家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法

家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台盼蓝细胞排斥试验计算椎间盘细胞的活细胞率。实验材料家兔试剂、试剂盒培养液DMEMHanks’缓冲液胎牛血清胰岛素转铁蛋白亚硒酸盐青霉素链霉素仪器、耗材培养皿培养瓶烧瓶试管眼科剪、眼科镊CO2 培养箱pH 计恒温水浴实验步骤一、实验步骤 1. 组织块贴块法 (1)取材:空气栓塞法处死家兔后,在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM 培养基(含双抗)。迅速带回到无菌超净台上。(2)剪切:在超净台上,进一步将周围组织分离,用Hanks'液冲洗数遍,直到冲洗液透明为止。眼 科剪刀将组织修剪为......阅读全文

家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法

家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台

家兔椎间盘细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/

家兔椎间盘细胞培养实验

贴块法             实验方法原理 首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/

人脐动脉平滑肌细胞培养实验——贴块法

实验方法原理运用贴块法进行人脐动脉血管平滑肌细胞的培养,并用倒置显微镜进行形态学观察和用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料脐带试剂、试剂盒胶原酶消化液胰蛋白酶胶原酶弹性蛋白酶DMEM仪器、耗材眼科剪滴管离心机培养皿CO2培养箱实验步骤一、实验步骤1.  要用胎牛血清。开始用的是小牛血清,所以总是不

大鼠主动脉内皮细胞培养实验——贴块法

大鼠血管内皮细胞培养可用于:(1)血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。实验材料雄性Wistar大鼠试剂、试剂盒DMEM胎牛血清内皮细胞生长因子肝素钠青

大鼠主动脉平滑肌细胞培养实验_贴块法

大鼠主动脉平滑肌细胞培养可用于:(1)获得大鼠主动脉平滑肌细胞;(2)用于血管疾病研究;(3)用于动脉疾病研究。实验方法原理运用组织块贴壁法进行SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞培养,并用倒置相差显微镜观察、HE染色后形态学观察以及用免疫组化对培养细胞进行鉴定。实验材料SD大鼠试剂、试剂盒PBSFBSDME

初代细胞培养实验——组织块培养法

实验材料组织试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶NaHCO3仪器、耗材吸管培养瓶烧杯眼科剪眼科镊实验步骤1.  剪切把组织小块(1cm3)置入小烧杯或青霉素小瓶中,用Hanks液漂液二三次以去掉表面血污,吸净Hanks液,用眼科剪反复剪切成1mm3块为止;2.  摆布用弯头吸管吸取若干小块,置入培养

动物血液采集实验——家兔心脏采血法

实验材料家兔仪器、耗材75% 酒精棉花碘酒棉花消毐干棉花20 ml 灭菌注射器9 号针头家兔仰卧固定板或动物手术台实验步骤采血方法除固定动物以外,与豚鼠采心血基本相同。1. 将家兔仰卧于动物手术台或一固定板上,用绳缚其四肢,使其不能活动。2. 在家兔左胸侧剪毛,再分别用碘酒和乙酵消毒该处皮肤。3.

动物血液采集实验——家兔耳静脉放血法

实验材料家兔仪器、耗材75% 酒精棉花消毐干棉花凡士林刀片或解剖刀剪刀灭菌小试管特制家兔木箱实验步骤1. 将家兔放在特制木盒内,使兔头伸出在外。2. 在耳背外侧边缘剃毛(如图 1)。图 1 家兔耳边缘静脉采血切口图3. 用酒精棉花消毒剃毛区。并磨擦该区的边缘静脉上方的皮肤,使静脉扩张充血。4. 在剃

家兔静脉实验

实验方法原理一般选用外侧耳缘静脉(图1),注射前应先拔去注射部位的被毛,用手指轻弹或轻揉兔耳,左手食指与中指夹住静脉的近心端,阻止静脉回流,使静脉充盈,用拇指和无名指固定耳缘静脉远心端,右手持针尽量从远端刺入,回抽有回血后用左手拇指固定针头,放开食指和中指,将药液注入(图2)。图1图2  实验材料家

