准备大组织的厚切片进行β半乳糖苷酶染色
实验材料小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒4%（m V)琼脂糖氰基丙烯酸盐黏合剂（如Superglue)l00 mmol L磷酸钠盐缓冲液 pH 8.0仪器、耗材振动切片机（如VT 1000S; Leica)实验步骤1) 固定和洗涤组织。2) 将组织放置在100 mL烧杯中，用吸管轻柔吸取大部分的洗涤缓冲液。在37〜40℃加入足够的4%中等强度的琼脂糖覆盖组织（让烧杯倾向于组织这边）。旋动烧杯混匀并使充分覆盖组织。3) 室温将烧杯放置成45°角直到琼脂糖变硬（约10 min)。4) 用一刀片调整琼脂糖块使之成方形，每边留出2〜3 mm。5) 用氰基丙烯酸盐粘合剂在合适的方向（如冠状切面）粘住琼脂糖块，使之粘到振动切 片机的标本支持机托盘上。将该托盘放进振动切片机，给整个槽装满100 mmol/L的 磷酸钠盐缓冲液，pH 8.0。6) 切片 (细节参考振动切片机手册）。小心地从振动切片机槽内移走切片，放 入β-半乳糖苷酶......阅读全文
准备大组织的厚切片进行β半乳糖苷酶染色
实验材料小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒4%（m V)琼脂糖氰基丙烯酸盐黏合剂（如Superglue)l00 mmol L磷酸钠盐缓冲液 pH 8.0仪器、耗材振动切片机（如VT 1000S; Leica)实验步骤1) 固定和洗涤组织。2) 将组织放置在100 mL烧杯中，用吸管轻柔吸取
组织切片Masson染色
Masson染色是利用两到三种阴离子染色液对组织中的纤维和炎性因子着色的染色方法，染色后可使胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维、胞浆呈红色，细胞核呈蓝黑色 一、实验用品 组织蜡块、苏木素染液、盐酸酒精分化液、丽春红酸性复红液、苯胺蓝染液、1%磷钼酸、2%冰醋酸、0.2%冰醋酸、梯度乙醇、二甲
冷冻组织及切片的准备实验
为了获得较好的结果，应当用新鲜的组织，因为在-80°C 中保存超过 24 h 的样品，其RNA 的产量和完整性将大打折扣。尽管有几个实验小组曾经报道用 LCM 技术从石蜡包埋的组织中获得了没有降解的 RNA, 但作者还是推荐使用冷冻的组织块。本实验来源于 PCR 实验指南（第二版），作者：种康，瞿礼
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰磷酸盐缓冲液（PBS) Tek OCT 组织复合物仪器、耗材 封闭容器烧杯 恒冷装置 解剖工具 平盘组织模子载玻片刀片实验步骤 一、材料1. 缓冲液、溶液和试剂丙酮蒸馏水干冰磷酸盐缓冲液（PBS)Tek OCT 组织复合物（Sakura Finet
冷冻组织及切片的准备实验
实验材料 新鲜的组织 试剂、试剂盒 丙酮 蒸馏水 干冰 磷酸盐缓冲液（PBS
贴壁/悬浮细胞及组织切片进行Hoechst染色的方法步骤
Hoechst染色方法1．贴壁细胞1) 取普通洁净盖玻片于70%乙醇中浸泡5分钟或更长时间，无菌超净台内吹干或用细胞培养PBS或0.9%NaCl等溶液洗涤三遍，再用细胞培养液洗涤一遍。将盖玻片置于六孔板内，种入细胞培养过夜，使约为50%-80%满。2) 刺激细胞发生凋亡后，吸尽培养液，加入0
β半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验
半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测 准备大组织的厚切片进行β-半乳糖苷酶染色 实验方法原理 实验材料
TUNEL分析实验——组织切片的－TUNEL－染色
实验材料组织试剂、试剂盒甲醛NaOHPBS二甲苯乙醇蛋白酶 KTris-HCl 溶液仪器、耗材Parafilm 膜实验步骤1. 取下组织，立即用新制备的 4% 甲醛固定，室温过夜。用多聚甲醛制备 4% 的甲醛溶液，在 100 ml 水中加 8 g 多聚甲醛，在通风橱中加热至 50~60℃，加几滴 1
石蜡切片和半薄切片的制作
实验概要本方法介绍了石蜡切片和半薄切片的制作流程。主要试剂4%戊二醛固定液(pH7.0磷酸缓冲液)，乙醇，二甲苯，纯石蜡，蜂蜡，树脂胶主要设备真空泵，AO手摇式切片机，Olypmus BH-2型显微镜，LKB超薄切片机实验步骤1. 石蜡切片的制作 1) 取材固定新鲜配置4%戊二醛固定液(pH7.
