制备肌动蛋白实验——由骨骼肌丙酮粉制备肌动蛋白
实验材料骨骼肌丙酮粉试剂、试剂盒肌动蛋白解聚缓冲液仪器、耗材超速离心机实验步骤1. 准备贮存液和材料0.1 mol/L K+ATP,pH 7.00.1 mol/L DTT(冻存在 -20℃,避免反复冻融)0.1 mol/L CaCl20.1 mol/L Tris-HCl,pH 8.0肌动蛋白解聚缓冲液(惯称冷缓冲液 A):2 mmol/L Tris-HCI,pH 8.00.2 mmol/L ATP0.5 mmol/L DTT0.2 mmol/L CaCl2该缓冲液可以配制成不含 CaCl2 的 50x 贮存液并冻存(-20℃ )。2. 10 g 肌肉丙酮粉(用上文方法制备)和 200 ml 缓冲液 A 混合并在 0℃ 搅拌抽提 30 分钟。3. 不溶的碎片离心(SS-34 转头,16000 r/min,19950 g)10 分钟。4. 保留上清,0℃ 下在 20 ml 缓冲液 A 里重新抽提沉淀物 10 分钟。5. 再......阅读全文
铜丝或铜粉硝化制备方法介绍
将铜丝或铜粉溶于6mol/L硝酸中保持铜稍过量,加热至溶液pH值3-4,以除去氢氧化铁沉淀,然后与10%(质量)的碳酸钠溶液混合,加热沸腾,有碱式盐析出,弃去上层清液,用水充分洗涤、过滤、干燥。将干燥的碱式碳酸铜在充分搅拌下于小火加热分解为黑色氧化铜粉末。
关于中心肌动蛋白的基本信息介绍
中心肌动蛋白是与肌动蛋白同源的蛋白质,结合于脊椎动物细胞中心体,在种属间高度保守。肌动蛋白是一种中等大小的蛋白质,由375个氨基酸残基组成,并且是由一个大的、高度保守的基因编码。以两种形式存在,即单体和多聚体。单体的肌动蛋白是由一条多肽链构成的球形分子,又称球状肌动蛋白(globular act
ACTL6A肌动蛋白的结构特点及作用
该基因编码肌动蛋白相关蛋白(arps)的一个家族成员,与传统肌动蛋白具有显著的氨基酸序列同源性。肌动蛋白和ARPs都有肌动蛋白折叠,这是ATP结合裂缝,是一个共同的特征ARPs参与多种细胞过程,包括囊泡转运、纺锤体定向、核迁移和染色质重塑该基因编码哺乳动物BAF(BRG1/brm相关因子)复合物的5
ACTG2肌动蛋白的结构特点及作用
肌动蛋白是高度保守的蛋白质,参与各种类型的细胞运动和维持细胞骨架。脊椎动物中有三种肌动蛋白,α,β和γ。α-肌动蛋白存在于肌肉组织中,是收缩装置的主要组成部分β和γ-肌动蛋白在大多数细胞类型中共存,作为细胞骨架的组成部分,并作为细胞内运动的调节剂。这个基因编码肌动蛋白γ2;在肠组织中发现的一种平滑肌
关于细胞骨架—微丝的基本信息介绍
细胞骨架—微丝微丝(microfilament)也普遍存在于所有真核细胞中,是一个实心状的纤维,直径为4nm-7nm一般细胞中含量约占细胞内总蛋白质的1%-2%,但在活动较强的细胞中可占20%-30%。在一般细胞主要分布于细胞的表面,直接影响细胞的形状。微丝具有多种功能,在不同细胞的表现不同,在
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白纯化实验_DEAE纯化肌肉肌球蛋白
实验材料肌肉肌球蛋白试剂、试剂盒焦磷酸钠柱平衡缓冲液柱缓冲液高盐缓冲液肌球蛋白-DEAE 透析缓冲液仪器、耗材SDS-PAGE实验步骤一、准备 DEAE 柱和材料1. 准备贮存液和材料200 mmol/L 焦磷酸钠(NaPPi ),pH 7.0用 HCl 和 H3PO4 调 NaPPi 溶液的 pH
肌肉肌球蛋白和肌动蛋白的纯化实验——肌球蛋白的纯化
