家兔椎间盘细胞培养实验——贴块法

家兔椎间盘细胞培养可以:(1)获得家兔椎间盘细胞;(2)用于椎间盘相关课题研究;(3)用于家兔模型研究。实验方法原理首先建立家兔椎间盘细胞的体外培养系统,其中,第一组给予纯氧,另外3组给予不同浓度的臭氧:30 ug/ml,60 ug/ml和80 ug/ml,然后于15 min及30 min后,采用台盼蓝细胞排斥试验计算椎间盘细胞的活细胞率。实验材料家兔试剂、试剂盒培养液DMEMHanks’缓冲液胎牛血清胰岛素转铁蛋白亚硒酸盐青霉素链霉素仪器、耗材培养皿培养瓶烧瓶试管眼科剪、眼科镊CO2 培养箱pH 计恒温水浴实验步骤一、实验步骤 1. 组织块贴块法 (1)取材:空气栓塞法处死家兔后,在无菌状态下获取家兔椎间盘组织。置于准备好的DMEM 培养基(含双抗)。迅速带回到无菌超净台上。(2)剪切:在超净台上,进一步将周围组织分离,用Hanks'液冲洗数遍,直到冲洗液透明为止。眼 科剪刀将组织修剪为......阅读全文

初代细胞培养实验——消化培养法

初代培养或原代培养,可以用于:(1)从供体获取组织后的首次培养;(2)组织和细胞刚刚离体,生物性状尚未发生很大的变化,具有二倍体遗传性状,在供体来源充分、生物条件稳定的情况下(年龄、性别),在一定程度上能反映体内状态。实验方法原理合成培养基胰蛋白酶消化培养法,能把组织块分散成细胞团或单个细胞,便于细

特殊细胞培养实验_一、二倍体细胞培养法

实验方法原理二倍体细胞来源体内二倍体细胞,也即正常细胞的初代培养。初代培养细胞成功后能始终保持二倍体细胞性状,便成为二倍体细胞培养。二倍体细胞虽不难培养,但欲求长期呈旺盛地增殖生长、并保持二倍体细胞性状,亦非易事。为此必须采取一些有效的措施,一是低温冻存,二是妥善的培养方法。用反复传代的方法以求获得

特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法

实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排

病毒的培养方法实验——传代细胞培养法

实验方法原理从人及动物某些组织,特别是肿瘤组织,经多次传代可建立传代细胞系,这种细胞能无限地传代,某些传代细胞对病毒敏感范围较广,可用作病毒的分离鉴定,如HeLa 细胞,Hep-2 细胞及KB 细胞。三种细胞均来自人肿瘤组织细胞,HeLa 细胞来自子宫颈癌,Hep-2 细胞来自喉癌而KB 细胞来自上

关于组织块培养法的概述

  一、翻转干涸  1、将组织剪成1mm3左右的组织块  2、用PBS缓冲液清洗组织块3次  3、将组织块按照一定间距转入培养瓶内  4、轻轻将培养瓶翻转过来,将适量培养液加到非细胞生长面上,注意翻瓶时勿令组织小块流动,塞好瓶塞置36.5℃温箱培养2小时左右(勿超过4小时),使小块微干涸  5、从微

麻醉家兔、大鼠右室内压的测定实验

实验方法原理 心脏右心室内压(right ventricular pressure, RVP)的变化,主要反映右心室的收缩与舒张功能。右心室收缩与舒张功能的改变受到两个方面因素的影响,一是右心室心肌自身收缩、舒张性能的改变,二是肺循环内压力的变化,比如肺动脉高压(pulmonary

麻醉家兔、大鼠肺动脉压的测定实验

实验方法原理肺动脉压(pulmonary artery pressure PAP)的变化,主要反映肺循环及肺功能的变化,还可以间接地反映左心功能的变化。比如肺部疾患时,肺毛细血管内压改变,引起肺动脉压力改变。另外临床上还通过测量肺动脉毛细血管内压,又称为肺动脉楔压(pulmonary artery

