高尔基体的分离实验_从大鼠肝脏中分离高尔基复合体

实验材料雄大鼠试剂、试剂盒匀浆缓冲液仪器、耗材Polytron 匀浆器实验步骤1. 将按要求进用标准食物和饮水的雄大鼠(约 250 g) ,用断头和放血的方法处死。2. 切下肝脏(10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 匀浆器(20 ST 或 10 ST;Brinkman lnslruments) 以 10000 r/min 的频率将每份肝脏在 2 倍体积的匀浆介质中处理 40 秒钟。匀浆缓冲液:50 mmol/L Tris -马来酸(Tris-maleate),pH 6.40.5 mol/L 蔗糖1% 葡聚糖(Sigma,平均分子量 225000)4. 将匀浆液于 5000 g 离心 15 分钟,去除大部分上淸,用一只装有橡胶球的大孔巴斯德吸管(内径约 1 mm ) 将沉淀中黄褐色的部分(上部 1/3 ) 重悬于少量的上清中。5. 用吸管将悬液吹吸大约 12 次使之混匀,将悬液铺在 1.2 mol/L......阅读全文

高尔基体的分离实验_从大鼠肝脏中分离高尔基复合体

实验材料雄大鼠试剂、试剂盒匀浆缓冲液仪器、耗材Polytron 匀浆器实验步骤1. 将按要求进用标准食物和饮水的雄大鼠(约 250 g) ,用断头和放血的方法处死。2. 切下肝脏(10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 匀浆器(20 ST 或 10 ST;Brinkman

高尔基体的分离实验

实验材料 雄大鼠试剂、试剂盒 匀浆缓冲液仪器、耗材 Polytron 匀浆器实验步骤 1. 将按要求进用标准食物和饮水的雄大鼠(约 250 g) ,用断头和放血的方法处死。2. 切下肝脏(10~13 g ) 并用刀片切碎。3. 用一只 Polytron 匀浆器(20 ST 或 10 ST;Brink

高尔基体的分离实验

从大鼠肝脏中分离高尔基复合体 从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体 从植物组织中分离高尔基体             实验材料 雄大鼠

高尔基体的分离实验

从大鼠肝脏中分离高尔基复合体从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体从植物组织中分离高尔基体实验材料雄大鼠                                                          试剂、试剂盒匀浆缓冲液                              

分离核仁实验—从人肝脏或胎盘组织中分离核仁

实验材料组织试剂、试剂盒NKM仪器、耗材粗孔滤纸Teflon-玻璃匀浆器实验步骤1. 准备溶液:NKM:0.13 mol/L NaCl,5 mmol/L KCl,8 mmol/L 乙酸镁2.2 mol/L 蔗糖,10 mmol/L MgCl20.88 mol/L 蔗糖0.34 mol/L 蔗糖,含

从植物组织中分离高尔基体

实验材料新鲜组织试剂、试剂盒匀浆介质仪器、耗材研钵和杵离心机实验步骤1. 先用剪刀大致剪切叶片或茎杆,然后在少量的介质中用刀片切成碎片。2. 对于 1 g 新鲜组织,在 1 ml 介质中用研钵和杵捣碎使组织匀浆化。匀浆介质:50 mmol/L FiEPES10 mmol/L KCI1 mmol/L

用差速离心法从大鼠肝脏中分离原代细胞重线粒体组分

试剂和器材1. 甘露醇缓冲液:0.2mol/L甘露醇、50mmol/L蔗糖溶液、10mmol/L KCl、1mmol/L乙二胺四乙酸、10mmol/L Hepes-NaOH,pH7.4;2. 玻璃棒;3. Dounce匀浆器(20—30ml宽松配制,Wheaton B型);4. 高转矩桥式电动机(半

大鼠肝细胞分离实验

实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒 L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗

大鼠肝细胞分离实验

实验方法原理经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。试剂、试剂盒L-15 Leibovitz 培养液Ham F12 培养液胞培养液HMM SF无钙 HEPES 缓冲液胶原蛋白酶液5% 戊巴比妥钠肝素仪器、耗材聚

从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离

实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料 切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒 溶液 A 蔗糖溶液 B仪器、耗材 Doimce 氏玻璃匀浆器离心管 折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤 材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

实验材料切碎的大鼠肝脏试剂、试剂盒溶液 A蔗糖溶液 B仪器、耗材Doimce 氏玻璃匀浆器离心管折射仪SW-28 转头及薄壁 polyallomer(同质异晶聚合物)SW-28 离心管实验步骤材料与设备切碎的大鼠肝脏(约 25 g; 冷冻保存至用前)注:人的胎盘是极好的制取胰岛素受体的原料。遗憾的是

