胞死后的自溶或细菌的分解,从而保持细胞本来的形态结构。2、脱水透明一般用由低浓度到高浓度酒精作脱

常用HE染色试剂配制方法

 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining) ,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。  一、苏木素  (1) Harris苏木素液  配方: labdd.com  苏木精1 g ;无水乙醇10 ml;蒸馏水200 ml;钾明矾20g;HgO 0.5 g  

常用HE染色试剂配制方法

苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先将苏木精溶于无水乙醇中,备

什么是巴氏染色?什么是HE染色?

  (1)巴氏染色法是脱落细胞染色中最好的染色方法。其适用于上皮细胞及间皮组织的标本。是阴道脱落细胞检查中最常用的染色方法。该染色法不但具有显示细胞核结构清晰,分色明显,透明度好,胞浆受色鲜艳等特点,而且所染标本不易脱色,可长久保存。  (2)HE染色(又称苏木精-伊红染色),是组织学最常用的染色方

HE染色的方法步骤及注意事项

一、实验步骤:(1)样品制备:对于贴壁生长细胞,胰酶消化,调整细胞浓度约1×105/ml,滴加于盖玻片上(置于6孔板中),培养相应时间后,取出细胞爬片,用PBS 洗涤3次。(2)样品固定:95%乙醇固定20min,PBS洗涤2次,每次1min。(3)染核:苏木素染液染色2-3min,自来水洗涤。(4

关于HE染色的基本原理介绍

  易于被碱性或酸性染料着色的性质称为嗜碱性( basophilia )和嗜酸性( acidophilia );而对碱性染料和酸性染料亲和力都比较弱的现象称为中性(neutrophilia)。  构成组织内蛋白质的氨基酸的种类很多,它们有不同的等电点。在普通染色法中,染色液的酸碱度为pH6左右,细胞

HE和特殊染色技术资料

HE染色苏木精 — 伊红染色法 ( hematoxylin-eosin staining ) ,简称HE染色法 ,石蜡切片技术里常用的染色法之一 。苏木精染液为碱性 ,主要使细胞核内的染色质与胞质内的核糖体着紫蓝色 ;伊红为酸性染料 ,主要使细胞质和细胞外基质中的成分着红色 。HE染色法是组织学、胚

光学显微镜检测肿瘤细胞形态实验——HE染色法

实验方法原理HE染色也称苏木精-伊红染色,它是常规染色。苏木精是一种天然染料,它本身并不能染色,在经氧化后变成苏木红才是真正的染料,苏木对细胞核的亲和力并不强,而在媒染剂的帮助下才能较好显示细胞核,此时细胞核呈红色,只有在碱性环境中,苏木才变成蓝色。伊红Y是人工全盛染料,它可能是通过渗透或弥散作用完

常用HE染色试剂配制方法临检基础

常用HE染色试剂配制方法: 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先

LCM-PROTOCOLS

Slide SectioningParaffin blocks- For DNA analysis:Special LCM processing schedule is followed.The water bath is cleaned using RNAse Zap™, rinsed thoro

冰冻切片实验技巧(三)-学会看片子

这里指的是片子滑过刀片时就要辨别出质量的好坏,如果到镜下才发现片子的缺陷那就无法挽救。1. 观察片子的厚薄尽管冰冻切片机可以设置厚度,但人为辨别片子的厚度是否合适仍然很重要。片子太薄看起来象半透明的镜纸,片子太厚看起来混浊、柔性差,对我来说,5-6um的片子较合适,象一张薄的打印纸。 2. 片子破裂

HE-染色和免疫组化染色可以同时做吗

免疫组化是利用抗原与抗体间的特异结合原理和特殊的标记技术,对组织和细胞内的特定抗原、抗体进行定位、定性、定量的一们技术。我们都是先进行免疫组化,在DAB染色后进行HE染色。既能看到免疫组化的结果,又能看到细胞的形态,CD34+免疫组化染色后是棕色的颗粒,效果很好。 1)做免疫组化的片子最好不要同时做

LCM显微切割

这段时间做的LCM显微切割少量组织,提取ng量级RNA的过程奉上。此类RNA可以经两轮扩增后上样进行基因芯片的研究;或直接作为模板进行RT-PCR的研究。虽然过程复杂一些,目前看效果还是不错。 标本来自新鲜的动物或人体的组织标本,取材后液氮速冻后,-80℃存放备用。 标本冰冻切片的要求:

LCM显微切割

这段时间做的LCM显微切割少量组织,提取ng量级RNA的过程奉上。此类RNA可以经两轮扩增后上样进行基因芯片的研究;或直接作为模板进行RT-PCR的研究。虽然过程复杂一些,目前看效果还是不错。 标本来自新鲜的动物或人体的组织标本,取材后液氮速冻后,-80℃存放备用。 标本冰冻切片的要求: 1.每例标

Laser-Capture-Microdissection-(LCM)

This method was successful in our lab using prostate tissue and for our specific objectives. Investigators must be aware that they will need to tailor

Protocols-for-LCM-preparation-and-analysis

Protocols for LCM preparation and analysis I. Preparation, LCM and RNA/DNA extraction of Frozen Tissue SectionsA. EmbeddingB. CuttingC. StainingII. Pr

关于HE染色必须知道的真相:数据指标是唯一可用的吗?

目前,关于肠道的研究如火如荼,在文章或报告中我们经常能看到如下图结果和方法,这就是我们经常用的石蜡切片后进行HE染色,并测量绒毛高度、隐窝深度、以及计算绒毛高度和隐窝深度比,也有测量绒毛或隐窝数量等。这些指标经常用作肠道黏膜屏障功能或反映肠道健康的评价指标,那么这些指标就是唯一可以用的吗?答案当然是

HE琼脂

成分  脙胨     12g  牛肉膏    3g  乳糖     12g  蔗糖     12g  水杨素    2g  胆盐     20g  氯化钠    5g  琼脂     18~20g  蒸馏水           1000mL  0.4%溴麝香草酚蓝溶液    16mL  Andrad