实验材料冷冻肌肉试剂、试剂盒肌球蛋白抽提溶液仪器、耗材玻璃器皿实验步骤1. 准备下面的贮存液(都冷却到 4℃)。肌球蛋白抽提溶液:0.5 mol/L KCl,0.1 mol/L K2HPO4几升冷的用玻璃器皿蒸馏过的水(dH2O)4 mol/L KCl0.5 mol/L KCI0.5 mol/L C
单克隆抗体上清制备实验——大量制备
实验材料目的杂交瘤试剂、试剂盒完全 DMEM-10 培养液(含 5~10 mmol/L HEPES pH 7.2~7.4)仪器、耗材250 ml 无菌锥形离心管转瓶培养装置850 cm2 旋转培养瓶175 cm2 组织培养瓶实验步骤1. 重复基本方案 1 步骤 1,并按 1:10 分传到终体积为 1
散剂的制备实验
示例法 实验材料 碳酸氢钠 氧化镁 试剂、试剂盒
巧克力平板制备实验
实验方法原理主要是蛋白胨和牛肉粉用来提供细菌生长所需的碳源、氮源、氨基酸以及维生素。氯化钠维持培养基中的渗透压,琼脂用做凝固剂。脱纤维羊血提供氯化血红素和辅酶I,为嗜血杆菌属的生长提供特殊营养。巧克力平板培养基还能够培养其他细菌,主要的原因是血液中有V、X因子,这两种因子是位于红细胞中的,一般细菌不
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒 分级分离桥粒 实验材料 牛口鼻部或舌头
桥粒的制备实验
从牛舌或牛口鼻部分离桥粒分级分离桥粒实验材料牛口鼻部或舌头 试剂、试剂盒柠檬酸缓冲液
细菌RNA制备实验
实验材料 RNA试剂、试剂盒 STET氯仿乙酸钠氯化铯无水乙醇EDTA仪器、耗材 离心机分光光度计摇床实验步骤 1. 培养100 ml 大肠杆菌或500 ml 蓝细菌至对数生长期,加入1/20体积终止缓冲液,置于冰上。2. 于4℃用JA-10转子17 700 g 离心5 min 收集细胞。3.
制备电泳实验——洗脱
蛋白质的分离纯化是研究其结构、特性和功能的基础,诸如一级结构、溶液构象、晶体结构、免疫功能和生物机理等研究都必须用一定量并具有活性的纯样品作为研究材料。本实验来源「蛋白质电泳实验技术」主编:郭尧君。实验方法原理严格来说洗脱不能达到制备的目的,它只能得到微克到毫克级的样品。通常是用其他方法分离的粗样品
巧克力平板制备实验
实验方法原理 巧克力平板应用羊血或免血制备。因其中含有Ⅹ和Ⅴ因子,嗜血杆菌、奈瑟氏菌等生长良好,凡疑有这些菌种存在的标本,均须接种巧克力平板。血液标本培养,增苗后有细苗生长,若移种巧克力平板上,有利于分离到更多的细菌。实验步骤 成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
血平板制备实验
实验方法原理 肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤 成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
细菌RNA制备实验
革兰氏阴性细菌中提取 革兰氏阳性细菌中提取 实验材料 RNA 试
血平板制备实验
实验方法原理肉汤琼脂中加羊血或兔血均可。用血量为5-7%。在血平板上除了可以观察菌落的形态外,还可判断溶血情况,菌落周围的培养基内红细胞完全破坏为β-溶血。菌落周围成绿色为α-溶血。溶血情况可以显微镜下用低倍镜观察。实验步骤成分:牛肉浸出液: 1000 ml蛋白胨:
简述三氧化二锰粉体的制备
取一定量的天然二氧化锰矿,烘干,粉磨至全部通过100目筛,在700℃的转炉中热分解焙烧1.5 h,使天然二氧化锰矿粉中 MnO2 转化为 Mn2O3,取出粉体冷却到常温,充分研碎即得Mn2O3粉体。
高烧结活性陶瓷前驱粉体制备成功