药物对家兔动脉血压的作用实验

实验方法原理血压形成与心室射血、血管阻力和循环血量三个基本因素相关,通过神经—体液调节机制维持正常血压。传出神经药是一大类药物,或拟似神经递质,或拮抗神经递质,通过激动或阻断分布于心血管上的肾上腺素受体或胆碱受体,影响心肌收缩性、血管舒缩程度从而升高或降低血压。仪器、耗材家兔氨基甲酸乙酯肝素钠盐酸肾

麻醉家兔、大鼠肺动脉压的测定实验

实验方法原理 肺动脉压(pulmonary artery pressure PAP)的变化,主要反映肺循环及肺功能的变化,还可以间接地反映左心功能的变化。比如肺部疾患时,肺毛细血管内压改变,引起肺动脉压力改变。另外临床上还通过测量肺动脉毛细血管内压,又称为肺动脉楔压(pulmonary

麻醉家兔、大鼠右室内压的测定实验

实验方法原理心脏右心室内压(right ventricular pressure, RVP)的变化,主要反映右心室的收缩与舒张功能。右心室收缩与舒张功能的改变受到两个方面因素的影响,一是右心室心肌自身收缩、舒张性能的改变,二是肺循环内压力的变化,比如肺动脉高压(pulmonary hypertens

药物对家兔动脉血压的作用实验

实验方法原理 血压形成与心室射血、血管阻力和循环血量三个基本因素相关,通过神经—体液调节机制维持正常血压。传出神经药是一大类药物,或拟似神经递质,或拮抗神经递质,通过激动或阻断分布于心血管上的肾上腺素受体或胆碱受体,影响心肌收缩性、血管舒缩程度从而升高或降低血压。仪器、耗材 家兔氨基甲酸乙酯 肝素钠

SUPB15-细胞人Ph+急淋白血病细胞

原代动物细胞培养:1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。4

猪小肠上皮细胞

原代动物细胞培养:1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。4

hCMEC/D3永生化人脑微血管内皮细胞

原代动物细胞培养:1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。4

大鼠星型胶质细胞培养实验——酶消化法

大鼠星型胶质细胞培养可以:(1)用于神经系统发育、分化及再生等基础研究;(2)脑缺血预处理上调神经保护蛋白的机制研究;(3)脑损伤和脑疼痛的研究;(4)新蛋白的功能研究。实验方法原理大鼠星形胶质细胞原代培养后,作胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫细胞化学染色鉴定,应用缺氧D-Hanks'液及缺

特殊细胞培养实验_加支持物培养法

实验方法原理加支持物培养法是预先向培养容器中加入各种可使细胞贴附的支持物,进行培养的方法。待细胞贴附于支持物生长增殖后,可进行各种实验和观察。观察时可把支持物从瓶中抽出,能做各种技术处理,是研究工作中常用的方法之一。各种对细胞无毒性的如玻璃、塑料、鸡卵壳膜、胶原、硅橡胶、袋泡茶包装纸等,均可做支持物

小鼠胚胎干细胞培养实验——体外分化法

小鼠胚胎干细胞培养可以:(1)细胞保种;(2)用于干细胞研究;(3)用于细胞生理学、形态学等研究;(4)动物克隆。实验方法原理胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步

HeLa人宫颈癌细胞

HeLa人宫颈癌细胞注意事项:  原代动物细胞培养:1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组

细胞培养中有哪些要注意的问题

1、实验材料要新鲜,从活体分离材料后要低温保存,并尽快进行细胞分离实验。2、无菌操作。操作时用的培养液,可加平时细胞培养液5倍含量的青链霉素。3、用酶法分离细胞时,注意酶液的浓度和控制消化时间。贴块法分离细胞时,注意动作要轻柔,不要伤到细胞组织,组织块边缘尽量平整有利于细胞游离。4、培养液的选择。不

大鼠主动脉内皮细胞培养实验

大鼠血管内皮细胞培养可以:(1)用于血液流动性、防止血栓形成、调节血管张力等研究;(2)用于选择性通透性以及免疫调节等方面研究。实验方法贴块法实验方法原理贴块法适用于内皮细胞产量低的、管径较小血管的内皮细胞培养,其方法较酶消化法简便、经济。但缺点使易混有成纤维细胞和平滑肌细胞,前者的贴壁时间和内皮接

