高尔基体的分离实验_从大鼠肝脏中分离高尔基复合体

实验材料雄大鼠试剂、试剂盒匀浆缓冲液仪器、耗材Polytron 匀浆器实验步骤1. 将按要求进用标准食物和饮水的雄大鼠(约 250 g) ,用断头和放血的方法处死。2. 切下肝脏(10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 匀浆器(20 ST 或 10 ST;Brinkman lnslruments) 以 10000 r/min 的频率将每份肝脏在 2 倍体积的匀浆介质中处理 40 秒钟。匀浆缓冲液:50 mmol/L Tris -马来酸(Tris-maleate),pH 6.40.5 mol/L 蔗糖1% 葡聚糖(Sigma,平均分子量 225000)4. 将匀浆液于 5000 g 离心 15 分钟,去除大部分上淸,用一只装有橡胶球的大孔巴斯德吸管(内径约 1 mm ) 将沉淀中黄褐色的部分(上部 1/3 ) 重悬于少量的上清中。5. 用吸管将悬液吹吸大约 12 次使之混匀,将悬液铺在 1.2 mol/L......阅读全文

中间丝的分离方法实验——从培养的细胞中分离Ⅰ~Ⅲ型中间丝

实验材料细胞试剂、试剂盒蛋白酶抑制剂裂解缓冲液解聚缓冲液组装缓冲液仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 从培养皿或瓶中吸去培养基并用 5 ml 含蛋白酶抑制剂的冰冷的 PBS 洗细胞。2. 每 75cm2 瓶或培养皿用 1 ml 冰冷的裂解缓冲液 5 分钟裂解细胞。裂解缓冲液:在 PBS 中加入:1% Tr

大鼠神经元细胞的分离和培养实验

解离神经元培养物的制备 培养神经元的支持物的制备             实验材料 母鼠

成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养实验

分离ARVM细胞             实验材料 鼠 试剂、试剂盒

成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养实验

分离ARVM细胞             实验材料 鼠 试剂、试剂盒

大鼠神经元细胞的分离和培养实验

实验材料 母鼠试剂、试剂盒 BSS仪器、耗材 无菌器械显微镜实验步骤 1. 杀死怀孕 18 天母鼠(常用过量 CO2 使其窒息),用无菌器械取出胚胎,放在无菌的培养皿中。2. 取下胚胎的头,放在盛有 4 ml 不含 Ca2+ 和 Mg2+ 的平衡盐溶液(BSS)的培养皿中。3. 从头颅骨上取下脑,放

大鼠神经元细胞的分离和培养实验

解离神经元培养物的制备 培养神经元的支持物的制备             实验材料 母鼠

分离核仁实验——分离核仁

实验材料肝脏试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 制备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L MgCl20.34 mol/L 蔗糖,3 mmol/L MgCl22.3 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl

从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

            试剂、试剂盒 10 ml 革兰氏阴性菌培养液  原生质体缓冲液 50 mg ml 溶菌酶  革兰氏阴性菌裂解缓冲液   饱和 NaCl 溶液

从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

试剂、试剂盒 10 ml 革兰氏阴性菌培养液 原生质体缓冲液 50 mg ml 溶菌酶 革兰氏阴性菌裂解缓冲液 饱和 NaCl 溶液 DEPC 处理水 乙醇实验步骤 一 材料与设备1)10 ml 革兰氏阴性菌培养液,2) 原生质体缓冲液:15 mmol/LTris-Cl(pH8.0),0.45mol

大鼠原代细胞分离与培养

  一、大鼠神经元细胞(酶消化法)   简述:新生24h或E18胎鼠,取脑,剥离海马,剪碎,木瓜酶消化,清洗过筛后铺于多聚赖氨酸包被的培养板中。   二、大鼠雪旺细胞(植块法)   简述:新生24h大鼠,取坐骨神经,剥去外膜和束膜,剪成1mm3的小块,均匀铺于培养皿内,加少量血清,37℃ C

大鼠肝rRNA的提取与分离

            试剂、试剂盒 大鼠肝脏  苯酚 -甲酚混合液   萘 1.5-二磺酸溶液     洗涤液 A       洗涤液 B    

大鼠肝rRNA的提取与分离

大鼠肝经匀浆,离心取上清液,用苯酚、m-甲酚混合液提取 RNA。在萘 1,5-二磺酸的存在下,可使 rRNA 与 mRNA 等分离,得到纯 rRNA试剂、试剂盒大鼠肝脏苯酚 -甲酚混合液萘 1.5-二磺酸溶液洗涤液 A洗涤液 B乙醇溶液三异丙基萘磺酸钠无水乙醇实验步骤一 材料与设备1)大鼠肝脏 :大

大鼠肝rRNA的提取与分离

试剂、试剂盒 大鼠肝脏 苯酚 -甲酚混合液 萘 1.5-二磺酸溶液 洗涤液 A 洗涤液 B 乙醇溶液 三异丙基萘磺酸钠 无水乙醇实验步骤 一 材料与设备1)大鼠肝脏 :大鼠用颈部击打法处死 ,取出肝脏 ,立即置于液氮屮 ,备用    2)苯酚 -甲酚混合液 :将 500 g 苯酚(须重结晶)及 70

λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验

实验方法原理 如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说,λ 噬菌体在液体培养物中的生长不如平板裂解物中的。实验材料 噬菌体重组子大肠杆菌试剂、试剂盒 氯仿乙醇高盐缓冲液Tris-ClNaClEDT

λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验

如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说,λ 噬菌体在液体培养物中的生长不如平板裂解物中的。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地

