Antpedia LOGO WIKI资讯

用[32P]磷酸标记细胞实验_标记悬浮培养的HeLa细胞

实验材料细胞试剂、试剂盒磷酸仪器、耗材无磷酸培养基实验步骤1. 培养细胞至对数期,600 g 离心 5 分钟。2. 弃上清,用无磷酸培养基悬浮细胞。3. 培养细胞 3~4 小时以耗尽它们的磷酸储备。4. 再次离心,弃上清,用无磷酸培养基悬浮,加 32P 磷酸盐至 20 μCi/ml 培养液,培养 16 小时。5. 提取并分析 RNA。......阅读全文

mRNA 3'末端体外加工

            实验材料 对数生长期的 HcLa 细胞 与所使用启动子相对的 RNA 聚合酶 酵母 tRNA 经超卢断裂鲑精 DNA

3.9 mRNA 3'末端体外加工

体外实验有两种策略;一是将 包 含 Po ly( A) 位点目标基因的质粒与无细胞提取物共同孵育,以 使 RNA 聚 合 酶 II 转录目标基因,并对最初的转录进行加工;另一种策略是利用标准的噬菌体聚合酶驱动系统合 成 前 mRNA,然后与无细胞提取物共同孵 育 。实验材料对数生长期的 HcLa 细