大鼠主动脉内皮细胞培养实验——贴块法

大鼠血管内皮细胞培养可用于:(1)血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。实验材料雄性Wistar大鼠试剂、试剂盒DMEM胎牛血清内皮细胞生长因子肝素钠青链霉素明胶胰蛋白酶PBSD-Hanks’液仪器、耗材手术器械眼科剪眼科镊培养皿手术刀培养瓶CO2培养箱实验步骤1. 颈椎脱臼处死大鼠,将整个大鼠浸泡于75%乙醇中消毒约1 min。在无菌状态下,逐层剪开胸腔,分离取出主动脉,放含无菌 D-Hanks’液培养皿中。2. 用眼科剪、镊尽量去除血管外膜的脂肪和纤维组织。然后,用含抗生素的D-Hanks’液冲洗血管的外表面及血管腔内的凝血数次,再放入另一无菌培养皿中。3. 用眼科剪纵向剪开血管,平展在培养皿中。用非常锐利的手术刀将其切成1 mm3大小的动脉植 块(或者用剪......阅读全文

大鼠主动脉内皮细胞培养实验——贴块法

大鼠血管内皮细胞培养可用于:(1)血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。实验材料雄性Wistar大鼠试剂、试剂盒DMEM胎牛血清内皮细胞生长因子肝素钠青

大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法

大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDME

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

大鼠血管内皮细胞培养可以:(1)用于血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)用于选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法贴块法实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。但缺点使易混有成纤维细胞和平滑肌细胞,前者的贴壁时间和内皮接

家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法

家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台

人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法

实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1.  要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不

大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。

初代细胞培养实验——组织块培养法

实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1.  剪切把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止;2.  摆布用弯头吸管吸取若干小块,置入培养

大鼠主动脉平滑肌细胞培养

实验方法原理 运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料 SD大鼠试剂、试剂盒 PBSFBSDMEM仪器、耗材 手术剪手术钳眼科剪刀眼科镊子大头针手术刀培养皿实验步骤 一、实验步骤1. SD 大鼠(150

平滑肌细胞培养方法4

 动脉平滑肌细胞培养的几个问题组织块大小边缘密度翻面时间观察时间对原代细胞萌发的影响对于贴块法的原代培养来源,由于细胞并非直接获得,而是从组织块边缘长出,其中有一“突破过程”,且细胞萌发后尚需一定的细胞密度才能使其存活、增殖,故组织块大小、边缘、密度均影响细胞萌出与否及细胞存活、增殖。公认的方法是将

原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍(二)

3、神经元细胞原代培养 步骤:1)出生 2 d SD大鼠经戊巴比妥钠麻醉后,碘酒、75%乙醇消毒腹部皮肤,依次剪开皮肤、肌肉、皮下筋膜,无菌操作下取出胚胎放入预冷的D-Hanks平衡盐液中。2)在解剖显微镜下分离并取出胚胎大脑皮层,除去脑膜,剪碎组织成约1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入3

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

大鼠胰岛细胞培养实验

大鼠胰岛细胞培养实验             实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单

大鼠胰岛细胞培养实验

大鼠胰岛细胞培养实验             实验方法原理 水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单

大鼠胰岛细胞培养实验

大鼠胰岛细胞可用于:(1)实验室胰岛细胞功能深入研究的实验材料;(2)糖尿病新药的细胞筛选模型。实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。 实验材料一周龄Wistar 大鼠试剂、试剂盒D-Hanks’液

大鼠胰岛细胞培养实验

实验方法原理水合氯醛腹腔麻醉,采用胶原酶ⅴ逆行灌注、原位消化及Ficoll-400梯度离心的方法分离、纯化大鼠胰岛,并分离、培养胰岛单细胞。实验材料 一周龄Wistar 大鼠  试剂、试剂盒 D-Hanks’液 胰蛋白酶 Ⅴ型胶原酶 葡萄糖 碘乙酸  仪器、耗材 手术剪 手术钳 眼科剪刀 眼科镊子

威斯腾原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍

  威斯腾原代细胞培养和细胞药筛   威斯腾生物经过10多年的发展,获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验,并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库;细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件,万级净化细胞房,这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。   同时,威斯腾生物结合多

正常大鼠原代主动脉平滑肌细胞培养

一、实验试剂 1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS (pH 7.4 )+ 1% P/S4、染色液

胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法

胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3次,将凝块洗干净后剥除外膜的纤维脂肪层,然后纵行切开血

SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法

Hyclone标准胎牛血清FBS SH30370.03胎牛血清培养血管平滑肌细胞常用的方法有贴块法(explant)和酶解离法(enzyme disperse)。下面一起来看下这两种方法。1、贴块法方法:动物经颈动脉放血后,在无菌操作下迅速取出胸腹主动脉段,置于含Hank's液的平皿中漂洗3

威斯腾原代细胞培养经典案例和细胞药筛介绍

  威斯腾生物经过10多年的发展,获得了上百种细胞株和四十余钟原代细胞培养经验,并建立了庞大的细胞库及原代培养资料库;细胞平台有资深实验员、规范的SOP操作文件,万级净化细胞房,这些条件为保质保量完成每个客户的实验提供了保障。   同时,威斯腾生物结合多年原代及传代细胞培养经验,结合平台已有的

大鼠星型胶质细胞培养实验——胰酶消化法

实验材料SD大鼠试剂、试剂盒苯巴比妥解剖液胰蛋白酶DnaseDM培养液仪器、耗材离心管培养箱手术器材实验步骤一、 取14.5d SD大鼠一只。二、 苯巴比妥0.5 ml 腹腔注射,待麻醉后置于手术台上,酒精棉球消毒皮肤,开腹取出子宫(约12-14个),放入解剖液中,剖开子宫,取出胚胎,放入解剖液中,

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养

大鼠血管内皮抑素(Endostatin)ELISA检测法

大鼠血管内皮抑素(Endostatin)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和唾液等其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗大鼠 Endostatin 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 Endostatin与单抗结合,加入生物素化的抗大鼠Endosta

平滑肌细胞培养方法

贴壁法原代培养1.1 细胞培养1.1.1 培养液配制 DMEM(美国Gibco公司),Hepes(15mmol/L),青霉素(100u/ml),链霉素(100mg/ml),优质胎牛血清(原代培养浓度20%,传代培养浓度10%,美国Hyclone)。1.1.2 培养器皿 25cm2塑料培养瓶(Cost

大鼠肝星状细胞培养实验

细胞培养技术             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠肝星状细胞培养实验

细胞培养技术             实验方法原理 将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养实验——酶消化法

大鼠脑微血管内皮细胞原代培养可用于:(1)血脑屏障的研究;(2)脑血管疾病的病理生理及分子生物学研究;(3)新药筛选;(4)脑微血管内皮细胞生理生化及药理学研究。实验方法原理以大脑皮质为材料、酶消化及梯度离心分离脑微血管段并进行原代培养,成功地摸索出大鼠脑微血管内皮细胞分离和原代培养的方法,并获得纯

如何巧妙利用血清培养细胞

在细胞培养实验室中,血清是常见的科研试剂之一,常见的血清种属有人的和动物两种,而动物的又分为牛、猪、鸡、羊等,根据客户对产品种属与来源的选择,价格也是不同的。对于实验新手来说,稍有不慎就会影响到实验结果,甚至让花费几千元买来的血清失去效果。那么我们要如何正确的使用与操作呢?今天上海文韧与您探讨“如何