家兔静脉实验

一般选用外侧耳缘静脉(图1),注射前应先拔去注射部位的被毛,用手指轻弹或轻揉兔耳,左手食指与中指夹住静脉的近心端,阻止静脉回流,使静脉充盈,用拇指和无名指固定耳缘静脉远心端,右手持针尽量从远端刺入,回抽有回血后用左手拇指固定针头,放开食指和中指,将药液注入(图2)。图1图2 

热原检查方法家兔法

由于家兔对热原的反应与人基本相似,家兔法为各国药典规定的检查热原的法定方法。《中国药典》2005年版规定的热原检查法系将一定剂量的供试品,静脉注入家兔体内,在规定时间内,观察家兔体温升高的情况,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的状况、试验室条件和操作的

肿瘤细胞原代培养实验——组织块法

肿瘤细胞原代培养可以:(1)研究癌变机理;(2)研究抗癌药检测;(3)研究癌分子生物学;(4)用于阐明和解决癌症。实验方法原理肿瘤细胞的原代培养与正常细胞的原代培养的条件基本相似。一般常用原代细胞的基础培养基,10%血清浓度即可,在原代培养时需加入原代细胞培养的特制添加物,或原患者血清(1%-2%)

家兔耳部取血实验

实验材料 家兔仪器、耗材 小动物实验台注射器酒精实验步骤 可采用耳缘静脉或耳中央动脉取血。首先拔去血管表面皮肤的毛,轻揉兔耳或用酒精涂抹皮肤使血管扩张。用注射器可从耳中央动脉抽取数毫升血。也可用针头刺破耳缘静脉末梢取血。

家兔心脏取血实验

实验材料家兔仪器、耗材小动物实验台注射器酒精实验步骤在第三肋间胸骨左缘3mm心脏搏动最强处,将针头垂直刺入心脏,血即进入注射器。一次可取血20~25ml。

家兔心脏取血实验

实验材料 家兔仪器、耗材 小动物实验台注射器酒精实验步骤 在第三肋间胸骨左缘3mm心脏搏动最强处,将针头垂直刺入心脏,血即进入注射器。一次可取血20~25ml。

家兔耳部取血实验

实验材料家兔仪器、耗材小动物实验台注射器酒精实验步骤可采用耳缘静脉或耳中央动脉取血。首先拔去血管表面皮肤的毛,轻揉兔耳或用酒精涂抹皮肤使血管扩张。用注射器可从耳中央动脉抽取数毫升血。也可用针头刺破耳缘静脉末梢取血。

热原检查采用家兔法

《中国药典》二部采用家兔法检查热原,将一定剂量的供试品静脉注入家兔体内,在规定时间内观察家兔体温升高的情况,以判定供试品中所含热原的限度是否符合规定。给家兔注射一定量的热原后,一般15~30分钟体温开始上升,70~120分钟达到最高峰。检查结果的准确性和一致性取决于试验动物的状况、实验室条件和操作的

细胞原代培养实验——组织块直接培养法

实验材料孕鼠新生小鼠试剂、试剂盒RPMI1640培养基牛血清胰蛋白酶Hanks液酒精青霉素链霉素仪器、耗材培养瓶青霉素瓶废液缸血球计数板蜡盘手术器械大头针离心管小玻璃漏斗三角烧瓶平皿吸管试管移液管无菌纱布无菌眼科剪实验步骤 一、将孕鼠或新生小鼠拉颈椎致死,置75%酒精泡2-3秒钟(时间不能过长、以免

家兔大血管取血实验

实验材料 家兔仪器、耗材 小动物实验台注射器酒精实验步骤 可采用颈静脉、股静脉和后肢小隐静脉取血。 (1)颈静脉和股静脉取血:首先麻醉做血管分离术。然后用注射器沿血管方向刺入抽取血液。 (2)后肢小隐静脉取血:首先使动物仰卧然后固定,在小腿上端扎橡皮管,小腿外侧皮下可见充盈的静脉,经皮穿刺可以取血。

