用于LCM的片子的HE染色实验
在进行 LCM 之前，切好的组织样品要固定、染色，必需的话还要脱水。对内脏和淋巴结组织作者采用经典的 HE 染色。一旦片子准备好，LCM 应当在 45 min 内进行。所有的试剂、试管以及其他的用于 RNA 提取的材料应当在染色前准备就绪。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇曙红Y梅耶苏木精超纯水二甲苯仪器、耗材圆锥管镊子破璃染缸实验步骤一、材料1.缓冲液、溶液和试剂100%乙醇70%乙醇曙红Y(Sigma)梅耶苏木精（Sigma)DEPC处理的超纯水(BiotecxLaboratories，储存于4°C)二甲苯(Sigma)2.特殊设备圆锥管，50ml镊子破璃染缸（用于二甲苯的盛放）3.细胞和组织来自方案1的片子二、方法染色应尽可能和LCM操作之间安排紧凑，尤其是H20和最后一步的乙酵一定要新鲜。要时刻记住降解的RNA数量与固定后样品在水相中的时间成正比（为了得到高质量的RNA，最好不......阅读全文
亚太15国批准HE4用于卵巢癌早期诊断
HE4作为卵巢癌的血清标志物，可用于诊断卵巢癌。卵巢癌是妇科常见且死亡率较高的肿瘤之一，在欧美等地区卵巢癌发病率高达十万分之十五。卵巢癌因早期临床症状不明显极易造成漏诊与误诊。来自美国国立癌症研究所的报告指出，近20年来卵巢癌的5年生存率一直徘徊在较低水平，而5年
革兰氏染色的实验流程
1、 取载玻片用纱布擦干，载玻片的一面用marker笔画一个小圈（用来大致确定菌液滴的位置）。涂菌的部位在火焰上烤一下，除去油脂。 2、 涂片： 液体培养基：左手持菌液试管，在酒精灯火焰附近5cm左右打开管盖；右手持接种环在火焰中烧灼灭菌，等冷却后从试管中沾取菌液一环，在洁净无脂的载玻片上涂
培养细胞的染色实验
Giemsa染色法 苏木精伊红染色法 Feulgen染色法 吖啶橙染色荧光观察法 实验方法原理 Giemsa 染色是最常用的方法
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理G＋菌细胞壁肽聚糖含量多，结构致密，脂质少，乙醇不易渗入脱色；G－菌细胞壁肽聚糖含量少，结构疏松，脂质多，乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G＋菌菌体含有大量核糖核酸镁盐，能与结晶紫、碘牢固结合，使乙醇不易将其脱色；G－菌菌体核糖核酸镁盐含量少，容易被乙醇脱色。G＋菌等电点比G－菌低，在同样P
线粒体的活体染色实验
实验方法原理活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色，而在周围的细胞质中染料被还原，成为无色状态。实验材料兔子试剂、试剂盒显微镜手术器材解剖盘平皿载玻
细菌的革兰氏染色实验
实验方法原理 G＋菌细胞壁肽聚糖含量多，结构致密，脂质少，乙醇不易渗入脱色；G－菌细胞壁肽聚糖含量少，结构疏松，脂质多，乙醇容易溶解脂质而渗入脱色。G＋菌菌体含有大量核糖核酸镁盐，能与结晶紫、碘牢固结合，使乙醇不易将其脱色；G－菌菌体核糖核酸镁盐含量少，容易被乙醇脱色。G＋菌等电点比G－菌低，在同样
活体染色的实验步骤
1、活细胞的检测一：台酚蓝排除法取一滴细胞悬液，与一滴2%台酚蓝溶液混合，放盖玻片，静置3分钟，显微镜下观察染色情况。活细胞不着色，死细胞呈蓝色。计算活细胞的百分比。2、活细胞的检测二：中性红法1）在小离心管中，用Hanks液对1%中性红水溶液作10倍稀释，1500rpm离心7分钟，取上清液置另一干
糖类染色实验——糖原染色
