流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验
实验步骤根据实验方案诱导细胞凋亡，制备单细胞悬液，使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸（PS）的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。2． 悬浮细胞在低温环境中，用PBS洗涤细胞2次（800～1000rpm离心，5min）。3． 弃上清，加入490μl预冷的结合缓冲液重悬细胞（细胞浓度为105～106／ml）。4． 加入5μl Annexin V-FITC和5μl PI于细胞悬浮液中，轻轻混匀。5． 将试管置于冰上，避光孵育10分钟。6． 上FCM检测。展开......阅读全文
流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验
实验步骤 根据实验方案诱导细胞凋亡，制备单细胞悬液，使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸（PS）的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。2． 悬浮细胞在低温环境中，用PBS洗涤细胞2次（800～
流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验
实验步骤 根据实验方案诱导细胞凋亡，制备单细胞悬液，使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸（PS）的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。2．
流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验
实验步骤根据实验方案诱导细胞凋亡，制备单细胞悬液，使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸（PS）的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。2． 悬浮细胞在低温环境中，用PBS洗涤细胞2次（800～1
流式细胞术细胞凋亡检测样品的制备实验
实验步骤 根据实验方案诱导细胞凋亡，制备单细胞悬液，使用 Annexin V-FITC 细胞凋亡检测试剂盒，通过Annexin V抗体与磷脂丝氨酸（PS）的特异性结合来检测细胞凋亡的情况。1． 将10×的结合缓冲液用蒸馏水稀释成为1×，冰育。2．
流式细胞术检测样品推荐制备方法
A. 直接标记抗体（FITC标记抗体）：(1) 收集1×106个细胞，800rpm离心5min，4℃以上冷PBS洗一次。(2) 用4%多聚甲醛1ml室温固定40分钟，800rpm离心5min去上清。加2ml PBS重悬洗涤细胞，800rpm离心5min。(3) 用1ml含5% 人血清的 PBS 重悬
流式细胞术的样品制备
样本制备的基本原则：1.使各种液体和悬浮细胞样本新鲜，尽快完成样本制备和检测；2.针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化或EDTA处理，以清除杂质，使粘附的细胞彼此分离而形成单细胞状态；3.对新鲜实体瘤组织可选用或联用酶消化法，机械打散法和化学分散法来获得足够数量的单细胞悬液；4.对石蜡包埋组织应先
流式细胞术检测细胞凋亡
实验概要Provides a rapid and convenient assay for apoptosis. 实验原理Apoptosis is a carefully regulated process of cell death that occurs as a normal part o
流式细胞术常规检测时的样品制备
一、流式细胞术常规检测时的样品制备 (一)直接免疫荧光标记法 取一定量细胞(约1X106细胞／ml)，在每一管中分别加入50μl的HAB，并充分混匀，于室温中静置1分钟以上(),再直接加入连接有荧光素的抗体进行免疫标记反应(如做双标或多标染色，可把几种标记有不同荧光素的抗体同时加入)，。孵育20
流式细胞术常用样品的制备方法
实验概要流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液，因此，在组织化学和免疫组织化学实验中欲对待测样品细胞进行分类计数，也需把样品制备成细胞悬液，并要求被检细胞大小为0.2～80pm，每个样品中至少有20 000个细胞，细胞浓度为105～107个／ml。制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测。本
流式细胞术的样品制备（七种样品的制备方法）（二）
四、外周血单个核细胞的制备1．取外周血2ml，肝素抗凝，用生理盐水将血稀释成4ml，混匀；2．将稀释后的血液沿试管壁徐徐加入4ml淋巴细胞分离液ficoll到液面之上，勿用力过大，以免造成血液与分离液混合，保持清晰地分层状态；3．离心2000r/min，30min，室温18~20℃，离心后可见试管内
流式细胞术的样品制备（七种样品的制备方法）（一）
流式细胞术的样品制备流式细胞术的实验检测对象是单细胞悬液，因此需把样品制备成细胞悬液，细胞浓度为105～107个／ml。制备成的单细胞悬液经荧光或免疫荧光标记即可上机检测。样本制备的基本原则：1.使各种液体和悬浮细胞样本新鲜，尽快完成样本制备和检测；2.针对不同的细胞样本进行适当洗涤、酶消化或EDT
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。实验材料实验样品试剂、试剂盒抗体、PBS溶液仪器、耗材移液器移液吸头离心机实验步骤一、不同来源样品的处理1 . 培养细
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
流式细胞术间接免疫荧光标记的样品制备实验
实验方法原理 取一定量的细胞悬液，先加入特异的第一抗体，待反应完全后洗去未结合抗体，在加入荧光标记的第二抗体，生成抗原-抗体复合物，以流式细胞仪检测其上标记的荧光素被激发后发出的荧光。 实
