视神经损伤模型实验—荧光金逆行性标记
实验方法原理在上丘和外侧膝状体进行荧光金逆行性标记存活的节细胞。这种方法常结合视神经夹伤模型使用。上丘逆行性标记可分为两种，损伤前标记及损伤后标记。损伤前标记用于研究存活的节细胞，一般在损伤前3d进行标记。损伤后标记一般用于研究存活的纤维及再生纤维，一般在处死前3d进行标记。实验材料实验动物试剂、试剂盒1%戊巴比妥钠荧光金仪器、耗材手术显微镜显微手术器械实验步骤(1)戊巴比妥钠(50mg/kg体重）腹腔内注射深度麻醉动物。(2)用颅内手术专用固定器将大鼠头部固定。(3)自颅顶正中线垂直切开头皮，长约3-4cm,使用双氧水擦拭头皮，暴露矢状缝和人字缝。(4)找到Bregma点，确定双侧上丘（以Bregma点为零点，后移6.8mm,旁开1.6mm)和外侧膝状体（以Bregma点为零点，后移4.6mm和旁开3.8mm)在颅骨表面投影，造成4个直径约1mm的骨孔，上丘深4mm,外侧膝状体深5.6mm。(5)用牙钻钻开骨孔。(6)剪开脑膜......阅读全文
视神经损伤模型实验—荧光金逆行性标记
实验方法原理在上丘和外侧膝状体进行荧光金逆行性标记存活的节细胞。这种方法常结合视神经夹伤模型使用。上丘逆行性标记可分为两种，损伤前标记及损伤后标记。损伤前标记用于研究存活的节细胞，一般在损伤前3d进行标记。损伤后标记一般用于研究存活的纤维及再生纤维，一般在处死前3d进行标记。实验材料实验动物试剂、试
视神经损伤模型实验——视神经横断模型及荧光金逆行标记
实验方法原理作为中枢神经的重要组成部分，视神经及其胞体已成为中枢神经损伤修复的重要研究对象。中枢神经损伤修复研究中的许多重大发现，最初都是以视神经损伤为模型开展的。其中最为著名的，是苏国辉和Aguayo采用周围神经移植诱发视网膜神经节细胞（以下简称节细胞）再生的开拓性研究。视神经由众多神经纤维组成，
视神经损伤模型实验——坐骨神经移植及荧光金逆行性标记
实验方法原理实验材料实验动物试剂、试剂盒1%戊巴比妥钠荧光金仪器、耗材手术显微镜显微手术器械实验步骤(1)-(5)与视神经横断模型及荧光金逆行标记相同，不再赘述。(6)在眼球后极1mm处以显微剪剪断视神经。(7)取自体大鼠一侧坐骨神经约1cm长，准备移植。(8)采用11-0带针缝合线将坐骨神经缝合到
视神经损伤模型实验
实验方法原理 作为中枢神经的重要组成部分，视神经及其胞体已成为中枢神经损伤修复的重要研究对象。中枢神经损伤修复研究中的许多重大发现，最初都是以视神经损伤为模型开展的。其中最为著名的，是苏国辉和Aguayo采用周围神经移植诱发视网膜神经节细胞（以下简称节细胞）再生的开拓性研究。视神经由众多神经纤维组成
视神经损伤模型实验
视神经横断模型及荧光金逆行标记 坐骨神经移植及荧光金逆行性标记 荧光金逆行性标记（上丘及外侧膝状体） 实验方法原理 作为中枢神经的重要组成
脊髓机械性损伤模型的制作实验
实验前的准备及暴露脊髓 大鼠脊髓NYU模型 大鼠脊髓挤压伤模型 大鼠脊髓半横断模型 大鼠脊髓全横切模型 实验方法原理
脊髓机械性损伤模型的制作实验
实验方法原理 对于各种大鼠或小鼠脊髓损伤模型而言，前提都是要去除相应节段椎板，清晰暴露需要损伤的脊髓节段，因此本节所有大、小鼠损伤模型中都是以打开飞节段椎板为前提进行的进一步损伤。实验材料 实验动物试剂、试剂盒 1%戊巴比妥钠碘伏仪器、耗材 手术刀眼科摄(2个）眼科剪乳突撑开器小型咬骨钳针持线剪缝针
脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓NYU模型
实验方法原理脊髓挫伤是临床最常见的脊髓损伤类型（交通事故、高空坠物、运动损伤等造成），NYU模型是应用最广泛的鼠类脊髓挫伤模型，该模型可以很好地模拟临床，适用于病理和脊髓再生等多方面研究。双侧椎板（T8）去除术后，使用脊髓撞击仪(NYU大鼠脊髓撞击仪I型），以不同重量的下落重物撞击脊髓，造脊髓撞击伤
脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓半横断模型