实验方法原理糖原由多糖衍化而来，是单纯的多糖。糖原易溶于水，所以用特殊的 Carnoy 固定液或无水乙醇直接固定才能较好地保存糖原，常用高碘酸（periodic acid）-Shiff 反应（PAS）染色法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒高碘酸蒸馏水碱性复红盐酸焦亚硫酸钠（偏重亚硫酸钠）双重蒸馏水
wb压出的片子条带都是黑的是怎么回事
出现黑点和黑斑，原因：膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合，解决办法：封闭牛奶一定要纯，封闭结束之后要洗，我们常常是等到要封闭的时候发现没有牛奶，然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置，配的匆忙的时候往往不管是否已经完全溶解。如果没有完全溶解的情况下加牛奶倒膜上，会导致很多不溶性颗粒附着在膜上，这就
wb压出的片子条带都是黑的是怎么回事
出现黑点和黑斑，原因：膜上其他部位与一抗或者二抗非特异性结合，解决办法：封闭牛奶一定要纯，封闭结束之后要洗，我们常常是等到要封闭的时候发现没有牛奶，然后匆匆忙忙用PBST/TBST配置，配的匆忙的时候往往不管是否已经完全溶解。如果没有完全溶解的情况下加牛奶倒膜上，会导致很多不溶性颗粒附着在膜上，这就
培养细胞的染色实验——Giemsa染色法
实验方法原理Giemsa 染色是最常用的方法之一，它简便、快速，适用于多种细胞和染色体染色。试剂、试剂盒Giemse甘油甲醇Sorensen仪器、耗材滴管玻璃片实验步骤1. 染液制备（1）称Giemse粉0.5 g、甘油22 ml，在研钵内先用少量甘油与Giemsa充分混合，研磨至无颗粒；（2）再
培养细胞的染色实验——Feulgen染色法
实验方法原理此染色法为Feulgen早在1924年提出的一种鉴别细胞中DNA的组织化学方法。细胞中的DNA在60 ℃用1 N HCl酸解离脱氧核糖核酸，使嘌呤碱基与糖苷犍破坏，嘌呤碱脱掉，脱氧核糖的中的醛基游离；醛基能与Schiff试剂相结合，形成一种紫色的复合物。本方法中酸的离解根重要，若温度过低
组织微阵列的制作
实验概要本文介绍了组织微阵列(TMAs)的制作原理及基本操作流程。实验原理组织微阵列原理是借鉴计算机平行分析的思维 ,对生物信号进行平行分析。利用微点阵技术 ,借助于机械手将成千上万的组织片点阵固定于固相载体上,可进行常规 HE染色 ,也可以与标记的样品进行聚合酶链反应、荧光原位杂交、免疫组
冷冻组织及切片的准备实验
为了获得较好的结果，应当用新鲜的组织，因为在-80°C 中保存超过 24 h 的样品，其RNA 的产量和完整性将大打折扣。尽管有几个实验小组曾经报道用 LCM 技术从石蜡包埋的组织中获得了没有降解的 RNA, 但作者还是推荐使用冷冻的组织块。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰磷酸盐缓冲液（PBS) Tek OCT 组织复合物仪器、耗材 封闭容器烧杯 恒冷装置 解剖工具 平盘组织模子载玻片刀片实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂丙酮蒸馏水干冰磷酸盐缓冲液（PBS)Tek OCT 组织复合物（Sakura Finet
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织 试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰 磷酸盐缓冲液（PBS
JCAD通过抑制LATS2激酶活性促进非酒精性脂肪肝向肝癌的...
