融合蛋白化学降解实验3
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒天冬氨酸脯氨酸甲酸乙酸盐酸胍仪器、耗材电泳仪离心机水浴锅实验步骤1. 进行预实验确定最佳的水解条件。准备四个反应混合物：（1）反应1：20 μg 溶解在70%甲酸中的融合蛋白。（2）反应2：20 μg 溶解在70%甲酸/6 mol/l 盐酸胍中的融合蛋白。（3）反应3：20 μg 溶解在13%乙酸中的融合蛋白。（4）反应4：20 μg 溶解在13%乙酸/6 mol/l 盐酸胍中的融合蛋白。（5）将所有样本置37℃下温育反应。 2. 分别在0、24、48和72 h 的反应时刻，从各反应混合物中取5 μl 冻干。3. 将冻干的蛋白重悬于20 μl 1×SDS样品缓冲液，逐滴加入0.1 mol/l Tris 碱中和至样品颜色由黄变蓝。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析样品的消化程度。4. 选择达到预定裂解程度的最温和条件及最短温育反应时间，据此按比例扩......阅读全文
融合蛋白化学降解实验3
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 天冬氨酸脯氨酸甲酸乙酸盐酸胍 仪器、耗材 电泳仪离心机水浴锅 实验步骤 1. 进行预实验确定最佳的水解条件。准备四个反应混合物： （1）反应1：20 μg 溶解在70%甲酸中的融合蛋白。 （2）反应2：20 μg
融合蛋白化学降解实验
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 CNBr甲酸SDS 仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅 实验步骤 1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液，将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一份重悬于50 μl 含CNBr 的7
融合蛋白化学降解实验
基本方案 用溴化氰 实验方法原理 实验材料 1 mg ml 融合蛋白
融合蛋白化学降解实验
基本方案 备选方案1 备选方案2 实验材料 融合蛋白
融合蛋白化学降解实验1
实验材料 融合蛋白 试剂、试剂盒 CNBr甲酸SDS 仪器、耗材 离心机分光光度计水浴锅 实验步骤 1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份50 μl 的融合蛋白溶液，将其中一份重悬于5050 μl 50 mg/ml CNBr/甲酸中，另一
融合蛋白化学降解实验2
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒Tris·ClNaCl盐酸胍羟胺裂解缓冲液SDS仪器、耗材离心机水浴锅培养箱实验步骤1. 进行预试验以确定最短保温反应时间。将50 μl 1 mg/ml 融合蛋白与50 μl 2×羟胺裂解缓冲液混合在1.5 ml 微量离心管中，45℃温育反应。 2. 在0、2、4、
融合蛋白化学降解实验—— 用溴化氰
实验材料1 mg ml 融合蛋白试剂、试剂盒50 mg ml CNBr70%（V V）甲酸1 × SDS 样品缓冲液实验步骤1. 进行预试验以确定最短温育反应时间。冻干两小份各 50 μl 的融合蛋白溶液，将其中一份重悬于 50 μl 50 mg/ml CNBr / 70% 甲酸中，另一份重悬于 5
融合蛋白的酶解实验3
实验材料融合蛋白试剂、试剂盒SDS钠盐凝血酶裂解液凝血酶仪器、耗材水浴锅培养箱离心机实验步骤1. 准备两个小量预试验以确定最佳裂解反应条件： （1）反应1：20 μl 1 mg/ml 融合蛋白溶液（在合适的缓冲液中）及0.2 μg 凝血酶。（2）反应2：5 μl 1 mg/ml 融合蛋白溶液（模拟
GST 融合蛋白沉降实验
GST 沉降实验与 far western(方案 2) 相比有—个优点：探针蛋白是在更自然的环境下与可能的搭档蛋白孵育，因而增强了相互作用的有效性。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料细胞裂解液其中蛋白质 35S 用标记试剂、试剂盒裂解
GST 融合蛋白沉降实验
实验材料 细胞裂解液 其中蛋白质 35S 用标记 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 SDS 聚丙烯酰胺凝胶