实验方法原理半横断及全横断损伤在临床上较为少见，但其为干细胞移植、神经纤维再生及功能修复等方面的研究提供了良好的研究模型，使之也成为较为常用的模型。实验原理主要采用手术刀或刀片切断脊髓，使损伤部位的脊髓失去解剖连续性及生理上的联系而制作成的脊髓损伤模型。实验材料实验动物试剂、试剂盒1%戊巴比妥钠碘伏
脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓挤压伤模型
实验方法原理脊髓夹伤模型可模拟临床上脊柱移位所致脊髓持续受压损伤，同样是应用较多的模型。该类模型可获得相对稳定的脊髓损伤，适用于病理和脊髓再生等多方面研究，尤其是脊髓受损程度（挤压强度和／或持续时间）与所导致的神经病理损伤后果的关系。现有脊髓夹伤模型种类较多，分别应不同造模目的而设计。其中应用较多的
脊髓机械性损伤模型的制作实验——大鼠脊髓全横切模型
实验方法原理行椎板去除术后，用11-0线从腹侧穿过，然后用刀片切断脊髓。实验材料实验动物试剂、试剂盒碘伏仪器、耗材11-0丝线实验步骤①脊髓暴露后，用立体定向仪将大鼠固定；②用显微外科摄将硬脊膜轻轻提起，用眼科剪将硬膜剪开；③再提起硬脊膜然后用三角针将11-0线从硬膜的腹侧面穿过；④用刀片横切大鼠脊
脊髓机械性损伤模型的制作实验——实验前准备及暴露脊髓
实验方法原理对于各种大鼠或小鼠脊髓损伤模型而言，前提都是要去除相应节段椎板，清晰暴露需要损伤的脊髓节段，因此本节所有大、小鼠损伤模型中都是以打开飞节段椎板为前提进行的进一步损伤。实验材料实验动物试剂、试剂盒1%戊巴比妥钠碘伏仪器、耗材手术刀眼科摄(2个）眼科剪乳突撑开器小型咬骨钳针持线剪缝针缝线剃毛
胶体金标记实验步骤
1、蛋白质的处理：胶体金标记蛋白的制备胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。（1）待标记蛋白溶液
Ａβ损伤模型
取出生1-2d的乳鼠，用麻醉剂处死。在D-hanks液中取大脑并分离海马组织，胰蛋白酶消化，获得细胞悬液，胎盘蓝染色进行死活细胞记数，将细胞以5×105/ml的密度接种于预先经L-多聚赖氨酸处理的96孔和24孔培养板,其中24孔板中预先放置有盖玻片。细胞维持在培养液中，置入5%CO2，饱和湿度的培养
胶体金标记实验操作步骤
1、蛋白质的处理：胶体金标记蛋白的制备 胶体金对蛋白的吸附主要取决于pH值，在接近蛋白质的等电点或偏碱的条件下，二者容易形成牢固的结合物。如果胶体金的pH值低于蛋白质的等电点时，则会聚集而失去结合能力。除此以外胶体金颗粒的大小、离子强度、蛋白质的分子量等都影响胶体金与蛋白质的结合。 （
病毒免疫荧光实验_荧光素标记抗体
实验材料荧光色素试剂、试剂盒抗体实验步骤荧光标记抗体方法有直接标记法和间接标记法两种。(1) 直接法：较为常用，具体步骤是：1) 抗体溶液的制备：用 0.01mol/L pH 7.1 PBS 将待标记抗体稀释至 20mg/ml;2) 荧光素：根据待标记抗体的总量，按 0.01mg 荧光素/mg 蛋白
细胞膜流动性测定实验_荧光探针标记法
实验方法原理常用于研究膜脂流动性的荧光探针为1,6-二苯基-1,3,5-己三烯（DPH）。DPH掺入到细胞膜脂烃链区后，介质粘度增加，顺反异构受到抑制，成为唯一能发光的全反构型。实验材料肿瘤细胞试剂、试剂盒磷酸盐缓冲液DPH仪器、耗材荧光分光光度计离心机实验步骤1. 取对数生长期的肿瘤细胞，以pH
人类外伤性脑损伤的果蝇模型
一项研究说，科研人员建立了一种果蝇模型用于研究外伤性脑损伤(TBI)的直接和长期后果。找到外伤性脑损伤(TBI)的有效疗法具有挑战性，这部分是由于治疗结果因为损伤的位置和严重程度以及遗传和环境因素而有很大不同。为了解决这个问题，David Wassarman及其同事开发了一种外伤性脑损伤(T
显微课堂－|－基于激光的视神经再生研究新方法
如何利用激光显微切割技术（LMD）对爪蟾蝌蚪的视神经进行精确一致的横切 由于哺乳动物中枢神经系统（CNS）的自我修复能力有限以及传统损伤模型的不一致性，视神经再生是神经生物学的一大挑战。相比之下，爪蟾蝌蚪的视神经在受伤后可以再生，因此是研究轴突再生的分子和细胞机制的理想模型。在本应用说明中，我