免疫学实验皮肤斑贴实验介绍

  皮肤斑贴实验介绍:  皮肤斑贴实验是研究毒物对皮肤毒性的实验方法之一。把数层纱布折叠成一定大小(方形每边1cm,圆形直径1cm),将受试物原液或稀释液沾湿纱布后紧贴于皮肤上,外盖一层油纸或塑料薄膜,用绷带固定。一般12小时或24小后解开,观察局部反应。  皮肤斑贴实验正常值:  正常人为阴性(-

实验室经验实战总结贴

实验安全1.进入实验室要穿好工作服,不要存侥幸心里,如果,一不小心碰到酸,心爱的衣服烧个洞是小事,烧伤皮肤就麻烦了。不要嫌麻烦,一定要戴手套才做对身体有危害的实验,要对自己的身体负责。2.实验前后清洁洗手,如果,实验中途去休息喝水的时候,也要洗手,不要以为刚才的实验药品没什么毒性,生命很重要,小心为

特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验

实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每

家兔血液酸碱度变化与血气分析实验

实验方法原理呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。在不同生理状态下,呼吸运动所发生的适应性变化有赖于神经系统的反射性调节,其中较为重要的有呼吸中枢、肺牵张反射以及外周化学感受器的反射性调节。因此,体内外各种刺激可以直接作用于中枢部位或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。代谢性酸中毒的特征是血浆HCO

麻醉家兔、大鼠中心静脉压的测定实验

实验原理中心静脉压(central venous pressure CVP)是用来反映右心房内压力变化的一个指标。右心房内压力的变化受到两个因素的影响:第一是上下腔静脉回流的情况,比如大量失血或者丢失体液而发生低血容量性休克时,回心血量明显减少,右心房内压力会降低,中心静脉压降低;第二是右心

家兔血液酸碱度变化与血气分析实验

实验方法原理 呼吸运动是呼吸中枢节律性活动的反映。在不同生理状态下,呼吸运动所发生的适应性变化有赖于神经系统的反射性调节,其中较为重要的有呼吸中枢、肺牵张反射以及外周化学感受器的反射性调节。因此,体内外各种刺激可以直接作用于中枢部位或通过不同的感受器反射性地影响呼吸运动。代谢性酸中毒的特征是血浆HC

麻醉家兔、大鼠中心静脉压的测定实验

实验方法原理中心静脉压(central venous pressure CVP)是用来反映右心房内压力变化的一个指标。右心房内压力的变化受到两个因素的影响:第一是上下腔静脉回流的情况,比如大量失血或者丢失体液而发生低血容量性休克时,回心血量明显减少,右心房内压力会降低,中心静脉压降低;第二是右心室内

麻醉家兔、大鼠中心静脉压的测定实验

实验方法原理 中心静脉压(central venous pressure CVP)是用来反映右心房内压力变化的一个指标。右心房内压力的变化受到两个因素的影响:第一是上下腔静脉回流的情况,比如大量失血或者丢失体液而发生低血容量性休克时,回心血量明显减少,右心房内压力会降低,中心静脉压降低;第二是右心室

大鼠乳鼠成骨细胞培养实验_酶消化法

大鼠乳鼠成骨细胞培养培养用于:(1)获得大鼠乳鼠成骨细胞;(2)骨修复的细胞学机制研究。实验方法原理取材于出生2~3 d 小鼠颅骨,以含20%胎牛血清的DMEM培养液进行培养,采用胶原酶消化法分离成骨细胞,并进行细胞接种与传代。采用胶原酶消化法分离培养成骨细胞是一种可靠、简便、快速的细胞原代分离培养

神经胶质细胞培养实验_胰蛋白酶消化法

实验材料大鼠试剂、试剂盒CMF-Hanks液胰蛋白酶DMEM F12仪器、耗材水浴锅培养箱实验步骤一、原代培养1.  选用生后1周的新生大白鼠,用碘酒,酒精棉球消毒,断头取其大脑皮层组织。 2.  解剖显微镜下,剥离脑膜,切除大脑髓质部分。 3.  将大脑皮质在无Ca2+、Mg2+Hanks液(CM