家兔的抓取与固定实验

实验材料家兔实验步骤家兔易于驯服,一般不会咬人,但脚爪较锐利。抓取时切记忌强抓兔的耳朵、腰部或四肢。当兔在笼内安静下来时,打开笼门,用右手抓住颈部的被毛和皮肤,轻轻把动物提起,把兔拉至笼门口,头朝外,然后迅速用左手托起兔的臀部,给家兔以舒适安全感(图1)。按实验要求,可采取用手、兔台或兔盒固定。图1

家兔大血管取血实验

实验材料家兔仪器、耗材小动物实验台注射器酒精实验步骤可采用颈静脉、股静脉和后肢小隐静脉取血。 (1)颈静脉和股静脉取血:首先麻醉做血管分离术。然后用注射器沿血管方向刺入抽取血液。 (2)后肢小隐静脉取血:首先使动物仰卧然后固定,在小腿上端扎橡皮管,小腿外侧皮下可见充盈的静脉,经皮穿刺可以取血。 

家兔的抓取与固定实验

家兔易于驯服,一般不会咬人,但脚爪较锐利。抓取时切记忌强抓兔的耳朵、腰部或四肢。当兔在笼内安静下来时,打开笼门,用右手抓住颈部的被毛和皮肤,轻轻把动物提起,把兔拉至笼门口,头朝外,然后迅速用左手托起兔的臀部,给家兔以舒适安全感(图1)。按实验要求,可采取用手、兔台或兔盒固定。图1(1)用手固定:如须

特殊细胞培养实验_微载体细胞培养法

实验方法原理微载体细胞培养开始于60年代末期,最早使用离子交换凝胶作为载体,轻微搅动即可悬液在培养基中,因而可增加细胞附着的面积,达到大量培养细胞的目的。后来,根据细胞附着生长的特点,对微载体进行了改良,使其带有电荷或其它介质,更利于细胞附着和生长。这一方法亦可用于常规量的培养,也可用于大规模的培养

特殊细胞培养实验_悬浮培养法

实验方法原理悬浮培养是使贴附性细胞呈悬浮状态生长。如所培养的细胞本身属悬浮生长类型,则无须做任何处理,在传代时先做离心处理去除旧培养液,添加新培养液即可。但在培养贴附型细胞时,因其有贴附性,必须进行干扰使细胞不能贴附,才能形成悬浮状态生长的细胞。实验材料细胞仪器、耗材培养瓶搅拌器实验步骤1.  用大

麻醉家兔、大鼠心电图的测定实验

实验方法原理心电图是反映心脏电活动变化的图形,经常用到的是体表心电图(electrocardiogram,ECG)。体表心电图是通过导联线与四肢电极、胸电极连接采集的心电信号。有两种记录方式:全导联心电图记录和标准Ⅱ导联心电图记录。全导联心电图记录包括标准肢体导联、加压肢体导联、胸导联共12个记录,

麻醉家兔、大鼠心电图的测定实验

实验方法原理 心电图是反映心脏电活动变化的图形,经常用到的是体表心电图(electrocardiogram,ECG)。体表心电图是通过导联线与四肢电极、胸电极连接采集的心电信号。有两种记录方式:全导联心电图记录和标准Ⅱ导联心电图记录。全导联心电图记录包括标准肢体导联、加压肢体导联、胸导联共12个记录

我国第一块“细胞培养肉”诞生

   近日,南京农业大学教授周光宏团队用动物干细胞生产研发出我国第一块肌肉干细胞培养肉,该团队使用第六代猪肌肉干细胞,经过约20天培养得到重达5克的培养肉。  11月21日,中国农学会组织专家对该成果进行了技术评价,认为该成果有三个突破:首次分离得到了高纯度的猪肌肉干细胞和牛肌肉干细胞,突破了培养肉

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神

神经胶质细胞培养实验_酶消化法

神经胶质细胞培养可以:(1)获得神经胶质细胞;(2)用于神经胶质细胞电生理特性,如膜电位、去极化等;(3)用于免疫应答研究。实验方法原理胶质细胞具有复杂多样的结构和表达丰富的分泌产物,它含有大部分神经递质、神经肽、激素及神经营养因子受体、离子通道、神经活性氨基酸亲和载体、细胞识别分子,并能分泌多种神