关于视神经间接损伤的基本介绍
视神经间接损伤(indirectinjuriesoftheopticnerve)亦称外伤性视神经病变，这是临床上并非少见的视神经损伤。因可导致视力永久丧失而受到临床医生关注。视神经间接损伤常为头面部闭合性损伤所致或为其一部分，尤其是前额部的损伤，据称是因外伤传导至视神经骨管引起。典型者为视盘，视
逆行性细菌感染的检查
1、仔细询问相关病史。 2、进行物理检查，同时有需要进行细菌的培养实验，并结合相关的器械检查，综合考虑患者的症状后作出最合适的诊断。
逆行性细菌感染的介绍
所谓逆行性细菌感染是指细菌由尿道口往上进入泌尿系统，经由尿道到膀胱甚至进入肾脏或副睾丸、前列腺。大部份的细菌都来自肠道，尤以大肠杆菌(E.Coli)最常见。门诊泌尿道患者以女性居多(男：女约1：8)，这是因为女性尿道较短(约3-4cm)，且开口和阴道及肛门相当接近，因此细菌容易因不良的卫生习惯或
内皮细胞损伤模型
一、细胞因子损伤模型将内皮细胞铺板后待即将单层融合时，换无血清或低血清培养基，加入细胞因子如IL－2，TNF－alpha、IFN等，共同孵育一段时间，或者加入药物与之共孵育，或者加细胞因子之前先加入药物孵育后，再加细胞因子，结束后测一些指标如MTT、LDH、NO、等等看药物对细胞因子损伤的保护作用。
体内肝损伤模型（酒精）
一、材料 纯系SD雄性大鼠，体重180g～200 g，由浙江大学医学院实验动物中心提供。食用酒精选用北京酿酒总厂出品的56度红星二锅头。二、方法 将大鼠随机分成5组，饲养在23℃～25℃室内，自由进食、进水；根据大鼠体重，A、B、C、D组每日用56°红星二锅头白酒以10ml/1Kg分别灌胃 0、4周
简述视神经间接损伤的临床表现
致伤原因如摩托车摔伤、高空坠落伤、各种车祸等，由于多数病人伤后合并脑外伤昏迷，等清醒后发现单侧或双侧视力丧失或仅存光感。检查除视力丧失外，瞳孔直接对光反应消失，眼底正常。 现代影像学检查尤其是薄层CT可显示眶内段视神经正常或增粗，视神经管骨折或正常。后组筛窦、蝶窦骨折或积血，前床突骨折等表现均
脊髓星形胶质细胞机械性损伤的体外培养模型
1.材料与方法取新生的wistar 大鼠脊髓,剪碎,0125 %胰蛋白酶消化1h ,用含血清的DMEM培养液终止胰蛋白酶的作用; 而后吹打成散在的单个细胞,进行细胞计数,按5 ×105 个Pcm2 密度进行接种。培养至第10天时加10mM Leu2methy12ester 除杀小胶质细胞。于16d
细胞凋亡检测实验——荧光探针双标记法
实验方法原理本实验用1μg/ml 三尖杉酯碱HT在体外诱导培养的HL-60细胞发生凋亡，同时也有少数细胞发生坏死。用Hoechst33342和碘化丙啶（propidium iodide，PI）对细胞进行双重染色，可以区别凋亡、坏死及正常细胞。三尖杉酯碱（HT）是我国自行研制的一种对急性粒细胞白血病，
Science发布革命性荧光标记技术
霍华德·休斯医学研究所的科学家们开发了一个革命性的新工具，可以在动物大脑中永久性标记神经元活动。在神经元激发钙离子流入时，这个工具（荧光蛋白CaMPARI）会从绿色变为红色。此前，研究者们需要在正确的时间用显微镜聚焦正确的细胞才能观察到神经元活动，现在这个永久性的荧光标记为他们带来了解
组织切片的免疫金标记
实验方法原理利用胶体金在碱性条件下带负电荷的性质，与蛋白质分子的正电荷基团籍静电吸引而形成牢固结合。除抗体外，胶体金还可与其它多种生物大分子，如SPA、PHA、ConA等结合。实验材料组织样品试剂、试剂盒免疫金标记物仪器、耗材培养箱显微镜实验步骤1. 将湿纸巾铺于载玻片盒底部做成加湿盒，由冰冻切片
免疫金标记技术原理
免疫金标记技术原理：胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能，蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面，无共价键形成，标记后大分子物质活性不发生改变。金颗粒具有高电子密度的特性。金标蛋白在相应的配体处大量聚集时，在显微镜下可见黑褐色颗粒或肉眼可见红