日前,从中科院宁波工业技术研究院(筹)传来消息,该院先进制造所光电功能材料与器件团队采用将超声波与化学共沉淀相结合的方法,制备出高烧结活性的石榴石相纳米前驱体粉体。相关研究发表于《美国陶瓷会志》,并已申请发明ZL。 在透明陶瓷材料的制备工艺中,前驱体粉体合成是重要的步骤之一。性能优异的前驱
细菌细胞的制备实验实验——细胞抽提物的制备
实验材料细胞试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材弗氏破碎器实验步骤1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为 2 μ
肌动蛋白7a突变导致先天性失聪失明
上海光源用户发现肌动蛋白7a突变如何导致先天性失聪失明 上海光源用户香港科技大学(科大)生命科学部讲座教授张明杰及他的研究团队2月11日在《科学》(Science 2011, 331, 757)杂志上发表了题为 Structure of MyTH4-FERM Domains in
肌动蛋白丝的组装和去组装的调节
微丝的组装和去组装受到细胞质内多种蛋白的调节,这些蛋白能结合到微丝上,影响其组装去组装速度,被称之为微丝结合蛋白(association protein)。 微丝的组装先需要“核化”(nucleation),即几个单体首先聚合,其它单体再与之结合成更大的多聚体。Arp复合体(Actin rel
技术和方案13-已固定细胞的肌动蛋白染色
试剂、试剂盒PBS固定液实验步骤鬼笔环肽专一性地结合 F 肌动蛋白,荧光标记的鬼笔环肽染细胞与肌动蛋白抗体的染色模式类似。1.在 500 ml 三角瓶中振荡培养 25 ml 酵母菌至密度为 2X107 个/ml。2.添加 17 ml 10% 甲醛(EM 电子显微级)到培养基中至终浓度 4%,在酵母菌
预聚体法、丙酮法制备水性聚氨酯的方法介绍
自乳化法制水性聚氨酯最常用的方法有预聚体分散法和丙酮法。预聚体法即在预聚体中导人亲水成分,得到一定粘度范围的预聚体,在水中乳化同时进行链增长,制备稳定的水性聚氨酯(水性聚氨酯-脲)。 丙酮法属于溶液法,是以有机溶剂稀释或溶解聚氨酯(或预聚体),再进行乳化的方法。在溶剂存在下,预聚体与亲水性扩链
细菌中制备基因组DNA实验——小量制备
真核生物的一切有核细胞(包括培养细胞)都能用来制备基因组 DNA。真核生物的DNA是以染色体的形式存在于细胞核内,因此,制备DNA的原则是既要将DNA与蛋白质、脂类和糖类等分离,又要保持DNA分子的完整。实验方法原理提取DNA的一般过程是将分散好的组织细胞在含SDS(十二烷基硫酸钠)和蛋白酶K的溶液
质粒DNA的小量制备实验——煮沸小量制备法
实验方法原理当菌体在NaOH和 SDS溶液中裂解时,蛋白质与DNA发生变性,当加入中和液后,质粒DNA分子能够迅速复性,呈溶解状态,离心时留在上清中;蛋白质与染色体DNA不变性而呈絮状,离心时可沉淀下来。推荐采用本方案从1-24个菌落培养液中制备少量的质粒DNA,尽管该方案十分快捷,但制备的DNA的
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备 核糖体及多核糖体的分离 70S核糖体的纯化 多核糖体的纯化 将核糖体解离为大亚基和小亚基 实验材料
细菌细胞的制备实验实验
细胞抽提物的制备核糖体及多核糖体的分离70S核糖体的纯化多核糖体的纯化将核糖体解离为大亚基和小亚基实验材料细胞 试剂、试剂盒弗氏破碎缓冲液
细菌细胞的制备实验实验
实验材料 细胞试剂、试剂盒 弗氏破碎缓冲液匀浆缓冲液仪器、耗材 弗氏破碎器实验步骤 1. 将 5~10 g 新鲜或冻存的细胞沉淀物垂悬于弗氏破碎缓冲液中或者适当的匀浆缓冲液中。通常 4L 的大肠杆菌培养物可以获得大约 7.5 g 的细胞沉淀。2. 悬液中加入无 RNase 的 DNase 至终浓度为