Nature发表基于选择性非同源末端连接修复的基因治疗方法
近年来，由核酸酶介导的靶向基因组编辑技术发展迅速，CRISPR/Cas9基因编辑系统以其简便性、高效性等特点而备受关注。CRISPR/Cas9系统对致病基因突变进行纠正通常是利用DNA同源重组修复来实现的，该过程需要同时提供一个外源DNA作为供体以重新编码DNA序列达到基因编辑的目的。但伴随而来的，有诸如低切除频率和潜在的序列重新整合等问题【1】。 DNA双链断裂（Double-strand breaks, DSBs）的修复通路主要有非同源末端连接修复（Non-homologous end-joining, NHEJ）和同源重组修复（Homologous recombination, HR）两种。除此之外，还存在不常用的选择性非同源末端连接修复（Microhomology-mediated end joining，MMEJ，也叫Alternative-NHEJ, Alt-NHEJ），它主要利用损伤区域的微同源片段（2-25......阅读全文
Nature发表基于选择性非同源末端连接修复的基因治疗方法
近年来，由核酸酶介导的靶向基因组编辑技术发展迅速，CRISPR/Cas9基因编辑系统以其简便性、高效性等特点而备受关注。CRISPR/Cas9系统对致病基因突变进行纠正通常是利用DNA同源重组修复来实现的，该过程需要同时提供一个外源DNA作为供体以重新编码DNA序列达到基因编辑的目的。但伴随而来
DNA损伤修复机制——非同源末端链接NHEJ和同源重组HR
生命极其脆弱，我们每天在电子辐射、紫外线、雾霾等等各种外部环境及细胞代谢产物等内源因素影响下，我们生命的核心-DNA都会受到不同程度的损伤，其中DNA双链断裂（DSBs，Double strand breaks）是损伤中最为严重的一种，然而生命却又极其强大，我们无时无刻不在受伤，也无时无刻不
DNA损伤修复机制——非同源末端链接NHEJ和同源重组HR
生命极其脆弱，我们每天在电子辐射、紫外线、雾霾等等各种外部环境及细胞代谢产物等内源因素影响下，我们生命的核心-DNA都会受到不同程度的损伤，其中DNA双链断裂（DSBs，Double strand breaks）是损伤中最为严重的一种，然而生命却又极其强大，我们无时无刻不在受伤，也无时无刻不在自
DNA损伤修复机制——非同源末端链接NHEJ和同源重组HR
【干货】拯救你受伤的DNA-NHEJ与HR生命极其脆弱，我们每天在电子辐射、紫外线、雾霾等等各种外部环境及细胞代谢产物等内源因素影响下，我们生命的核心-DNA都会受到不同程度的损伤，其中DNA双链断裂（DSBs，Double strand breaks）是损伤中最为严重的一种，然而生命却又极
我科研人员实现先天性遗传疾病的在体基因治疗
北京脑科学与类脑研究中心熊巍实验室利用一株模拟人类DFNB23遗传性耳聋的Pcdh15av-3j小鼠品系，全方位展示了突变位点附近产生的DNA双链切割/断裂，可以通过非同源末端连接通路实现移码突变的修复以及听觉和平衡觉功能的部分修复。该工作首次在哺乳动物模型上展示了利用非同源末端连接的基因修复通
在凸出末端上连接接头实验
实验材料 T4 噬菌体 DNA 连接酶多聚核苷酸激酶限制性内切核酸酶试剂、试剂盒 ATP乙醇接头激酶缓冲液苯酚氯仿乙酸钠TE仪器、耗材 层析设备水浴装置实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液ATP (10 mmol/L)，乙醇，10x 接头激酶缓冲液，苯酚：氯仿（1:1, V/V），乙酸钠（3 mol
在凸出末端上连接接头实验
在凸出末端上连接接头实验 实验材料 T4 噬菌体 DNA 连接酶 多聚核苷酸激酶 限制性内切核酸酶
在凸出末端上连接接头实验
实验材料T4 噬菌体 DNA 连接酶多聚核苷酸激酶限制性内切核酸酶试剂、试剂盒ATP乙醇接头激酶缓冲液苯酚氯仿乙酸钠TE仪器、耗材层析设备水浴装置实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液ATP (10 mmol/L)，乙醇，10x 接头激酶缓冲液，苯酚：氯仿（1:1, V/V），乙酸钠（3 mol/L,
向平末端DNA连接合成接头实验