石蜡切片免疫组织化学染色
主要试剂染色缸；染色架；保湿盒；晾片盘；微量移液器；0.2MPBS，乙醇，二甲苯，BSA，中性树胶等实验步骤1. 石蜡切片放置在60℃恒温箱中烘烤120分钟；2. 脱蜡和水化：二甲苯(10min)→二甲苯(10min)→无水乙醇(5min×2次)→95%乙醇(5min×2)→90%(
半乳糖苷酶活性的整体封片染色和免疫组化检测
实验材料小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液（PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片纤光照明的解剖显微镜
β半乳糖苷酶活性的整体封片免疫组化检测实验
实验方法原理 实验材料 小鼠或鸡的整个胚胎、组织或外植体试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液（PBS)冰冷β-半乳糖苷酶固定剂β-半乳糖苷酶洗涤缓冲液β-半乳糖苷酶染色液仪器、耗材 5 mL或10 mL的聚苯乙烯或聚丙烯帽盖的试管或1.5〜2 mL的离心管转动平台染色用密闭箱附有盖玻片的下陷载玻片或箱式载玻片
组织学——组织切片
· Histological techniques (William H. Heidcamp)Very detailed guide to histological techniques, like fixation, dehydration, embedment and subs
产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？
1、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是最重要的一条。2、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。3、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓度来降低背景
产生组织切片非特异性染色的原因有哪些？
1、抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时间、稀释抗体来控制。这是最重要的一条。 2、一抗用多克隆抗体易出现非特异性着色，建议试用单克隆抗体看看。 3、内源性过氧化物酶和生物素在肝脏、肾脏等组织含量很高（含血细胞多的组织），需要通过延长灭活时间和增加灭活剂浓
显微冷冻切片机的使用和大（小）鼠脑组织切片操作实验
冷冻切片机可以用于：（2）切制薄而均匀的组织片；（2）组织用坚硬的石蜡或其他物质支持，每切一次借切片厚度器自动向前（向刀的方向）推进所需距离，厚度器的梯度通常为1微米。实验方法原理切制石蜡包埋的组织时，由于与前一张切片的蜡边粘着，而制成多张切片的切片条。实验材料大小鼠大脑试剂、试剂盒手术器械 显微冷
显微冷冻切片机的使用和大（小）鼠脑组织切片操作实验
实验材料 大小鼠大脑试剂、试剂盒 手术器械 显微冷冻切片机 包埋剂仪器、耗材 大小鼠立体图谱实验步骤 1. 安装刀具，移上安全杆。调整切片机温度到-20 ℃(（右手边up 和down 二个按钮调节, up调高温度, down,降低温度）。 2. 从-80 ℃冰箱取出脑组织在切片机或-20 ℃冰箱
冷冻组织切片的制作
实验概要本实验介绍了冷冻组织切片制作的基本操作流程。主要试剂液氮，干冰，1％明胶，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀释抗体，辣根过氧化物酶标记的二抗，DAB／金属盐试剂，3％过氧化氢，0.3％(W／V)氯化镍贮存液，Harris苏木精，乙醇主要设备载玻片，Whatm
什么是组织切片
这是组织胚胎学和病理学检查的一个专业称呼。先通俗的解释一下什么叫组织胚胎学和病理学检。比如身上哪里长了包块、硬结、疙瘩、痣，反正就是原来没有，现在有了，而且不正常时，医生就会建议切一点，或者用针穿刺一点用来做检查，这个检查就叫病理学检查；而科学家为了研究动植物的微观结构，比如想看看正常的皮肤细胞是长
冷冻组织切片制作