JCAD通过抑制LATS2激酶活性促进非酒精性脂肪肝向肝癌的发展非酒精性脂肪肝（NAFLD）是一种由于代谢紊乱引起的肝炎，也是肝癌（NASH-HCC）发生的重要来源之一。但是，对于NAFFLD如何向NASH-HCC发展的分子机制还不了解。来自复旦大学医学院的研究人员，通过石蜡包埋样本的检测与后续功能
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理 细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷（5-Bromodeoxyuridine：BUdR）的培养基中，当细胞在DNA 合成时，BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷（Thymidine：TdR）被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时，由于半保留复制的机制，中期染色体的每条染色单体
糖类染色实验——黏液物质染色
实验方法原理在人体和动物体中能够分泌黏液物质，依其物质中含有的酸基不同，所以分为中性黏液、酸性黏液和混合性黏液，也可被称为中性黏多糖、酸性黏多糖和混合性黏多糖，常用 Mowry 阿尔辛蓝高碘酸 Shiff 反应（ABPAS）染色方法。实验材料石蜡组织切片试剂、试剂盒阿尔辛蓝 8 GS冰醋酸蒸馏水麝香
姐妹染色单体分化染色实验
实验概要本文介绍了姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)的实验原理、操作步骤及注意事项等。实验原理姐妹染色单体分化染色法(Sister chromatid differentiation，SCD)是20世纪70年代中期发展起来的染色体处
姐妹染色单体分化染色实验
实验方法原理细胞被培养在含有 5-溴脱氧尿苷（5-Bromodeoxyuridine：BUdR）的培养基中，当细胞在DNA 合成时，BUdR 能作为核苷酸的前体取代胸腺嘧啶核苷（Thymidine：TdR）被掺入到新合成的DNA中。在第一个细胞周期时，由于半保留复制的机制，中期染色体的每条染色单体D
液泡系的活体染色实验
实验方法原理中性红是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色，中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。实验材料蟾蜍试剂、试剂盒中性红染液Ringer氏液仪器、耗材光学显微镜手术器材解剖盘载片盖片吸水纸实验步骤一、蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察1. 方
染色末端的清洁纯化实验
试剂、试剂盒 乙醇 洗脱上样液 仪器、耗材 磁性分离装置 平板夹 平板架
革兰染色的实验步骤
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：1、涂片固定。2、草酸铵结晶紫染1分钟。3、蒸馏水冲洗。4、加碘液覆盖涂面染约1分钟。5、水洗，用吸水纸吸去水分。6、加95%酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，20秒后水洗，吸去水分。7、蕃红染色液（稀）染1分钟后，蒸馏水冲洗。干燥，
液泡系的活体染色实验
实验方法原理中性红是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色，中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。实验材料蟾蜍 试剂、试剂盒中性红染液
电泳后的凝胶染色实验
实验概要本文介绍了电泳后主要的凝胶染色方法，包括：标准考马斯亮蓝染色法、快速考马斯亮蓝染色法、凝胶铵银染色法、凝胶中性银染色法及凝胶铜染色法。实验步骤1. 标准考马斯亮蓝染色法 1) 电泳后，将凝胶转入一洁净的玻璃或塑料容器中。加入5倍于凝胶体积的0.25%考马斯亮蓝R-250(溶解于50%甲醇
染色末端的清洁纯化实验
利用 ABIPRISMRigDye 末端化学法进行自动荧光测序是高效率 DN 八序列测定的方法之一。序列梯度是由标准的 Sanger 方法利用荧光标记链末端的核苷而产生的。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼嘉。试剂、试剂盒乙醇洗脱上样液仪器、耗材磁性分离装置平板夹平板架测序反
染色末端的清洁纯化实验
试剂、试剂盒 乙醇洗脱上样液仪器、耗材 磁性分离装置平板夹平板架测序反应纯化系统实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂用于测序的胶洗脱/上样液 (见表 9-4)90% 乙酵洗涤液2. 特殊设备MagnaBotⅡ磁性分离装置（Promega)平板夹 96(Promega)平板架（Promega)3
液泡系的活体染色实验
实验方法原理 中性红是液泡系特殊的活体染色剂，只将液泡系染成红色，在细胞处于生活状态时，细胞质及核不被染色，中性红染色可能与液泡中的蛋白有关。实验材料 蟾蜍试剂、试剂盒 中性红染液Ringer氏液仪器、耗材 光学显微镜手术器材解剖盘载片盖片吸水纸实验步骤 一、蟾蜍胸骨剑突软骨细胞液泡系活体染色及观察
JCAD通过抑制LATS2激酶活性促进非酒精性脂肪肝向肝癌发展
非酒精性脂肪肝（NAFLD）是一种由于代谢紊乱引起的肝炎，也是肝癌（NASH-HCC）发生的重要来源之一。但是，对于NAFFLD如何向NASH-HCC发展的分子机制还不了解。来自复旦大学医学院的研究人员，通过石蜡包埋样本的检测与后续功能验证，找到了一个肥胖相关基因，KIAA1462（JCAD），