实验方法原理 接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段，一般长 8~16 个核苷酸，互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。实验材料 T4 噬菌体连接酶T4 噬菌体多聚核苷酸激酶限制性内切核酸酶外源或目的 DNA 片段试剂、试剂盒 乙酸胺ATP乙醇10X 接头激酶缓冲液MgCl2
向平末端DNA连接合成接头实验
实验方法原理 接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段，一般长 8~16 个核苷酸，互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。 实验材料
向平末端DNA连接合成接头实验
接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段，一般长 8~16 个核苷酸，互补的片段复性后可形成平末端的含有一个酶切位点的双链分子。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理接头是指合成的能够自身互补的 DNA 片段，一般长 8~16 个核苷酸，互补的片段复性后可形成平末端的含有一个
《细胞报告》：从“体内”唤醒“寂静”的基因
听力残疾位居我国各类残疾之首，其中60%的耳聋由遗传因素引起。基因治疗是治疗基因突变导致的遗传性耳聋的金钥匙，尤其是针对DNA的基因修复，更是被给予“治本”的希望。 7月12日，《细胞报告》发表了北京脑科学与类脑研究中心研究员（原清华大学生命学院副教授）熊巍团队与合作者的最新进展，他们首次在哺
RNA为模板－首次实现植物同源重组修复
中国农业科学院作物科学研究所作物转基因技术与应用创新团队与美国加州大学圣地亚哥分校合作,使用核糖核苷酸（RNA）作为同源重组修复（HDR）的模板，成功获得后代无转基因成分的抗ALS抑制剂类除草剂水稻植株。这是在植物中首次成功利用RNA作为脱氧核糖核酸（DNA）同源重组修复模板。相关研究论文北京时
关于同源重组的双股断裂修复模型介绍
双股断裂修复模型（ double-strand break repaii。mnodel）也将同源重组分为四个阶段。 1、同源序列配对。 2、形成3’端突出结构，即配对同源序列之一的DNA双链水解，并由5’外切核酸酶水解，形成3'端突出结构（即3’黏端）（①~②） 3、形成Holli
Nature：首次实时观察染色体末端修复
维护染色体的两端——称为端粒，可让细胞不断分裂，并实现永生。宾夕法尼亚大学医学院肿瘤生物学副教授Roger Greenberg说：“端粒就像鞋带末端的塑料帽，它们能防止DNA受到磨损。”本周在《Nature》发表的一项新研究中，资深作者Greenberg和他的同事们首次开发了一个系统，可观察新合
Nature：首次实时观察染色体末端修复
维护染色体的两端——称为端粒，可让细胞不断分裂，并实现永生。宾夕法尼亚大学医学院肿瘤生物学副教授Roger Greenberg说：“端粒就像鞋带末端的塑料帽，它们能防止DNA受到磨损。”本周在《Nature》发表的一项新研究中，资深作者Greenberg和他的同事们首次开发了一个系统，可观察新合
Nature:－在非分裂期细胞中实现基因打靶的可能
基因打靶技术，是利用同源重组的方法，建立基因定点敲除细胞系或获得基因定点敲除动物。无论CRISPR/Cas还是TALEN,都是通过造成靶位点的双链断裂，诱导靶基因产生突变。而通过同源重组实现的DNA修复在G1期的细胞中是高度抑制的，以确保有丝分裂只发生在姐妹染色单体之间。因而只也是在DNA复制之
RNA修复模板在植物中实现CRISPR/Cpf1同源重组修复
借助 CRISPR/Cas 系统介导的 HDR，实现优异等位基因替换和基因定点插入，进而创制农作物新种质，是农作物基因组编辑研究的热点和重要课题之一。但目前这一技术的广泛应用仍十分具有挑战性，主要原因在于：1）CRISPR/Cas系统引起的基因组靶位点DNA序列双链断裂（Double-stran
DNA损伤修复信号通路MRE11基因的临床解释
该基因编码一种核蛋白，参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物；该复合物用于dna末端的非同源连接，并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合，这