实验试剂液氮，干冰，1％明胶，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀释抗体，辣根过氧化物酶标记的二抗，DAB／金属盐试剂，3％过氧化氢，0.3％(W／V)氯化镍贮存液，Harris苏木精，乙醇实验设备载玻片，Whatman 1＃滤纸，低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
组织切片机切片背景过深的原因分析
原因分析：a.漂洗不够；b.切片或涂片过厚；c.蛋白质封闭不够或所用血清溶血d.使用全血清抗体稀释不够；e.底物成色反应过久；解决措施：对一些新的或少用的抗体显色时进行监控，避免显色时间过长。
组织切片机切片边缘着色的原因分析
原因分析：a组织边缘与玻片粘贴不牢，边缘组织松脱漂浮在液体中，导致洗涤不彻底；b切片上滴加的试剂未充分覆盖组织，边缘的试剂容易首先变干，浓度较中心组织高而致染色深。解决措施：组织的前期处理应规范，试剂要充分覆盖组织，尽量避免选用坏死较多的组织。
实验技术：组织切片的制备
【目的】组织标本必须首先被制成组织切片，再经过染色处理，然后才能在显微镜下进行临床诊断和科学研究。【原理】苏木素染色结合伊红染色是常规组织学染色技术，也称为H & E染色。苏木素是碱性染色，细胞核被染成深紫或兰色，常用作核染色；伊红是酸性染色，细胞浆染呈红色，常用作胞浆染色。【材料】1.试剂和溶液（
组织切片的免疫金标记
实验方法原理利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质，与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外，胶体金还可与其它多种生物大分子，如SPA、PHA、ConA等结合。实验材料组织样品试剂、试剂盒免疫金标记物仪器、耗材培养箱显微镜实验步骤1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片
组织切片的免疫金标记
实验方法原理 利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质，与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外，胶体金还可与其它多种生物大分子，如SPA、PHA、ConA等结合。实验材料 组织样品试剂、试剂盒 免疫金标记物仪器、耗材 培养箱显微镜实验步骤 1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，
植物组织石蜡切片的制作
一、实验目的 1．熟练掌握石蜡切片的方法。 2．掌握永久制片的制作过程，为研究植物的内部结构奠定基础。 3．学会植物内部结构的比较研究方法。 二、实验器具与 试剂1．器具 石蜡切片机、烘箱、显微镜、染色缸、小培养皿、镊子、毛笔、吸水纸、纱布、载玻片、盖玻
组织蜡块切片的保存
许多实验室研究人员习惯将组织蜡块切片后长期保存在室温条件下,而切片后的组织在室温下长期保存抗原易损失。研究发现,切片在室温下保存3个月以上,免疫组化染色结果会出现减弱或阴性,故进行了新、旧切片保存时间对照实验。选择11种不同组织蜡块每例连续切10片,共110片,常温空气中放置1个月、3个月、6个月、
冷冻组织切片的制作实验
实验试剂液氮，干冰，1％明胶，4％多聚甲醛，PBS，含1％NP-40的PBS，3％BSA／PBS稀释抗体，辣根过氧化物酶标记的二抗，DAB／金属盐试剂，3％过氧化氢，0.3％(W／V)氯化镍贮存液，Harris苏木精，乙醇实验设备载玻片，Whatman 1＃滤纸，低倍光学显微镜实验材料未受损伤的组织
组织病理实验_冰冻切片
组织病理实验广泛应用于生物学、解剖学、病理学、肿瘤学、法医学、临床诊断学等实验方法原理冰冻切片是指将组织在冷冻状态下直接用切片机切片。它实际上是以水为包埋剂，将组织进行冰冻至坚硬后切片的。在冰冻切片前组织不经过任何化学药品处理或加热过程，大大缩短了制片时间。同时，由于此法不需要经过脱水、透明和浸蜡等
组织切片机所有切片呈阴性的原因分析
原因分析：a.缓冲液内含叠氮化钠，抑制酶的活性；b.染色未完全按照操作步骤进行；c.漏加一种抗体或抗体失活；d.复染或脱水剂使用不当；e.底物中加入的过氧化氢少或失活。解决措施：设立“阳性对照”。如果阳性对照有了表达，说明染色的全过程和所有试剂都没有问题。如果此时测试片仍为阴性，便是真实的阴性，说明