λ噬菌体分离物的快速分析(从液体培养物中纯化λDNA)实验

            实验方法原理 如本方案所述,λ 噬菌体 DNA 可很容易地从液体培养物中纯化出来。而前一个方案则阐述了从平板裂解物中纯化 λ 噬菌体 DNA 的方法。一般来说,λ 噬菌体在液体培养物中的生长不如平板裂解物中的。

酵母细胞中质粒的加工实验——从酵母细胞中分离质粒

利用一个假定的突变通过互补作用克隆酵母菌基因的一般方法。该突变为cdc101-1,它对酵母菌的生长来说既是隐性的又是温度敏感的。它使酵母可以很正常地在30°C生长,而不能在37°C形成菌落。如果用一个酵母菌基因组文库转化cdc101-1菌株,通过分离温度不敏感菌落,那么就可能分离到一个可以互补这种突

2.7.3-从革兰氏阴性菌中快速分离RNA

试剂、试剂盒10 ml 革兰氏阴性菌培养液原生质体缓冲液50 mg ml 溶菌酶革兰氏阴性菌裂解缓冲液饱和 NaCl 溶液DEPC 处理水 乙醇实验步骤一 材料与设备1)10 ml 革兰氏阴性菌培养液,2) 原生质体缓冲液:15 mmol/LTris-Cl(pH8.0),0.45mol/L 蔗糖,8

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验——分离培养细胞

骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞,可用于(1)肌细胞的结构研究(2)肌细胞功能研究(3)对肌细胞的相关课题研究(4)临床细胞移植。实验方法原理骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分

从肝脏组织中制备细胞核实验

            实验材料 大鼠 试剂、试剂盒 裂解缓冲液 浓蔗糖溶液

从肝脏组织中制备细胞核实验

实验材料大鼠试剂、试剂盒裂解缓冲液浓蔗糖溶液仪器、耗材超速离心机组织研磨器实验步骤1. 配制裂解缓冲液和浓蔗糖溶液(PMSF 在使用前添加),冰上放置。裂解缓冲液:0.25 mol/L 蔗糖网织红细胞标准缓冲液(RSB)0.25 mol/L 蔗糖(超级纯)10 mmol/ Tris-HCl (pH7

泡菜中乳酸菌分离实验

实验方法原理 乳酸菌都是一些兼厌氧菌,革兰氏阳性,杆状或球状,无芽孢,不运动,分解和合成能力较差,营养要求较高,需提供丰富的肽类、氨基酸和维生素,它们缺乏呼吸链成分、超氧化物歧化酶和过氧化氢酶,在琼脂培养基表面或内层只形成较小的白色或淡色菌落。常用的分离培养基有番茄汁碳酸钙琼脂培养基、麦芽汁碳酸钙琼

λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验

对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析,通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物,并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成(由噬菌体 SP6、T3 和 T7 编码的依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶来完成)的模板以及 PCR 的模板。本

λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验

实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析,通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物,并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成(由噬菌体 SP6、T3 和 T7 编码的依赖于 DNA 的 RNA 聚合酶来完成)的模板以

λ噬菌体分离物的快速分析(从平板裂解物中纯化λDNA)实验

            实验方法原理 对有希望的基因组或 cDNA 克隆的分析,通常开始于用限制酶消化 λ 噬菌体 DNA 的小量制备物,并对消化产物进行琼脂糖凝胶电泳分析。所获得的 DNA 可用作限制酶的底物、RNA 合成(由噬菌体 SP6、T3 和 T7

RNA分离与分析实验_分离RNA

实验材料标记细胞试剂、试剂盒乙酸缓冲液仪器、耗材漩涡器实验步骤1. 收获标记细胞。2. 小心处置上清液,用含 0.3% SDS 的 10 mmol/L 乙酸缓冲液悬浮细胞沉淀,每 1 ml 压积细胞用 10 ml 缓冲液。3. 于室温用漩涡器振荡裂解细胞。4. 加等体积的水饱和酚,充分混匀,于 60

血清怎么从血里分离

人体的血液由有形成分和无形成分组成,白血球、红血球、血小板是有形成分,血清是血液中的无形成分。用显微镜可以观察到血液中的白血球、红血球、血小板等有形成分,血清为去除纤维蛋白原后的无形成分,颜色微黄,透亮。血清的基本成分是水,水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分,也溶有人体代谢产物。血清

血清怎么从血里分离

人体的血液由有形成分和无形成分组成,白血球、红血球、血小板是有形成分,血清是血液中的无形成分。用显微镜可以观察到血液中的白血球、红血球、血小板等有形成分,血清为去除纤维蛋白原后的无形成分,颜色微黄,透亮。血清的基本成分是水,水中溶有蛋白质、脂肪、糖、无机盐、维生素等营养成分,也溶有人体代谢产物。血清

从脐静脉分离干细胞

试剂和材料:1. 培养基:完全LG-DMEM:含2mmol/L的左旋谷氨酰胺的低糖DMEM,添加10%热灭活胎牛血清,100U/ml青霉素和100μg/ml链霉素;2. PBSA;3. 胰蛋白酶,0.05%,含EDTA;4. 胶原酶A,0.1%用PBSA配制;5. 培养瓶;6. 导管;实验方法:1.

大鼠外周血淋巴细胞分离液

【检验方法】全过程样本、试剂及实验环境均需在20±2℃的条件下进行。首先取抗凝血按体积比 1:1的比例与样本稀释液(产品编号:2010C1119)混匀,根据稀释后的样本量大小,分以下两种情况:情况 A:稀释后的血液样本量小于 5ml时,实验方法如下:1.取一支15ml离心管,先加入与稀释后样本等量的