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法 实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性，主要包括以下几个方面： 1. 细胞核的改变 由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法 实验方法原理 主要根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
流式细胞仪检测细胞凋亡可以： 鉴定细胞凋亡形态； 可以准确的进行凋亡细胞的计数； 可以进行特异的定性分析和定量分析。 实验原理 细胞凋亡时，在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变，这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征
流式细胞仪检测细胞凋亡实验
实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变zui具特征性，主要包括以下几个方面：1. 细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变，造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性
细胞凋亡：流式细胞仪检测实验
用次GoZG1 DNA峰值计算细胞凋亡 用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞 通过TUNEL组织切面中的凋亡细胞的原位杂交 实验方法原理
细胞凋亡：流式细胞仪检测实验
实验方法原理 实验材料 要分析的细胞在FACS缓冲液中试剂、试剂盒 FACS缓冲液冰冷的100%乙醇（如果细胞是抗体标记的则用70%乙醇）1 mg ml RNase A含50μg ml 二碘化丙锭（PI)的PBS仪器、耗材 流式细胞仪实验步骤 1)凋亡刺激后，从培养液中沉淀所要分析的细胞，同样沉淀一
微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
实验步骤目前制备全血细胞样品的方法很多，且很成熟，常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后进行特异性荧光染色，其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP（免疫学样品处理器）进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或EDTA抗凝全血（100μl/份），置12×
微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
目前制备全血细胞样品的方法很多，且很成熟，常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后进行特异性荧光染色，其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP（免疫学样品处理器）进行快速制备微量全血样品的方法。1. 取肝素或ED
微量全血直接荧光染色法流式细胞术样品制备实验
实验步骤 目前制备全血细胞样品的方法很多，且很成熟，常用的方法是用淋巴细胞分离液分离淋巴细胞，然后进行特异性荧光染色，其染色方法与前面介绍的方法相同。下面主要介绍与流式细胞仪配套的Q-PREP（免疫学样品处理器）进行快速制备微量全血样品的方法。1
实验时间_流式细胞仪检测细胞凋亡实验
流式细胞仪检测细胞凋亡可以：鉴定细胞凋亡形态；可以准确的进行凋亡细胞的计数；可以进行特异的定性分析和定量分析。实验原理细胞凋亡时，在细胞、亚细胞和分子水平上会发生的特征性改变，这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等，其中细胞核的改变最具特征性。通过流式细胞仪检测这
流式细胞仪检测细胞凋亡实验protocol
40年来，流式细胞术一直由多色流式主导。 尽管Fulwyler发明的初代仪器基于库尔特体积，但荧光在短短几年内成为流式细胞仪主导技术。 从20世纪80年代初到现在，技术开发人员一直致力于构建能够测量更多荧光参数（我们通常将其称为“颜色”）的仪器。 最开始，Göhde在1968年首次发表关于荧光
流式细胞术的样本制备和实验设计
细胞来源和细胞悬液制备全血标本：1. 选择抗凝剂时要注意你要检测的抗原是否受抗凝剂中的组分影响？例如一些CD41抗体对EDTA非常敏感。2. 裂解液的选择，可选择自配的氯化铵裂解液（http://www.flowcyto.cn/bbs/thread-178-1-1.html）或者商业化含固定成份的裂
流式细胞仪检测实验_用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞
实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素（FITC)-链霉亲和素（streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机（或相当的
流式细胞仪检测实验用TUNEL流式细胞定量凋亡细胞
实验材料要分析的细胞试剂、试剂盒 PBS95%乙醇（不是100%乙醇）冰冷多聚甲醛固定液TdT反应液TdT 生物素-dUTP混合液异硫氰酸荧光素（FITC)-链霉亲和素（streptavidin)结合物仪器、耗材12 mm×75 mm圆底离心管配有269模型转子的IEC 6R6000离心机（或相当的
流式细胞术定量检测细胞凋亡的3种方法研究比较
细胞凋亡的定性检测依赖于形态学观察及DNA电泳,其定量检测则需借助于流式细胞检查。使用碘化丙啶(PI)染色检测DNA含量是最早出现的凋亡定量检测方法［1］。进入90年代,检测DNA断裂点的TUNEL(Terminal deoxylnucleotidyl transferase mediated-dU