MRE11基因的结构特点及生理功能
该基因编码一种核蛋白，参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物；该复合物用于dna末端的非同源连接，并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合，这
关于同聚寡核苷酸末端连接的基本介绍
同聚寡核苷酸末端连接(也叫同聚物加尾连接、同聚末端连接)，是在脱氧核苷酸转移酶(terminal transferase,也称DNA 转移酶、末端转移酶) 的作用下可以在DNA 的3'； 一羧基端合成低聚多核苷酸(添加同聚物造成延伸部分)。如果把所需要的DNA 片段接上低聚腺嘌呤核苷酸(d
MRE11A基因的结构及作用
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物；该复合物是DNA末端非同源连接所必需的，具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合，在体外利用靠近DN
细胞周期信号通路MRE11A基因的临床解释
该基因编码一种参与同源重组、端粒长度维持和DNA双链断裂修复的核蛋白。该蛋白本身具有3’到5’的核酸外切酶活性和核酸内切酶活性。该蛋白与RAD50同系物形成复合物；该复合物是DNA末端非同源连接所必需的，具有增加的单链DNA内切酶和3’到5’的外切酶活性。该蛋白与DNA连接酶结合，在体外利用靠近DN
《细胞报告》：从“体内”唤醒“寂静”的基因
原文地址：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2022/7/482551.shtm 听力残疾位居我国各类残疾之首，其中60%的耳聋由遗传因素引起。基因治疗是治疗基因突变导致的遗传性耳聋的金钥匙，尤其是针对DNA的基因修复，更是被给予“治本”的希望。 7月12
DNA为本：熊巍团队通过在体基因编辑治疗遗传性耳聋
北京脑科学与类脑研究中心（CIBR）熊巍实验室在 Cell 子刊 Cell Reports 上发表了题为：Template-independent genome editing in the Pcdh15 av-3j mouse, a model of human DFNB23 nonsyndr
糖原非还原性末端的磷酸解
糖原非还原性末端的磷酸解：糖原磷酸化酶催化糖原的磷酸解作用，使糖原分子从非还原端逐个断开α-1，4-糖苷键移去葡萄糖基，释放1-磷酸葡萄糖，直至临近糖原分子α-1，6-糖苷键分支点前4个葡萄糖基处。葡萄糖通过糖原磷酸化酶从糖原上释放。糖原磷酸化酶能将糖原分子表面支链上的葡萄糖分子降解下来。这种酶是由
科学家以RNA为模板首次在植物中实现同源重组修复
日前，中国农业科学院研究人员与美国加州大学圣地亚哥分校合作，使用RNA作为同源重组修复的模板，并分别利用核酶自切割和具有RNA/DNA双重切割能力的基因编辑系统，获得后代无转基因成分的抗ALS抑制剂类除草剂水稻植株。该研究在植物中首次利用RNA作为同源重组修复模板，开辟了利用植物RNA作为同源供
实体肿瘤检测MRE11基因介绍
该基因编码一种核蛋白，参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物；该复合物用于dna末端的非同源连接，并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合，这
研究揭示植物调控同源重组修复的新机制
近日，华中农业大学生命科学技术学院教授严顺平团队在国际学术期刊PNAS在线发表成果。该研究不仅揭示了植物调控同源重组修复的新机制，也为利用同源重组修复机制提高植物基因打靶效率提供了新思路。同时，该研究还首次揭示了植物调控SOG1蛋白稳定性的机制，具有重要的科学意义。所有生物都需要把正确的遗传信息（D
DNA损伤修复信号通路相关因子MRE11
该基因编码一种核蛋白，参与同源重组、端粒长度维持和dna双链断裂修复。蛋白质本身具有3'到5'的外切酶活性和内切酶活性。该蛋白与rad50同源物形成复合物；该复合物用于dna末端的非同源连接，并具有增加的单链dna内切酶和3'到5'的外切酶活性。与dna连接酶结合，这