分离肝脏质膜的-Neville-法实验

分离肝脏质膜的 Neville 法实验             实验材料 切碎的大鼠肝脏 试剂、试

线粒体分离实验—从组织中分离线粒体

实验材料肝脏试剂、试剂盒MS仪器、耗材匀浆器实验步骤1. 取出肝脏,注意不要弄破胆囊。放进一置于冰上的烧杯中,剪去任何结缔组织。称其质量后放回烧杯中。用锋利的剪刀、手术刀或剃须刀片将之切成 1~2 mmol/L 的薄片,用匀浆缓冲液(1x MS) 冲洗两次以去除大部分的血。转移至匀浆器中。加入足够的

从培养的哺乳动物细胞中分离高尔基体

实验材料细胞试剂、试剂盒粗匀浆液仪器、耗材塑料离心管实验步骤1. 向 6 ml 的粗匀浆液中(细胞收获后以大约 5X105 /ml 悬于 0.25 mol/L 蔗糖,10 mmol/L pH 7.4 的 Tris-HCl 中),加入 6 ml 含有 10  mmol/L pH 7.4 Tris-HC

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离             实验材料 叶子组织 试剂、试剂盒

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离实验材料叶子组织                                                          试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液                                                          

方案23.6-大鼠肝细胞分离实验

            实验方法原理 经肝门静脉或肝门静脉分支插管,用无钙缓冲液灌洗肝 15 min,再用酶溶液灌洗 15 min。收集和洗涤细胞,计数有活力的肝细胞。 试剂、试剂盒

中间丝的分离方法实验——从组织中分离中间丝

实验材料牛舌试剂、试剂盒解聚缓冲液组装缓冲液匀浆缓冲液抽提缓冲液柱缓冲液PEM 缓冲液仪器、耗材离心机实验步骤一、从牛舌上皮分离角蛋白中间丝1. 从当地屠宰场拿到新鲜牛舌。一条舌头通常可以产出几十毫克纯化了的角蛋白中间丝。2. 用刀片切刮,把舌中的肌肉和黏膜分开。舌黏膜片(大约 1cmx1 cm )

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验_分离及培养程序

实验材料Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒胰酶液乙醇仪器、耗材搅拌台烧杯实验步骤组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3. 做一个

成年大鼠心室肌肉细胞的分离和培养实验_分离ARVM细胞

实验材料鼠试剂、试剂盒KH 缓冲液混合气体仪器、耗材对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床圈型架蠕动泵台式医用离心机无菌烧杯ColorpHast pH 试纸实验步骤一、ARVM 细胞分离的准备工作1. 准备如下设备及器材:对流工作台或层流式超净台乙醚罩冷凝器循环水浴和水浴摇床带夹的圈

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料叶组织                                                          试剂、试剂盒研磨悬浮缓冲液                                                          仪器、耗材烧杯      

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料叶组织试剂、试剂盒研磨悬浮缓冲液仪器、耗材烧杯Polytron 匀浆器实验步骤1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲匀浆叶组

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

            实验材料 叶组织 试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液 仪器、耗材

从拟南芥菜中分离叶绿体实验

实验材料 叶组织试剂、试剂盒 研磨悬浮缓冲液仪器、耗材 烧杯Polytron 匀浆器实验步骤 1. 组织匀浆(1) 收集 10 g 叶组织,放进一 400 ml 的烧杯中。(2) 加入 200 ml 冰冷的研磨悬浮缓冲液。在 4℃ 的房间中,用 Polytron 匀浆器进行 6~7 个 3 秒钟脉冲

线粒体分离实验—从组织培养细胞中分离线粒体

实验材料细胞试剂、试剂盒RSBMS 缓冲液仪器、耗材Dounce 匀浆器实验步骤1. 用 11 ml 冰上预冷过的 RSB 重新悬浮细胞,转移到一个 15 ml 的 Dounce 匀浆器中RSB(使组织培养细胞膨胀的低渗缓冲液)10 mmol/L NaCl2.5 mol/L MgCl210 mmol

从实体组织中制备粗微体实验_从大鼠肝脏制备微体

实验材料雄大鼠试剂、试剂盒蔗糖蔗糖HM仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 用断颈法杀死约 150 g 重的雄大鼠,大鼠的数量取决于要制备的粗微体的数量。由于一个 150 g 重的大鼠肝(6 g)大约每克肝蛋白含有 10 mg 粗微体,所以大鼠的数量可以以回收率为 50% 来进行估计。2. 流干血液后,打开

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验

分离及培养程序             实验材料 Sprague Dawley 幼鼠 试剂、试剂盒

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验

实验材料 Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒 胰酶液乙醇仪器、耗材 搅拌台烧杯实验步骤 组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3.

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验

分离及培养程序             实验材料 Sprague Dawley 幼鼠 试剂、试剂盒